张晶
- 作品数：23 被引量：85H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学文学更多>>
- 黄色荧光蛋白的结构对Annexin A5凋亡检测功能的影响探究被引量：1
- 2018年
- 细胞凋亡早期,磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内侧翻转到细胞膜外侧, Annexin A5可与PS高亲和力结合,这是其检测凋亡的原理。绿色荧光探针标记的Annexin A5和碘化丙啶联合标记应用于流式细胞术进行细胞凋亡检测,该方法灵敏度高、特异性好、效率高,已成为目前全世界通用的细胞凋亡检测方法。除FITC-Annexin A5外, Annexin A5-EGFP融合蛋白是另一个常用的简单、可信、易于制备的凋亡检测探针。黄色荧光蛋白是绿色荧光蛋白的一种突变体,其荧光向红色光谱偏移。目前,有三种改良的黄色荧光蛋白:Citrine、Venus、Ypet,这三种改良的蛋白荧光更亮、更稳定、成熟更快。该文选择Citrine、Venus、Ypet来制备Annexin A5凋亡检测探针,通过原核表达和分离纯化Annexin A5-Citrine、Annexin A5-Venus和Annexin A5-Ypet融合蛋白,获得了高产量的可溶性蛋白,探究这三种融合蛋白与凋亡细胞的结合能力,筛选出适用于流式检测的黄色荧光蛋白标记的Annexin A5,为后续研究奠定基础。以pET28a-Annexin A5-EGFP-his重组质粒为模板,利用分子生物学手段又构建了重组质粒pET28a-Annexin A5-Citrine-his、pET28a-Annexin A5-Venus-his、pET28a-Annexin A5-Ypet-his,然后通过Ni柱亲和层析纯化获得了这三种蛋白,纯度约为90%。该文重点比较了三者检测细胞凋亡的能力,流式细胞仪检测结果显示, Annexin A5-Citrine、Annexin A5-Venus和Annexin A5-Ypet融合蛋白均可以识别和标记凋亡细胞,它们与凋亡细胞的亲和力分别是3 113.0 nmol/L、444.3 nmol/L和391.6 nmol/L。三者与凋亡细胞的亲和力差异很大,通过对Citrine、Venus、Ypet的氨基酸序列进行分析,该文初步发现了决定三个黄色荧光蛋白与凋亡细胞亲和力的关键氨基酸。
- 高梦月王云轲黄先杰张晶华子春
- 关键词：膜联蛋白A5纯化凋亡检测流式细胞术
- 特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子基因表达的比较研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨男性特发性不育患者外周血和睾丸组织中无精子因子（AZF）基因表达的临床意义。方法特发性不育患者62例，其中严重少精子症29例，无精子症33例。抽取患者外周血样本检测，8对引物为sY84和sY86（AZFa区），sY127和sY134（AZFb区），sY254和sY255（AZFc区）及内对照SRY（sY14）和ZFY。PCR检测包括MixA：SRY（sY14）-ZFY-sY84-sY134-sY255和MixB：SRY（sY14）-ZFY-sY86-sY127-sY254；穿刺获得患者睾丸标本，Trizol方法提取总RNA，反转录为cDNA。PCR检测包括SRY（sY14）-DFFRY—RBM—DAZ-β-actin。结果外周血PCR结果显示：62例患者中AZF基因微缺失12例（19．4％），其中无精子症组9例，严重少精子症组3例。睾丸组织RT—PCR结果显示：62例均可见SRY阳性表达；RBMmRNA无表达2例，RBM和DAZmRNA无表达1例，DAZmRNA无表达12例，其中3例外周血细胞内DAz基因正常。结论特发性不育患者睾丸组织存在AZF基因表达缺失，睾丸组织RT-PCR检测有助于确定患者病因，结合外周血PCR检测有助于指导睾丸精子穿刺-胞浆内单精子注射治疗。
- 宋宁宏杨杰张炜王增军华立新殷长军吴宏飞周作民张晶
- 关键词：Y染色体无精子因子聚合酶链反应逆转录聚合酶链反应不育男(雄)性
