张红烨
- 作品数：14 被引量：59H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 精浆果糖速率检测法的初步评价被引量：6
- 2015年
- 目的建立精浆果糖速率检测法并进行性能评价。方法利用速率法检测精浆果糖浓度,在全自动生化分析仪上建立检测参数,评估该方法的试剂空白吸光度、准确性、重复性和线性范围,与临床常用的精浆果糖吲哚显色法进行比较。结果试剂空白吸光度平均为0.032,空白吸光度变化率(△A/min)平均为0.000 2。3份高、中、低果糖浓度的精浆样本重复测定10次的变异系数(CV)值分别为1.40%、1.57%和2.79%。回收率范围为95.77%~100.97%。精浆果糖浓度在5~35 mmol/L时,具有良好的线性关系(r2=0.997 8)。以精浆果糖吲哚显色法作为对照试剂,速率法作为实验试剂,两者对115例精浆样本的检测结果差异无统计学意义[(20.92±8.62)mmol/L vs(21.15±8.37)mmol/L,t=-1.157,P=0.250],且呈显著正相关(r2=0.939 5,P<0.01)。结论本研究建立的精浆果糖速率检测法有较低的试剂空白,重复性和准确性较好,与目前临床使用的吲哚显色法有很好的一致性。本法操作简单、快速,精浆样本无需稀释,适合临床大批量样本的检测筛查,可节省人力和试剂成本。
- 陆金春卢坤刚张红烨冯瑞祥
- 关键词：果糖精浆速率法
- 全自动精浆锌检测方法的建立及评价被引量：3
- 2015年
- 目的建立全自动精浆锌检测方法并对其准确性、重复性和线性范围等进行评价。方法利用终点法检测精浆锌浓度，并在全自动生化分析仪上建立检测参数，并评估该方法的试剂空白吸光度、准确性、重复性和线性范围，同时与目前临床上常用的化学比色法精浆锌检测试剂盒进行比较。结果试剂空白吸光度平均为0．028。3份高、中、低锌浓度的精浆样本重复测定10次，其CV值分别为0．67％、2．04％和4．18％。采用回收率分析来评价准确性，回收率范围为95．68％～103．81％。精浆锌浓度在0．2～7mmol／L范围时，具有良好的线性关系（r^2=O．9944）。以精浆锌检测试剂盒（化学比色法）作为对照试剂，全自动检测法作为试验试剂，两者对115例精浆样本的检测结果没有显著性差异[（2．51±1．26）mmol／Lvs（2．54±1．17）mmol／L，t=-1．589，P=-O．115]，且呈显著正相关（，=0．9686，P〈O．01）。结论本研究建立的全自动精浆锌检测法有较低的试剂空白，重复性和准确性较好，且与目前临床上使用的化学比色法有很好的一致性。该法操作简单、快速，精浆样本无需稀释，适合临床上大批量样本的检测筛查，大大节省了人力和试剂成本。
- 陆金春卢坤刚张红烨冯瑞祥
- 关键词：精液
- 精液中性粒细胞弹性蛋白酶的研究进展被引量：9
- 2011年
- 影响男性生殖的因素很多,生殖道感染是其中重要因素之一。精液中性粒细胞弹性蛋白酶(polymor-phonuclear neutrophil elastase,PMNE)作为男性生殖道感染尤其是隐性感染诊断的重要炎症指标,对男性生育能力有潜在的负面影响。精液PMNE浓度不仅与精液白细胞数、精浆ROS水平显著相关,而且与其他炎症相关细胞因子如IL-6、IL-8、TNF-α水平等密切相关。PMNE对精子质量亦有影响,可以削弱精子活力,影响精子形态和DNA完整性等。精液中存在PMNE抑制剂,可与PMNE形成复合物,两者比例的失衡可以促进慢性炎症的发生,进而可能导致男性不育。检测精液PMNE的方法主要为酶免疫分析法,但检测方法仍需标准化,诊断标准尚需统一。
- 冯瑞祥卢坤刚张红烨陆金春
