屈洪波
- 作品数：25 被引量：124H指数：7
- 供职机构：郴州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默HIF-2α表达对低氧下乳腺癌干细胞微球体富集的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨沉默低氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)表达对低氧下乳腺癌干细胞(breast cancerstem cells,BCSCs)微球体富集的影响。方法:构建HIF-2αRNA干扰慢病毒载体,并转染至MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot检测HIF-2αmRNA及蛋白表达;MTT检测MCF-7细胞在不同氧浓度下增殖活性;显微镜下观察低氧下BCSCs微球体形成情况;有限稀释法检测微球体细胞单克隆形成能力;RT-PCR检测微球体细胞干细胞相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达。结果:成功构建了HIF-2α基因siRNA慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot结果显示干扰组细胞HIF-2αmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与未转染组及空载体组比较,低氧下RNA干扰组细胞增殖活性及BCSCs单克隆形成能力明显降低(P<0.05);RT-PCR结果亦显示RNA干扰组BCSCs相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧能够诱导和强化MCF-7细胞乳腺癌癌干细胞样特性,而沉默HIF-2α表达可抑制低氧下BCSCs富集,提示HIF-2α有望成为乳腺癌治疗新的靶点。
- 屈洪波范原铭韩明利陈鑫吴诚义汤为学
- 关键词：MCF-7
- 胰高血糖素瘤的诊治现状被引量：3
- 2014年
- 胰高血糖素瘤是一种罕见的消化道神经内分泌肿瘤,发病率约为13.5/2000万,占所有神经内分泌肿瘤的1％以下.自本病被发现至2012年,我国仅有61例被报道.因其罕见,临床医生对本病认识不足,极易漏诊、误诊,为此作者对相关文献进行复习并作一综述.
- 刘毫吴诚义朱之坤屈洪波韩明利曾妮
- 关键词：胰高血糖素瘤神经内分泌肿瘤诊治临床医生消化道发病率
- 胰高血糖素瘤1例报道及文献复习
- 2014年
- 目的探讨胰高血糖素瘤的临床特征及诊治方法。方法报道重庆医科大学附一院新发胰腺胰高血糖素瘤临床案例1例,并对该病相关文献进行复习。结果胰高血糖素瘤主要来源于胰腺α2细胞,少数来自于胃或十二指肠的氨前体摄取和脱羧细胞,以坏死性溶解性游走性红斑、糖尿病、消瘦、贫血等为主要临床表现,手术疗效理想。结论胰高血糖素瘤是一种临床上罕见的消化道神经内分泌肿瘤,手术切除是其最为有效的治疗手段。
- 刘毫吴诚义朱之坤屈洪波
- 关键词：糖尿病胰高血糖素瘤胰腺
- FOXC2介导Hedgehog/Gli信号通路对乳腺癌侵袭及迁移的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨FOXC2介导Hedgehog/Gli信号通路通过调控上皮间质转化(EMT)途径参与乳腺癌侵袭及迁移的机制。方法应用不同浓度环靶明(Cyclopamine)处理乳腺癌MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率及计算药物半数抑制浓度(IC50);采用Cyclopamine或沉默FOXC2基因表达以阻断Hedgehog/Gli信号通路活化;通过Transwell小室体外侵袭实验及划痕实验分别检测阻断Hedgehog/Gli信号通路对MDA-MB-231细胞侵袭及迁移影响;Western blotting检测阻断前后Hedgehog/Gli信号通路分子Smoothened(Smo)、Gli1和EMT相关标志物FOXC2,E-cadherin及Vimentin蛋白表达变化。结果与空白对照组比较,Cyclopamine可显著地抑制MDA-MB-231细胞增殖并呈现时效-量效关系,48 h的IC50为25μmol/L。