张予
- 作品数：8 被引量：35H指数：4
- 供职机构：复旦大学附属中山医院肝癌研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 喜滴克对肝癌相关基因及AFP表达的调节被引量：8
- 2002年
- [目的]观察细胞分化剂喜滴克对肝癌相关基因及血清AFP水平的调节。[方法]人移植性高转移肝癌裸鼠模型LCI D20,随机分为对照组(C组) ,喜滴克低剂量组(L组) ,喜滴克中剂量组(M组) ,喜滴克高剂量组(H组)和喜滴克高剂量 +5 Fu组(H +CT组)。接种后第11天给药 ,连续20天 ,计算抑瘤率 ,测定血清AFP水平和观察腹腔转移。应用RT PCR方法 ,研究基因的表达。应用Western印迹检测整合素β1和E 钙粘素的表达 ,观测高转移人肝癌细胞株MHCC97对纤维连接蛋白的粘附抑制作用。[结果]不同剂量组的喜滴克均呈现一定的抑瘤作用。喜滴克治疗组血清AFP水平比对照组有明显下降 ;对原癌基因c myc、N ras、c jun、c fos及mmp 9基因的表达有明显的下调作用(P<0.01)。喜滴克亦能下调整合素β1蛋白表达和增加E 钙粘素的表达 ;有抑制高转移人肝癌细胞株MHCC97对纤维连接蛋白粘附的能力。[结论]喜滴克对肝癌相关基因及AFP表达的调节可能是其抑制肿瘤生长和转移的分子基础。
- 刘银坤李岩马晓明鲍卫华陈军薛琼高东梅张予叶胜龙汤钊猷
- 关键词：肝肿瘤原癌基因甲胎蛋白
- 转移潜能不同人肝癌细胞系差异蛋白Annexin1的功能解析被引量：5
- 2005年
- 解析比较蛋白质组学筛出的差异蛋白Annexin1的生物学功能,证实其是否在肝癌转移复发中发挥作用.分别以RT-PCR、蛋白质印迹及细胞免疫化学对差异蛋白Annexin1在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达情况进行再验证,然后构建Annexin1反义表达质粒,转染高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97H,通过对MHCC97H细胞的运动、侵袭、凋亡、生长周期、MMPs分泌、克隆形成等系列检测,观察目的蛋白表达降低对其生物学行为的影响,特别是转移特性的影响.验证结果均证实Annexin1在有转移潜能人肝癌细胞系MHCC97L、MHCC97H中呈高表达.转染Annexin1反义重组表达质粒后,MHCC97H细胞中Annexin1的表达被成功抑制.依据MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASAnnexin1,MHCC97H/pcDNA3.1(+),MHCC97H的检测排序,转染反义重组质粒后的MHCC97H细胞穿过上室底膜的细胞数(运动实验)分别为:11.13±3.31,18.88±2.03,21.86±3.38;穿过人工基底膜细胞数(侵袭实验)分别是:16.43±2.23,16.40±1.57,16.86±1.52;细胞平均集落形成率(克隆形成实验)分别为:(14.33±0.46)%,(19.35±0.49)%,(20.25±0.35)%;MHCC97H细胞凋亡比例(FCM分析)依次为22.2%,6.44%,6.97%;细胞周期各时相的比例依次为:G0-G1期79.5%/76.34%/80.5%,S期13.26%/14.4%/9.69%,G2-M期7.25%/9.26%/9.81%;细胞培养上清MMP9的定量结果依次为:26.37!g/L,28.00"g/L,31.90#g/L;MMP2定量结果依次为29.46$g/L,26.37%g/L,26.53&g/L.明胶酶谱分析细胞培养上清显示,转染Annexin1反义重组表达质粒的MHCC97H细胞分泌的MMP9活性与对照比变化不明显.综合上述结果发现,转染Annexin1反义表达质粒MHCC97H细胞运动能力及集落形成率明显降低,凋亡细胞的比例增加,而侵袭潜能,细胞周期时相,细胞分泌MMP2、MMP9的量均变化不明显.提示,差异蛋白Annexin1可能通过影响细胞凋亡和细胞运动在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用.
- 崔杰峰刘银坤代智周海君宋海燕张丽君张予孙瑞霞陈洁汤钊猷
- 关键词：人肝癌细胞系
- 原发性肝癌粘附分子表达和靶向抗粘附干预复发转移的研究
- 刘银坤周信达孙婧景姚min汤钊猷贺建宇张春东吴志全吴欣薛琼陈洁高东梅孙瑞霞陈军鲍卫华赵燕张予
- 项目来源 1、“九五”国家医学科技攻关项目（96-906-10-15）： 恶性肿瘤的综合防治研究 提高常见恶性肿瘤疗效的方法和方案研究-原发性肝癌复发转移的临床与基础研究 2.美国中华医学基金会（CMB）项目（93-...