- 关键词：中性粒细胞弹性蛋白酶男性生殖生殖道感染精液
- 精浆尿酸的检测及其与精液参数的相关性研究被引量：8
- 2007年
- 目的:建立精浆尿酸(UA)的检测方法并探讨精浆UA水平与精液参数的相关性。方法:根据检测血清UA的方法加以改良建立检测精浆UA的方法,并观察批内变异和不同技术人员检测结果之间的差异以评价方法的可接受性。同时分析138例男性精浆UA水平与患者年龄、禁欲时间、精液量、pH、精子密度、活动率、a+b级精子百分率和正常形态精子百分率之间的相关性。结果:精浆UA检测方法的批内变异为9.16%,2位技术人员的检测结果没有显著性差异(P=0.541)。精浆UA水平与正常形态精子百分率呈正相关(r=0.350,P=0.025),与精子活动率和a+b级精子百分率有呈正相关的趋势(r=0.147和0.156,P=0.085和0.068),而与精液分析其他参数如精液量、pH、精子密度、禁欲时间以及患者年龄等无相关性。结论:通过对血清UA检测方法加以改良可以建立可接受的精浆UA检测方法。精子形态学、活动率及a+b级精子百分率可能与精浆UA水平高低有关。
- 张红烨陆金春张瑞生夏永祥黄宇烽
- 关键词：尿酸精浆精液参数
- 精浆α葡糖苷酶全自动检测方法的建立及评价被引量：7
- 2014年
- 目的：建立精浆α葡糖苷酶活性全自动检测方法并对其准确性、重复性和线性范围等进行评价。方法：利用速率法检测精浆α葡糖苷酶活性,并在全自动生化分析仪上建立检测参数,并评估该方法的试剂空白吸光度、准确性、重复性和线性范围。结果：试剂空白吸光度平均为0.002 14,空白吸光度变化率（△A/min）平均为0.015 26。3份高、中、低α葡糖苷酶活性的精浆样本重复测定10次的CV值分别为2.52%、0.36%和0.76%。采用比对试验的方法来评价准确性,40份精浆标本每个浓度点的相对偏差范围为-5.52%~7.54%,均低于15%的要求。精浆α葡糖苷酶活性在76~647 U/L范围时,具有良好的线性关系（r〉0.99）。结论：本研究建立的全自动精浆α葡糖苷酶活性检测法有较低的试剂空白,重复性和准确性较好,且有较宽的线性范围。该法操作简单、快速,精浆样本无需稀释,适合临床上大批量样本的检测筛查,大大节省了人力和试剂成本。
- 张红烨陆金春卢坤刚冯瑞祥
- 关键词：精浆
- Tris—HC1缓冲液温度系数的测定及意义被引量：5
- 1993年
- Tris—HCl缓冲液稳定,与生理体液的相容性好(Tris—HCl与钙、镁离子不会形成沉淀;相反,磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀),而且相同pH、相同浓度的Tris—HCl 缓冲液的离子强度比磷酸盐缓冲液的离子强度低,这对酶类测定尤为重要,因为大离子强度易致有些酶失活.因此,有时用Tris—HCl
- 张红烨孟泽
- 关键词：缓冲液温度系数
- 中国118家实验室精液分析状况的调查被引量：10
- 2010年
- 为在实验室内和实验室间实现精液分析标准化和进行质量控制,必须了解目前男科实验室精液分析的状况。为此,对中国大陆地区的部分精液分析实验室进行了调查。设计的"男科实验室精液分析调查表",包含36个问题,涉及精液分析的相关内容。本研究发放调查表145份,回收有效调查表118份。调查显示,53.6%(59/110)的实验室采用目测法检测精液量;对液化不全精液,70.9%(73/103)的实验室未作任何处理;精子密度、活动率、存活率及形态学分析以手工普通光学显微镜分析和计算机辅助精液分析(CASA)系统检测并存;精子染色方法达5种以上;精子自身抗体检测以酶联免疫吸附试验(ELISA)为主;仅有27.1%(32/118)的实验室开展了精浆生化项目检测。而且,在参与调查的所有实验室中,无一家实验室开展精液分析的室内和室间质量控制。总之,在中国大陆,男科实验室精液分析的方法和报告方式很不统一。采用的精液分析方法与《世界卫生组织人类精液分析实验室手册》第4版推荐的方法也不一致。本研究提示,为使不同实验室的检测结果具有可比性且有意义,中国男科实验室目前使用的精液分析方法急需标准化和质量控制。
