廖晓莹
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 重组hβc基因的慢病毒颗粒的包装及其在NB4细胞过表达研究被引量：1
- 2011年
- 本研究旨在通过慢病毒介导的基因转移方法,使NB4细胞稳定过表达hβc基因,观察过表达hβc基因的NB4细胞在IL-3或GM-CSF作用下分化行为的改变,探讨hβc基因与NB4细胞分化之间的关系。以本实验室前期构建的携带hβc基因ORF的克隆质粒为模板,用带PmeI和BstBI酶切位点的引物PCR获得目的基因,酶切PCR产物,定向克隆至慢病毒载体pRRLSIN.cPPT.PGK/IRES/GFP.WPRE,构建含hβc基因的慢病毒载体,经酶切及测序鉴定其正确性,将构建好的重组质粒与包装质粒一起共转染293T细胞,收集培养液上清,感染NB4细胞,用Western blot鉴定目的基因在NB4细胞中的表达情况。以转染空载体慢病毒的NB4细胞(简称NB4-blank细胞)为对照,观察过表达hβc基因的NB4细胞(简称NB4-hβc细胞)在IL-3、GM-CSF、全反式维甲酸(ATRA)作用下分化行为的改变。结果表明:含有hβc基因的重组慢病毒载体能高效转染NB4细胞,并使NB4细胞稳定过表达hβc基因。NB4-hβc细胞,在IL-3或GM-CSF作用下CD11b表达水平上调,但上调的幅度均低于ATRA作用下的上调幅度,且未观察到形态学改变。NB4-Blank细胞在IL-3或GM-CSF作用下CD11b表达水平无明显变化。结论 :通过慢病毒介导的基因转移方法,成功地使NB4细胞稳定过表达hβc基因,IL-3或GM-CSF在一定程度上能诱导过表达hβc基因的NB4细胞向中性粒细胞分化,但不能使其完全分化成熟。
- 杨荣辉吴勇字友梅李先芳廖晓莹陈元仲
- 关键词：慢病毒NB4细胞IL-3
- 全反式维甲酸和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化前后微小RNA表达变化被引量：7
- 2012年
- 目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化前后微小RNA（miRNA，miR）表达变化。方法采用全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）诱导APL细胞系NB4细胞分化，瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态，流式细胞术检测细胞表面标志CDllb的表达，用实时定量lit-PCR检测miRNA表达谱miR-15b、miR-16、miR-34a、miR-107、miR-124a、miR-146、miR-155、miR-181a、miR-223、miR．342、let＇／c等miRNA的表达水平，用2法计算miRNA相对表达水平。收集15例APL初诊和15例APL缓解期患者骨髓单个核细胞（MNC），用RT-PCR检测MNCmiRNA的表达水平，用2法计算miRNA表达水平。结果ATRA作用NB4细胞96h，miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平均显著上调，分别为对照组的3．40、4．22、5．41、20．03和5．29倍，As203作用NB4细胞96h，miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平也显著上调，分别为对照组的3．62、2．49、2．58、4．27和1．94倍，除miR-15b外，ATRA处理组miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平上调程度均高于As：O，处理组，其中尤以miR-223为甚。ATRA和As。O，治疗后缓解期APL患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223和miR-342表达水平（2值）分别为0．4137、0．6367、0．1260、0．0522、0．6611和0．0280，而APL初诊患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223、miR-342表达水平分别为0．0751、0．2022、0．0425、0．3064、0．1733和0．0090，APL缓解期miR-15b、miR-16、miR．107、miR-223和miR．342表达水平高于APL初诊者（P值均〈0．05），而APL缓解期miR-181a表达水平低于APL初诊者（P〈0．05）。结论特定miRNA参与APL细胞分化过程。
- 吴勇李先芳杨景辉廖晓莹陈元仲
- 关键词：细胞分化微小RNA
- 白血病细胞TGF-β受体表达研究
- 白血病是造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病，主要表现为白血病细胞增殖失控，分化及凋亡受阻。生理情况下，血细胞的增殖、分化、凋亡受正、负调控细胞因子调节，处于动态平衡，维持着造血的稳定。TGF-β1是造血系统主要负调控因子之一...
- 廖晓莹
- 关键词：TGF-Β1TGF-ΒRI白血病细胞
- 文献传递
- ATRA和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞分化前后microRNA表达变化
- 目的：研究急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化前后微小RNA(miRNA,miR)表达变化。方法：采用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2 03)诱导APL细胞系NB4细胞分化,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,用...