- 关键词：
- 关键词：复发转移原发性肝癌粘附分子
- 不同银染法和上样模式对双向凝胶电泳影响的初步分析被引量：1
- 2003年
- 崔杰峰刘银坤申华莉张予孙瑞霞
- 关键词：银染法双向凝胶电泳蛋白质组学
- 从建“小肝癌”档案剖析征集中的难点及对策
- 2001年
- 王临江陈春华张予
- 关键词：小肝癌临床医疗实践卫生事业单位档案管理归档
- 转移潜能不同人肝癌细胞系差异蛋白S100A4的再验证及功能分析被引量：3
- 2005年
- 目的解析比较蛋白质组学筛出的差异蛋白S100A4的生物学功能,验证其是否在肝癌转移复发中发挥作用。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、蛋白免疫印迹(WB)及细胞免疫化学法分别对差异蛋白S100A4在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达情况进行再验证;然后,用构建S100A4反义表达质粒,转染高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97H,通过系列与侵袭转移有关的检测,观察S100A4表达降低对MHCC97H细胞生物学行为的影响。结果验证结果均证实,S100A4在有转移潜能人肝癌细胞系MHCC97L、MHCC97H中呈高表达。转染S100A4反义重组表达质粒后的侵袭试验显示,穿过人工基底膜细胞数分别是:5.0±1.4[MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASS100A4],16.4±1.6[MHCC97H/pcDNA3.1(+)],16.9±1.5(MHCC97H);运动试验穿过上室底膜的细胞数为:11.1±3.3[MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASS100A4],18.9±2.0[MHCC97H/pcDNA3.1(+)],21.9±3.4(MHCC97H);细胞培养上清液中MMP9的定量结果依次为18.2[MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASS100A4]、28.0[MHCC97H/pcDNA3.1(+)]、31.9ng/ml(MHCC97H);MMP2定量结果依次为29.8[MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASS100A4]、26.4[MHCC97H/pcDNA3.1(+)]、26.5ng/ml(MHCC97H)。明胶酶谱分析细胞培养上清液基质金属蛋白酶(MMP)显示,S100A4表达降低的MHCC97H细胞分泌的MMP9活性明显弱于对照组。结论pcDNA3.1(+)ASS100A4转染MHCC97H细胞后,细胞的运动与侵袭潜能均明显降低。细胞MMP9分泌量也显著降低。而细胞分泌MMP2的量则变化不明显。提示差异蛋白S100A4通过增强肝癌细胞的运动侵袭能力和上调MMP的分泌参与肝癌细胞的侵袭转移过程。
- 崔杰峰刘银坤申华丽张丽君张予孙瑞霞陈洁代智宋海燕
- 关键词：S100A4人肝癌细胞系差异蛋白PCDNA3细胞培养上清液逆转录聚合酶链反应
- 不同转移潜能人肝癌细胞系的差异表达蛋白质组分析及意义被引量：11
- 2004年
- 目的 比较研究转移性肝癌细胞系中蛋白质表达谱的改变 ,筛查在转移中起重要作用的关键蛋白质分子。方法 用双向电泳 (2 DE)及液相色谱 电喷雾 串联质谱 (LC ESI MS/MS)对 3种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97L、MHCC97H的差异蛋白质组进行分析。结果 Hep3B、MHCC9TL和MHCC9TH分别平均检测到 976± 112个蛋白点 (n =3)、10 92± 4 0个蛋白点 (n =3) ,和 888± 15个蛋白点 (n =3) ,以其中MHCC97L图谱为参考胶 ,Hep3B、MHCC9TL和MHCC9TH分别与其匹配的平均匹配点数为 6 37± 37个 (n =3)、771± 16个 (n =2 )和 5 89± 5 1个 (n =3) ,平均匹配率分别为6 5 7% ,72 1% ,6 6 2 %。不同胶间蛋白质斑点的位置偏差 [等电聚焦 (IEF) ]方向为 (2 95± 0 95 )mm ,聚丙烯酰胺凝胶电泳方向为 (2 87± 0 88)mm。Hep3B、MHCC97L、MHCC97H中有 35 9个蛋白质点匹配。与Hep3B比 ,MHCC97L有 10 3个点未匹配 ,相差 10倍以上的上调点和下调点分别为 5 7个和 4 9个 ;MHCC97H有 113个点未匹配 ,相差 10倍以上的上调点有 4 7个 ,相差 10倍以上的下调点有 5 2个。质谱可鉴定出S10 0A4 ,S10 0A6 ,S10 0A11,Annexin1等 2 6种胶内差异蛋白质。结论 与不转移肝癌细胞相比 ,转移性肝癌细胞有明显的差异性蛋白表达谱?
- 崔杰峰刘银坤宋海燕张予孙瑞霞陈洁冯钜涛于雁灵申华莉杨芃原
- 关键词：肝细胞癌细胞系
- 肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的研究被引量：8
- 2005年
- 通过比较研究不同转移潜能肝癌细胞系中核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的差别,筛查与转移相关的重要糖蛋白.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(2-DE)和凝集素印迹技术联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立3种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97L和MHCC97H的核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱.比较研究发现,不同转移潜能肝癌细胞呈现不同的SDS-PAGE/LCA凝集素印迹图谱,MHCC-97H和MHCC-97L在35～45 ku和45～60 ku间出现了Hep3B未见的条带.在核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱中,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别平均检测到(55±7)个蛋白质点(n=3),(60±6)个蛋白质点(n=3),(61±4)个蛋白质点(n=3);以各自双向电泳图谱为参考胶,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别与其匹配的平均匹配点数为(25±3)个(n=3),(30±4)个(n=3),(28±3)个(n=3).该图谱中,与Hep3B相比,MHCC97L有13个点未匹配,其中9个点为Hep3B(-)/MHCC97L(+);MHCC97H有9个点未匹配,其中6个点为Hep3B(-)/MHCC97H(+),MALDI-TOF-MS/MS可鉴定出Annexin1、Keratin 8等12种差异蛋白质.这些结果证实了不同转移潜能的肝癌细胞有明显的核心岩藻基化糖蛋白差异性表达.提示肝癌转移可能与这些差异糖蛋白及其核心岩藻糖基化有关.
- 代智刘银坤崔杰峰冯钜涛宋海燕陈洁孙瑞霞李娜申华莉张予杨芃原
- 关键词：肝癌细胞
