张斌
- 作品数:114 被引量:406H指数:12
- 供职机构:西南民族大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 基于E2蛋白BVDV腺病毒载体疫苗的制备及对小鼠的免疫原性分析
- 2024年
- 选用牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)SWU-Z6株的E2基因序列为模板,针对HEK293细胞密码子偏嗜性优化合成全长E2基因,利用AdMax腺病毒包装系统制备Ad5-BVDV-E2。采用PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot验证了E2蛋白在HEK293细胞中成功表达,并通过肌注、滴鼻和口服免疫途径来免疫小鼠,同时设立BVDV商业灭活苗组和PBS空白对照组。结果显示,经酶切鉴定和测序验证表明,优化后的E2基因已正确克隆至腺病毒穿梭载体pDC316中,并获得重组质粒pDC316-E2,将pDC316-E2和腺病毒骨架质粒共转染至HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad5-BVDV-E2。PCR验证了E2基因成功插入到腺病毒载体基因组中,IFA和Western blot证实了重组腺病毒能够正确表达E2蛋白,并具有良好的生物学活性。通过肌注、滴鼻和口服均能产生较高的抗体水平,其中Ad5-BVDV-E2肌注组小鼠加强免疫1周后抗体滴度最高达到1∶102400。结果表明,成功制备了Ad5-BVDV-E2,能诱导机体产生较强的体液免疫反应,表明Ad5-BVDV-E2具有临床应用的潜力。
- 张家祺李格格朱庆杨洋喻琦胜陈涛云任玉鹏张斌张斌
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒E2蛋白免疫原性
- 赤麂源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定被引量:3
- 2014年
- 从四川省某养殖场病死赤麂心血中分离到1株致病菌,通过细菌分离培养、菌落形态、细菌革兰染色镜检、生化鉴定及16SrDNA片段扩增鉴定为多杀性巴氏杆菌。药敏试验结果表明,该菌对先锋霉素、头孢他定、头孢氨噻肟及头孢吡肟等敏感,对大多数抗菌药物高度耐药,可以选取这些敏感药物对该养殖场赤麂进行治疗。
- 周跃塔曾泽费磊张斌岳华
- 关键词:赤麂多杀性巴氏杆菌
- 青藏高原牦牛感染BVDV和BEV的分子流行病学调查被引量:14
- 2016年
- 为了解青藏高原地区牦牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛肠道病毒(BEV)的感染情况,应用RT-PCR对青藏高原地区(西藏、青海、四川和云南)共计222份出现腹泻症状的牦牛粪便样品开展了分子流行病学调查。从222份样品中,检出44份BVDV阳性,BVDV阳性检出率为20%(95%CI:15.5%~25.6%);检出65份BEV阳性,BEV阳性检出率为29.4%(95%CI:24.1%~35.0%);BVDV/BEV混合感染阳性率为4.8%(95%CI:2.5%~8.0%)。结果表明,所有被检地区牦牛均存在BVDV和BEV感染,且部分地区感染较为严重,有混合感染的情况。研究结果旨在为青藏地区牦牛腹泻的综合防控措施提供基本数据,丰富BVDV和BEV的分子流行病学调查资料。
- 陈新诺张朝辉徐林唐川余劲李劲廖昆汤承张斌
- 关键词:牦牛牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查
- 副猪嗜血杆菌和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌双重PCR检测方法的建立及应用被引量:2
- 2013年
- 针对副猪嗜血杆菌(Hps)16SrRNA序列和猪传染性胸膜放线杆菌(App)ApxIVA基因序列各设计一对引物,分别能扩增大小为822bp和346bp的目的基因片段,建立快速鉴定Hps和App的双重PCR方法。特异性试验表明,该方法对波氏杆菌、巴氏杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、猪圆环病毒2型、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,该方法与单项PCR的敏感性一致,最低可检测核酸浓度Hps 38pg/mL,App 3.8pg/mL;最低检测细菌含量Hps 8.9cfu,App 26.9cfu。利用该方法检测Hps和App参考菌株、临床分离株、36份临床肺组织样本和人工感染的猪肺组织样本。结果显示,该方法对参考菌株和临床分离株全部检出,36份临床样本中检出Hps 18份,App为阴性,与单项PCR检测结果一致,人工感染组织样本也均能检出。表明该方法适用于Hps和App的临床快速检测。
- 余远迪曾泽岳华张斌
- 关键词:副猪嗜血杆菌双重PCR方法
- 一种水溶性动物疫苗及其制备方法和用途
- 本申请涉及动物疫苗领域,具体公开了一种水溶性动物疫苗及其制备方法和用途。这种水溶性动物疫苗包括水溶性聚合物佐剂和抗原;水溶性聚合物佐剂与抗原的质量比为0.3‑5:1;水溶性聚合物佐剂包括普朗尼克、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物和...