Transwell小室体外侵袭实验及划痕实验均显示,与未转染组及Control-siRNA组相比,FOXC2-siRNA组和Cyclopamine组细胞穿膜数及迁移率均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting显示,与未转染组及Control-siRNA组相比较,FOXC2-siRNA组及Cyclopamine组Smo、Gli1及FOXC2蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。而沉默FOXC2表达可显著降低Vimentin蛋白表达及增加E-cadherin蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOXC2通过介导Hedgehog/Gli信号通路从而调控EMT促进乳腺癌侵袭及迁移,提示阻断该信号通路有望成为乳腺癌靶向治疗新线索。
- 屈洪波罗迪贤段丽丽胡雄强吴诚义
- 关键词：FOXC2上皮间质转化
- 沉默叉头框C2基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞的化疗增敏作用被引量：2
- 2013年
- 目的 观察沉默叉头框C2 （FOXC2）基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞多西紫杉醇化疗敏感性的影响.方法 通过脂质体介导将FOXC2短发卡RNA干扰表达质粒FOXC2-小干扰RNA（siRNA）转染至MDA-MB-231细胞,并检测转染48 h后的FOXC2 mRNA及蛋白表达；荧光显微镜观察72 h后的细胞凋亡形态学；流式细胞术检测72 h后的细胞凋亡率及细胞周期.结果 与未转染组细胞及空载体组细胞比较,干扰组细胞出现典型凋亡形态学改变,且FOXC2 mRNA及蛋白表达明显降低（P＜0.05）；噻唑蓝（MTT）显示干扰组细胞对多西紫杉醇敏感性增加,半数抑制浓度（IC50）由（6.08±1.23） mg/L降至（0.65 ±0.01） mg/L；同时,干扰组细胞早期凋亡率为（20.01±0.19）％,明显高于其他3组（P＜0.05）,且S期及G0/G1期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增多（P＜0.05）.结论 以siRNA下调FOXC2表达可有效诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,并增强其对多西紫杉醇的化疗敏感性.
- 屈洪波吴诚义范原铭曾妮汤为学
- 关键词：乳腺癌多西紫杉醇脱噬作用增敏作用
- 肿瘤干细胞与血管新生的研究进展
- 2011年
- 肿瘤生长及转移依赖于新生血管的形成,大量研究认为肿瘤干细胞与血管新生之间存在密切联系,肿瘤干细胞可能转分化为内皮细胞参与新生血管生成,并通过分泌促血管生长因子、基质衍生因子和低氧诱导因子参与对血管新生的调控。
- 屈洪波吴诚义
- 关键词：肿瘤干细胞血管新生血管内皮生长因子
- 沉默FOXC2对TGF-β_1诱导的MCF-7细胞上皮-间质转化的逆转作用被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨沉默叉头框C2(FOXC2)表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人乳腺癌MCF-7细胞上皮-间质转化(EMT)的逆转作用和对乳腺癌侵袭性的影响。方法:将体外培养的MCF-7细胞用5μg/L TGF-β1处理,相差显微镜观察细胞形态学变化;免疫荧光检测EMT相关标志物表达。慢病毒介导的FOXC2-siRNA载体转染至TGF-β1诱导成功的MCF-7细胞,以RT-PCR和Western blotting方法检测FOXC2及EMT相关标志物上皮性钙黏蛋白(E-cad)、紧密连接蛋白1(CLDN1)、纤维连接蛋白1(FN1)mRNA及蛋白表达;Transwell小室模型检测沉默FOXC2表达对TGF-β1诱导的MCF-7细胞侵袭性的影响。结果:TGF-β1可诱导MCF-7细胞向间质样细胞表型转换,并上调间质样标志物FN1表达和下调上皮样标志物E-cad及CLDN1表达;而沉默FOXC2表达可逆转已间质化的MCF-7细胞恢复至上皮表型,并降低其侵袭性。结论:TGF-β1可诱导人乳腺癌MCF-7细胞发生EMT并增加其侵袭性,且TGF-β1这种诱导作用能被FOXC2-siRNA所逆转,并降低细胞的侵袭能力。
- 屈洪波吴诚义范原铭韩明利陈鑫汤为学