- 凋亡抑制蛋白c-FLIP(L)对肺癌细胞增殖迁移的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:近来凋亡抑制蛋白c-FLIP(L)作为新的抗肿瘤治疗靶点受到关注,为了探讨c-FLIP(L)在肺癌细胞迁移中的作用,我们建立了c-FLIP(L)高表达稳定细胞株,以比较c-FLIP(L)在肺癌细胞株中表达水平与其细胞迁移能力的关系。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞株进行转染c-FLIP(L)真核表达质粒,通过G418筛选出多株c-FLIP(L)高表达单克隆,以此为平台研究c-FLIP(L)在肿瘤细胞迁移过程中的作用。通过实时荧光定量QPCR及Western Blot检测稳定株中c-FLIP(L)表达水平;划痕实验及Transwell法检测cFLIP(L)高表达对肺癌细胞迁移的影响,并通过荧光骨架蛋白染色观察细胞形态的改变。结果:QPCR和Western Blot显示A549稳定细胞株中c-FLIP(L)均为高表达;Wound healing和Transwell实验表明c-FLIP(L)高表达肺癌细胞迁移能力明显上升,并初步探索了c-FLIP(L)表达对细胞骨架的影响。结论:凋亡抑制蛋白c-FLIP(L)的高表达能促进肺癌A549细胞的迁移。
- 刘万郑倩倩华子春张晶
- 关键词：肺癌凋亡抑制蛋白
- 翻转课堂在细胞生物学教学实践中的应用被引量：19
- 2015年
- 细胞生物学是生物学中发展迅速的前沿科学之一,涉及内容广泛,随着生命科学与技术的发展,其内容不断增多,急切需要课程教学改革与其相适应。翻转课堂是一种新型的教学模式,提倡以学生为主体的现代教学理念。我们结合细胞生物学课程的自身特点,探究翻转课堂引入细胞生物学教学的可行性。在翻转课堂尝试中,进行了以设置问题为引导的课前学习和以解决和探索问题为主导的课堂教学,从教学实践和教学效果分析中得到一些教学经验,为促进翻转课堂在细胞生物学教学中实施与发展提供参考。
- 张晶薛雅蓉华子春
- 关键词：细胞生物学教学改革
- 谈细胞生物学教学方法的改进被引量：3
- 2013年
- 结合细胞生物学教学的现状,我们尝试了几种教学方法的改进,即通过增加"专家讲座"教学、组织课堂讨论与互动、引入教学动画与视频,取得了良好的教学效果。本文将着重阐述如何将这些教学方法应用于课堂,以探索更优化的细胞生物学教学形式。
- 张晶陈江宁华子春
- 关键词：细胞生物学教学互动
- 凋亡抑制蛋白c-FLIP参与细胞迁移和浸润的机制研究
- 刘万张晶华子春
- 一种新假定的解旋酶RuvBL1的抗凋亡活性研究
- 2005年
- 目的:探索解旋酶RuvBL1与细胞凋亡之间的关系。方法:构建RuvBL1真核表达重组质粒,采用磷酸钙法转染L929细胞进行瞬时表达,通过转化生长因子(TNF)α和放线菌素D诱导细胞凋亡,检测RuvBL1蛋白对凋亡的影响。结果:质粒构建后酶切得到约1.8kb长的片断,与RuvBL1的全长基因大小一致;转染L929细胞,可表达出相对分子质量为55000的蛋白,与理论值相同。RuvBL1组细胞凋亡率为40%,而对照组为70%;RuvBL1的抗凋亡活性呈剂量依赖性。结论:RuvBL1具有很好的抗凋亡活性,这一发现可能为凋亡相关疾病的治疗提供新的靶点。
- 张晶陈允梓华子春
- 关键词：DNA拓扑异构酶基因表达细胞凋亡
- 1991年梅雨锋暴雨的数值模拟和诊断分析
- 张晶
- 丁玲早期创作的转型——从《梦珂》到《水》
- 丁玲的创作经历过几次较大的转型,每次转型都与当时的社会环境和时代思潮紧密呼应,其创作历程大致可以分成三个阶段：第一阶段是从初登文坛到她至延安之前,即1927年至1936年；第二个阶段是从延安时期(1936年)至建国初；第...
- 张晶
- 关键词：《梦珂》《水》
- 文献传递
- PTP1B在炎症性疾病中的功能与应用研究
- 越来越多的研究表明，酪氨酸磷酸化酶1B(protein tyrosine phosphatase1B，PTP1B)介导的信号通路在诸多炎症性疾病包括溃疡性结肠炎和糖尿病及其并发症等的发病过程中发挥重要调控作用，但是PTP...
- 张晶
- 关键词：溃疡性结肠炎磷酸化酶蛋白表达细胞病理学
- 文献传递
