张黎黎
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院生物化学与遗传学系更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苦瓜核糖体失活蛋白MAP30的原核表达和生物活性研究被引量：3
- 2010年
- 目的:从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究。方法:从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a,转化Eoli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和纯化,梯度咪唑洗脱。MTT法分析生物学活性。结果:测序发现插入的MAP30基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,且MAP30主要以可溶形式表达。MTT法测定重组的MAP30具有生物学活性,且对肿瘤细胞的毒性远远大于对正常细胞的毒性。结论:本研究成功地构建了MAP30的表达系统,并实现了MAP30的可溶性表达,表达后的蛋白具有生物学活性,可用于抗体-毒素的肿瘤靶向药物的合成。
- 张黎黎丁倩詹金彪
- 关键词：苦瓜遗传学技术