- 汪露张斌陈朝喜
- HPS OmpP2表面环状结构诱导猪肺泡巨噬细胞炎性因子mRNA转录的研究被引量:1
- 2019年
- 副猪嗜血杆菌(HPS)对养猪业造成了严重的影响。外膜蛋白P2(OmpP2)是HPS外膜中最丰富的蛋白,能介导宿主的炎症反应。试验通过人工合成OmpP2的表面环状结构(Loop)氨基酸序列体外刺激猪肺泡巨噬细胞(PAMs),探究OmpP2中不同Loop在炎性反应中的作用。用HPS血清4型SC096菌株OmpP2作为参照,通过real-time PCR方法测量8个Loop刺激PAMs细胞6 h后IL-1ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8、CCL-4、CCL-5细胞因子mRNA的转录水平。与对照细胞相比,8个Loop均能诱导PAMs中IL-1ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8、CCL-4、CCL-5细胞因子mRNA转录出现不同程度的上调,其中Loop7和Loop8刺激细胞后细胞因子mRNA转录水平上调显著(P<0.05)。提示Loop7和Loop8是OmpP2发挥促炎功能的一个重要组成结构。
- 周叶贺超王丹岳华任玉鹏任玉鹏
- 不同来源的3株牛病毒性腹泻病毒对小鼠的致病性分析被引量:6
- 2018年
- 为分析牛病毒性腹泻病毒(BVDV)对小鼠的致病性,选取BALB/c小鼠为试验动物,攻毒组通过腹腔注射接种不同来源的3株牦牛源BVDV1-DJ2、BVDV1-Z6和OregonC24V毒株,对照组接种DMEM培养基。分别于接种后第5、7、10天收集小鼠血液和组织,并通过血常规、病理组织学、荧光定量PCR等方法对病毒感染小鼠的致病性进行研究。结果显示:攻毒后,Z6组小鼠表现的临床症状较DJ2组严重;攻毒组淋巴细胞、白细胞、血小板含量显著降低;荧光定量PCR结果显示,BVDV在肺和肝中的检出率Z6组明显高于DJ2组;HE染色可见攻毒组肝静脉内出现炎性细胞浸润、肠绒毛上皮细胞坏死和脱落,还可见脾内吞噬细胞增多和脾小结反应性增生、肺泡萎缩和出血等病理变化,与OregonC24V组相比,Z6组病变最严重,DJ2组较轻。以BALB/c小鼠为试验动物,通过腹腔注射的方式可以为BVDV感染小鼠的致病性及模型的构建提供数据支持和指导。
- 阮文强陈新诺任玉鹏覃思楠汤承张斌
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒BALB/C小鼠
- 牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:31
- 2018年
- 本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示:125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为71.20%,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45%。此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原。
- 何琪富郭紫晶李然周军岳华张斌张斌
- 关键词:牛冠状病毒RT-PCR方法牦牛腹泻呼吸道疾病综合征
- 一种猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白及其在制备间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用
- 本发明涉及一种猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白及其在制备间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用。本发明提供的间接ELISA抗体检测试剂盒包含以猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白制备的包被抗原、酶标一抗、酶标二抗、标准阳性血清...
- 张斌谢远鑫岳华汤承王远微
- 一种牛病毒性腹泻病毒SMU-Z6/1a/SC/2016分离株及其应用
- 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒SMU‑Z6/1a/SC/2016分离株及其应用。其中牛病毒性腹泻病毒的保藏号为CCTCC NO:V201813,保藏于中国典型培养物保藏中心,该牛病毒性腹泻病毒具有较高的毒价,而且该病毒...
- 张斌阮文强汤承岳华王远微张丹丹
- 文献传递