张翠华
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小分子干扰RNA对人类白细胞抗原DRβ1^＊ 0401基因表达的抑制作用被引量：4
- 2005年
- 陈巧林李茹张翠华栗占国
- 关键词：人类白细胞抗原DR基因表达小分子T细胞受体病理过程抗原肽
- 类风湿关节炎患者外周血T细胞抑制性多肽的研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨HLADRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308317变构肽对类风湿关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的影响。方法选取27例HLADRB1阳性的RA患者,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。采用固相法合成HA308317变构肽,并检测RA患者外周血T细胞对这些多肽的反应性;及多肽对白细胞介素(IL)2、γ干扰素分泌及CD69表达的影响。同时进一步观察HA308317变构肽对CII263272或HA308317多肽介导的T细胞激活的抑制作用。结果变构肽刺激T细胞增殖的阳性率分别为7.4%(APL1)、3.7%(APL2)和3.7%(APL3),明显低于CII263272和HA308317原型肰(62.2%和52.9%),3条变构肽的刺激指数也明显低于原型肽(均P<0.01)。并且,其诱导IL2、γ干扰素分泌的水平及CD69的表达亦下降(P<0.05)。与单独加入CII263272或HA308317原型肽的对照组相比,加入HA308317变构肽的T细胞增殖的刺激指数明显下降(P<0.05)。结论替换HA308317多肽中T细胞受体的接触残基产生了弱或非T细胞刺激肽,它们可能有效地抑制RA的T细胞免疫反应。
- 李霞李茹张翠华栗占国
- 关键词：外周血T细胞流感病毒血凝素密度梯度离心法T细胞激活CD69变构肽
- 流感病毒血凝素衍生肽对T细胞活化抑制作用的研究被引量：3
- 2005年
- 目的研究人类白细胞抗原(HLA)-DRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308-317变构肽在HLA-DR4限制性T细胞激活中的作用。方法采用固相法合成HA308-317原型肽及其变构肽。通过计算机模拟及流式细胞术分析HA308-317原型肽及其变构肽与HLA-DR4分子的结合作用;并检测这些多肽对T细胞激活信号CD69表达和白细胞介素(IL)-2分泌的影响及对T细胞增殖的抑制作用。结果HA308-317变构肽能结合细胞表面HLA-DR4分子,对T细胞激活信号CD69表达和IL-2分泌无明显影响,并能抑制HA308-317原型肽诱导的T细胞活化。结论替换HA308-317多肽中识别T细胞受体(TCR)的氨基酸残基形成的HA变构肽可与HLA-DR4分子结合,而且可抑制其原型肽诱导的T细胞活化。
- 李霞李茹张翠华李博栗占国
- 关键词：流感病毒血凝素T细胞活化HLA-DR4衍生肽CD69变构肽
- RNAi对类风湿关节炎相关性人类白细胞抗原-DRβ1基因表达的抑制作用
- 设计人类白细胞抗原(HLA)-DRβ1*0401小分子干扰RNA双链体(siRNAs)和HLA-DRβ1*0405 siRNAs,通过Priess细胞RNAi实验筛选确定最佳HLA-DRβ1*0401 siRNA目标序列...
- 陈巧林张翠华栗占国
- 文献传递
- 小干扰RNA对类风湿关节炎相关的人白细胞抗原-DRB1＊0405蛋白表达的抑制作用被引量：1
- 2006年
- 目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB1*0405小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对类风湿关节炎(RA)相关的HLA-DRB1*0405蛋白表达的影响。方法构建HLA-DRB1*0405蛋白表达质粒siCHECKTM-2/HLA-DRB1*0405,同时针对HLA-DRB1*0405基因序列设计并构建6个小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒和1个针对无关序列的shRNA表达质粒。脂质体瞬时共转染两种质粒至人胚胎肾细胞293,以仅转染HLA-DRB1*0405蛋白表达质粒作为阴性对照,采用实时荧光定量PCR检测293细胞中HLA-DRB1*0405mRNA的表达,通过测定荧光素酶强度分析293细胞中HLA-DRB1*0405蛋白水平。结果所设计的6个HLA-DRB1*0405siRNA可不同程度的抑制HLA-DRB1*0405在293细胞中的表达,对mRNA水平,其抑制率最高可达89·25%,而在蛋白水平,其抑制率达46·70%。结论质粒介导的HLA-DRB1*0405siRNA可明显抑制HLA-DRB1*0405在人胚胎肾细胞株293中的表达,为利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制RA中HLA-DRB1介导的异常免疫反应提供了试验依据。
- 张翠华陈巧林王宗元栗占国
- 关键词：RNA干扰关节炎转染荧光素酶
- 类风湿关节炎患者外周血T细胞抑制性多肽的研究
- 研究人类白细胞抗原(HLA)-DRB1结合性HA308-317变构肽对类风湿关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的影响,为HA变构肽用于RA患者治疗提供依据。①单个或连续替换HA308-317中与T细胞受体(TCR)结合的...
- 李霞李茹张翠华栗占国
- 文献传递
- 干燥综合征特异性α-胞衬蛋白的抗原多肽表位筛选及鉴定
- α-胞衬蛋白(α-fodrin)与原发性干燥综合征(primarysjogren’s syndrome, pSS)的发病有密切关系,对本病的诊断具有参考意义。但是,α-胞衬蛋白在干燥综合征(SS)发病中的作用机制仍不清楚...
- 张翠华陈巧林黄彦弘栗占国
- 文献传递
- 免疫印迹法检测抗胆碱能毒蕈碱受体3抗体及其在干燥综合征诊断中的意义被引量：10
- 2005年
- 目的建立免疫印迹法(WB)检测抗毒蕈碱受体3(M3受体)抗体的方法,探讨该抗体对干燥综合征(SS)诊断的意义。方法建立WB测定抗M3受体抗体的方法,检测80例SS患者、80例其他风湿性疾病及40名正常对照者血清中的抗M3受体抗体,并分析该抗体与SS的临床及实验室指标的关系。结果抗M3受体抗体在80例SS患者中的阳性率为83.8%(67/80),而在系统性红斑狼疮(SLE)及正常人中分别为5.0%(2/40)和2.5%(1/40),类风湿关节炎(RA)中无1例阳性。抗M3受体抗体对SS的敏感性和特异性分别为83.8%和97.5%,阳性预测值为95.7%,阴性预测值为90.0%。抗M3受体抗体在抗SSA抗体、抗SSB抗体、琢-胞衬蛋白抗体阴性的SS患者血清中的阳性率分别为80.0%、82.5%及81.2%。该抗体在抗SSA抗体、抗SSB抗体及琢-胞衬蛋白抗体阳性的SS患者血清中的阳性率分别为87.5%、88.2%及85.4%。抗M3受体抗体阳性的SS患者与该抗体阴性的SS患者在口干、眼干、脏器受累的发生率,IgG、IgA、血沉(ESR)升高及抗核抗体(ANA)、类风湿因子(RF)阳性率方面无统计学意义。结论利用sf9细胞表达的重组M3受体蛋白可以检测SS患者血清中的抗M3受体抗体。该抗体是一种对SS诊断较为特异的标记性抗体之一。
- 赖蓓陈巧林张翠华王振刚栗占国
- 关键词：免疫印迹法抗体干燥综合征M3受体免疫性疾病
- 重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义被引量：2
- 2006年
- 目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。
- 陈巧林李晶张翠华何菁栗占国
- 关键词：Α-胞衬蛋白干燥综合征抗Α-胞衬蛋白抗体