- 吴勇李先芳杨景辉廖晓莹陈元仲
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病细胞分化微小RNA
- 文献传递
- 全反式维甲酸诱导NB4和HL-60细胞分化过程中髓系分化相关的转录因子表达变化被引量：1
- 2011年
- 造血干细胞的自我更新、增殖、分化与成熟过程与转录因子调节密切相关。转录因子功能失调可能导致急性髓系白血病的发生。为研究急性髓系白血病细胞体外分化过程中转录因子表达变化,采用全反式维甲酸诱导NB4和HL-60细胞分化模型,瑞氏-姬姆沙染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志CD11b的表达,定量RT-PCR检测转录因子PU.1,C/EBPα,ε,γ,GATA1-,GATA2-mRNA的表达水平,用2-△△CT法对转录因子mRNA表达水平进行相对定量分析,并与对照组比较。结果表明:ATRA作用NB4细胞96小时,PU.1,C/EBPεmRNA表达水平显著上调,分别达到处理前的5.75倍和6.16倍;而C/EBPα,γ,GATA1-,GATA2-的mRNA表达水平均显著下调,仅为处理前的62%,31%,63%,8.7%,尤以GATA2-的表达水平下降最为显著。在HL-60细胞,ATRA作用96小时,PU.1,C/EBPα,ε的mRNA表达水平上调,分别为处理前1.97,1.95,2.35倍,而C/EBPγ,GATA1-,GATA2-的mRNA表达水平均显著下调,仅为处理前的20%,21%,18%。结论:转录因子异常表达在急性髓系白血病的发病中起重要作用。
- 吴勇李先芳杨景辉廖晓莹黄慧芳陈元仲
- 关键词：HL-60NB4转录因子
- 全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程中IL-3受体系统表达变化被引量：6
- 2010年
- IL-3受体(IL-3R)是异源二聚体膜受体,由相应的α亚基(IL-3Rα,GM-CSFRα,IL-5Rα)和β共同亚基(hβc)组成,α亚基能够特异性与相应的配体结合,β共同亚基通过与相应α亚基组成高亲和力的受体,传递细胞信号,调节造血祖细胞的增殖与分化。为研究IL-3受体系统(IL-3Rα,GM-CSFRα和hβc)在髓系分化中的作用,采用实时定量RT-PCR检测全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞分化过程IL-3Rα,GM-CSFRα和hβc的表达变化,同时应用DNA序列分析检测IL-3Rα,GM-CSFRα和hβc mRNA序列变化。结果显示:全反式维甲酸处理NB4细胞后,细胞发生分化,同时细胞增殖受抑制。ATRA作用24小时NB4细胞IL-3Rα mRNA表达水平显著下调,但随着细胞分化,其表达水平又逐渐恢复;而GM-CSFRα mRNA和hβc的mRNA表达水平则随着细胞分化逐渐上调。DNA序列分析表明,NB4细胞分化前后IL-3Rα和GM-CSFRα的mRNA序列没有变化,而NB4细胞分化前hβc的mRNA序列以截短突变为主,NB4细胞分化后hβc的mRNA序列以野生型为主。结论:NB4细胞存在IL-3受体异常表达,表现为高表达IL-3Rα和hβc的胞内区截短突变,两者在NB4细胞的过度增殖与分化受阻的过程起重要作用。
- 吴勇杨景辉李先芳廖晓莹黄慧芳陈元仲
- 关键词：IL-3全反式维甲酸NB4细胞
- 吉西他滨联合顺铂、地塞米松治疗原发纵隔弥漫大B细胞淋巴瘤近期疗效分析被引量：4
- 2012年
- 目的观察吉西他滨联合顺铂、地塞米松(GDP方案)治疗原发性纵隔弥漫大B非霍奇金淋巴瘤(PMLBCL)的疗效。方法将20例PMLBCL分为两组,一组采用CHOP方案化疗,一组采用GDP方案化疗,比较两组患者治疗效果。结果 GDP方案组完全缓解(CR)率为70%,部分缓解(PR)率为20%,有效率为90%;CHOP组CR率为50%、PR率为40%、有效率为90%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GDP方案近期疗效与CHOP方案相当,副作用可以耐受,可以作为PMLBCL治疗的一种选择。
- 陈少谊罗金光张江灵廖晓莹杨爱武
- 关键词：吉西他滨地塞米松疗效