- 关键词：上皮-间质转化FOXC2MCF-7细胞转化生长因子Β
- 缺氧对人乳腺癌细胞微球体生长及化疗耐药性的影响
- 2013年
- 目的研究缺氧对人乳腺癌细胞微球体(mammospheres,MSs)培养效率及其化疗耐药性的影响。方法分别在常氧及缺氧条件下对人乳腺癌MDA-MB-231细胞进行无血清悬浮培养,观察记录MSs的生长速率及体积变化。MTT比色法检测各组人乳腺癌微球体细胞(mammospheres-derived cells,MSDCs)及MDA-MB-231细胞在不同浓度、不同药物作用下的存活率(survive rate,SR)。免疫组织荧光化学法检测HIF-2α、ABCG2在各组MSDCs中的表达。Western blot检测乳腺癌干细胞标志物CD44及ALDH1在各组MSDCs中的表达。Western blot及Real-time RT-PCR检测HIF-2α、ABCG2、P-gp及MDR1在各组MSDCs中的表达。结果缺氧组MSs生长速率及球体体积优于常氧组。缺氧组MSDCs在不同化疗药物作用下的SR高于常氧组MSDCs及MDA-MB-231细胞(P<0.05)。免疫组织荧光化学检测发现HIF-2α及ABCG2在缺氧组MSDCs中的表达强于常氧组。Western blot检测发现CD44与ALDH1在缺氧组MSDCs中表达量高于常氧组。缺氧组MSDCs中HIF-2α、ABCG2及P-gP蛋白表达量均高于在常氧组MSDCs及MDA-MB-231细胞中的表达(P<0.05)。Real-time RT-PCR检测发现缺氧组MSDCs中HIF-2α、ABCG2及MDR1 mRNA的表达量均高于常氧组MSDCs及MDA-MB-231细胞(P<0.05)。结论以HIF-2α为启动因子,ABCG2、MDR1及P-gP等为效应因子的生物化学反应可能是缺氧状态加快MSs的成球速度、提高其球体体积、增强其化疗耐药能力的可能机制。
- 范原铭屈洪波吴诚义侯婧韩明利
- 关键词：化疗耐药
- 上皮间质转化与乳腺癌的研究进展被引量：2
- 2012年
- 在肿瘤演进中,原发性肿瘤中的一些细胞再次激活调控胚胎发育被称之为上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的潜在途径,使得上皮细胞获得间质细胞特征,更易发生侵袭和转移。EMT的异常激活与高侵袭基底型乳腺癌相关,提高了细胞生存能力、获得干细胞潜能及增强其侵袭转移能力,EMT化的癌干细胞对常规治疗更具有抵抗性。本文总结了与EMT相关的调控因子及癌干细胞在乳腺癌进展中的作用。
- 屈洪波吴诚义
- 关键词：上皮间质转化癌干细胞乳腺癌
- 沉默HIF-2α对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰（RNAi）沉默HIF-2α表达对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响。方法将慢病毒介导HIF-2α基因RNAi载体质粒和空载体质粒转染至MCF-7细胞株，G418筛选获得稳定转染细胞株。将空载体组及干扰组MCF-7细胞注射接种至裸鼠左右侧背部近后肢皮下，比较成瘤时间，肿瘤体积及瘤体重量等；Western印迹检测移植瘤组织中HIF-2α、CIM4、OCT-4及KLF4蛋白表达。结果成功构建HIF-2α基因RNAi慢病毒载体，沉默HIF-2α表达降低乳腺球的形成；与空载体组比较，干扰组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低（P〈0．05）。Western印迹显示干扰组HIF-2α蛋白表达量（0．42±0．01）明显低于空载体组（0．89±0．03，P〈0．05），CD44蛋白表达量（0．21±0．01）明显低于空载体组（0．78±0．03，P〈0．05），OCT-4蛋白表达量（0．134-0．01）明显低于空载体组（0．68±0．03，P〈0．05），KLF4蛋白表达量（0．34±0．01）明显低于空载体组（0．72±0．03，P〈0．05）。结论RNAi沉默HIF-2α表达明显抑制低氧下乳腺球细胞裸鼠移植瘤生长，其机制可能通过下调干细胞标志物表达抑制乳腺癌细胞自我更新和增殖，HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗新的靶点。
- 屈洪波范原铭韩明利曾妮朱之坤刘红谢佳吴诚义汤为学
- 关键词：RNA干扰移植物