- 陆金春张红烨胡毓安黄宇峰吕年青李铮任丹青
- 关键词：实验室调查表精液分析
- 介绍一种新的精子计数稀释液
- 1995年
- 介绍一种新的精子计数稀释液张红烨关键词精液常规，精子计数，稀释液精子计数在精液常规中尤为重要。传统的碳酸氢钠－甲醛稀释液对精子的保护性较弱，精子易断裂。断裂的精子有时不易识别，往往使计数的结果偏低，而且碳酸氢钠－甲醛稀释液长时间保存易混浊，从而影响计...
- 张红烨
- 关键词：精液常规精子计数稀释液精液检查
- 全文增补中
- 全自动精浆γ-L-谷氨酰转肽酶检测方法的建立及评价被引量：1
- 2013年
- 目的：建立精浆γ-L-谷氨酰转肽酶（GGT）全自动检测方法并对其准确性、重复性和线性范围等进行评价。方法：利用速率法检测精浆GGT活性，并在全自动生化分析仪上建立检测参数，并评估该方法的试剂空白吸光度、准确性、重复性和线性范围，同时与目前临床上常用的精浆GGT检测化学比色法试剂盒（南京欣迪）进行比较。结果：试剂空白吸光度平均为0．0476，空白吸光度变化率（AA／min）平均为0．000168。3份高、中、低GGT活性的精浆样本重复测定10次的变异系数值分别为0．26％、4．83％和1．60％。采用比对试验的方法来评价准确性，40份精浆标本每个浓度点的相对偏差范围为-13．38％-11．05％，均低于15％的要求。精浆GGT活性在299～1833U／L范围时，具有良好的线性关系（r〉0．99）。以精浆GGT检测化学比色法试剂盒作为对照试剂，全自动检测法作为试验试剂，两者对115例精浆样本的检测结果呈显著正相关（r=0．981，P〈0．01），Kappa值为0．776（P〈0．05），符合率为90．43％。结论：本研究建立的精浆GGT全自动检测法有较低的试剂空白，重复性和准确性较好，且与目前临床上使用的化学比色法有很好的一致性。该法操作简单、快速，精浆样本无需稀释，适合临床上大批量样本的检测筛查，大大节省了人力和试剂成本。
- 陆金春卢坤刚张红烨冯瑞祥
- 关键词：精浆
- 风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达
- 2010年
- 目的:表达风疹病毒(RV)E1特异肽段的重组融合蛋白。方法:经过双酶切鉴定和测序鉴定的阳性重组质粒载体pGEX-2T/E1-N,转化到感受态大肠杆菌BL21后,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,并对诱导条件进行优化。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化重组融合蛋白,SDS-PAGE鉴定。结果:用IPTG可以诱导E1特异肽段的重组融合蛋白表达,37℃诱导时,最佳诱导剂浓度为1mmol/L,最佳诱导时间为4h。诱导温度从37℃降至16℃时,重组融合蛋白以可溶性形式表达,用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化获得了纯化的重组融合蛋白。结论:利用原核表达系统可以获得纯化的风疹病毒E1特异肽段的重组融合蛋白。
- 张红烨陆金春夏永祥冯瑞祥
- 关键词：风疹病毒重组质粒原核表达
