彭向雷
- 作品数：37 被引量：32H指数：3
- 供职机构：北京交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 一种抗呼吸道合胞病毒药物的高通量筛选方法和应用
- 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接...
- 何金生付远辉彭向雷郑妍鹏姜男许敏
- 文献传递
- 一种阿尔茨海默病致病基因及其应用
- 本发明公开了属于分子病理学领域技术领域的一种阿尔茨海默病致病基因及其应用，其cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还涉及含有所述阿尔茨海默病致病基因的重组载体、含有该重组载体的重组细胞、阿尔茨海默病致病基...
- 彭向雷管小亭何金生郑妍鹏张莹周淑杰
- 文献传递
- 人原代呼吸道上皮细胞培养及抗呼吸道合胞病毒活性
- 2024年
- 为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型。采集人呼吸道上皮细胞样本,分离细胞后建立hAEC的培养方法,并进行细胞形态和活力鉴定;在hAEC体系上检测小分子化合物RSV-A-4和6-MMPr的抗RSV活性及其细胞毒性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)与Time-of-addition assay技术,探讨RSV-A-4和6-MMPr的抑制RSV复制的作用机制。培养的hAEC经鉴定:其体外培养存活率可达93.51%;RSV-A-4和6-MMPr的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为(207.30±4.77)μmol/L和(3191.00±6.11)μmol/L,6-MMPr的半数细胞毒性浓度(Half maximal cytotoxic concentration,CC_(50))为(95526.00±10.97)μmol/L,而RSV-A-4对hAEC未见明显细胞毒性;RSV-A-4和6-MMPr均在RSV病毒基因组复制阶段抑制RSV复制。成功建立可用于抗RSV药物筛选及体外评价的hAEC培养体系,RSV-A-4和6-MMPr在细胞水平均能有效抑制RSV复制。
- 丁惠如赵敏程宁宁付远辉彭向雷虞结梅郑妍鹏何金生
- 关键词：呼吸道合胞病毒抗病毒活性
- 液相色谱-质谱在阿尔茨海默病研究中的应用
- 2013年
- 液相色谱-质谱联用(LC-MS)作为集高效分离与定性定量检测为一体的联用技术,近年来在化学、医学、药学和生物化学等领域获得了长足的发展,特别是由科研领域拓展到临床诊断,开启了疾病诊断技术的新篇章。阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD),又称老年性痴呆症,是现代社会第四大致死疾病。随着我国人口的快速老龄化,重视对AD的防治是实现健康老龄化以及国民经济持续发展的重要保障之一。本文对LC-MS的新进展进行了简介,并详细综述了近3年来其在AD研究中的应用,以期相关方法获得更好的理解与更多的关注。
- 田士军彭向雷郑妍鹏何金生洪涛
- 关键词：液相色谱-质谱阿尔茨海默病临床化学
- 利用DNA Assembly方法构建重组腺病毒载体
- 2021年
- 目的:建立一种基于DNA Assembly方法的重组腺病毒载体构建方法。方法:首先,通过设计合适的酶切位点及同源臂,采用了传统的限制性内切核酸酶连接方法和DNA Assembly方法获得63型猩猩腺病毒(Chimpanzee adenovirus serotype 63,ChAd63)的骨架质粒pChAd63。随后,采用Sca I单酶切携带EGFP基因的穿梭pShuttle63/EGFP,Hpa I单酶切pChAd63,以DNA Assembly方法,获得重组腺病毒载体pChAd63/EGFP。最后,在293细胞中拯救获得重组腺病毒rChAd63/EGFP。结果:采用DNA Assembly方法成功构建了重组腺病毒载体pChAd63/EGFP,并拯救出重组腺病毒rChAd63/EGFP。结论:DNA Assembly可用于重组腺病毒载体的构建,有利于提高重组腺病毒载体的构建效率。
- 黄蕾万常青刘美琴赵敏郑妍鹏彭向雷虞结梅付远辉何金生
- 关键词：重组腺病毒载体
- 一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗
- 本发明提供了一种共表达呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒融合前融合糖蛋白(preF)和黏附糖蛋白130‑230aa(G<Sub>130‑230</Sub>)的核苷酸序列及其制备方法，该序列包括preF和G<Sub>130‑23...
- 何金生付远辉彭向雷郑妍鹏
- 文献传递
- 一种呼吸道合胞病毒融合前F蛋白及其应用
- 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒融合前F蛋白及其应用，属于呼吸道合胞病毒疫苗技术领域。该融合前F蛋白是野生型F蛋白的第106位、第108位及第109位氨基酸由Arg突变为Asn后，第104位氨基酸由Asn突变为Cys、第1...
- 何金生马尧付远辉彭向雷郑妍鹏
- 文献传递
- 可用于辅助蛋白功能研究的人呼吸道合胞病毒双顺反子微型基因组的构建及拯救
- 2017年
- 【目的】构建可表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)双顺反子微型基因组cDNA克隆及重组质粒,并进行拯救,以探讨并验证RSV的聚合酶蛋白或辅助蛋白在RSV反向遗传学操作中的作用。【方法】利用全基因合成和分子生物学相结合的方法,在获得可分别表达EGFP和无生物活性蛋白的单顺反子微型基因组质粒pUC57-RSV-EGFP和pUC57-RSV-ORF1的基础上,进一步克隆至pBR322B载体,获得编码EGFP及无生物活性蛋白的双顺反子微型基因组质粒,经限制性内切酶和核酸序列分析正确后,与可表达4种辅助蛋白的辅助质粒共转染至BHK-T7细胞,通过荧光显微镜观察EGFP的表达以及RT-qPCR对EGFP mRNA的转录水平进行定量分析。【结果】成功构建了编码EGFP和无生物活性蛋白的RSV双顺反子微型基因组质粒pBR322B-RSVⅡ-EGFP,经与编码4种辅助蛋白的辅助质粒共转染至BHK-T7细胞,发现4种辅助蛋白对EGFP的表达具有不同的功能活性。【结论】以可表达EGFP报告基因的RSV双顺反子微型基因组重组质粒,实现了对4种辅助蛋白的功能验证,其中M2-1蛋白在双顺反子微型基因组拯救过程中具有转录延长的生物学活性。
- 郑元博张秀娟许敏姜男彭向雷付远辉郑妍鹏洪涛何金生
- 关键词：人呼吸道合胞病毒双顺反子辅助蛋白
- 一种呼吸道合胞病毒抗原蛋白的编码基因、抗原蛋白、重组载体、疫苗及应用
- 本发明提供了一种编码呼吸道合胞病毒融合前融合糖蛋白(preF)、核蛋白(nucleoprot ein，N)和转录延长/转录终止抑制因子(M2‑1)的核苷酸序列、重组载体、疫苗及应用，属于疫苗制备技术领域。本发明利用RSV...
- 付远辉何金生彭向雷郑妍鹏虞结梅
- DEK蛋白与细胞凋亡的研究进展被引量：7
- 2009年
- DEK蛋白是一种广泛存在于细胞核内的可磷酸化的核蛋白.研究认为DEK蛋白与DNA的特异性结合能够改变与其结合的DNA的拓扑结构,进而影响基因的活性.细胞应激反应与DEK蛋白有潜在的关系,在死亡受体介导的细胞凋亡过程中,DEK蛋白的磷酸化状态发生了变化.DEK蛋白的磷酸化、多聚腺苷化均能促使DEK蛋白从染色质上释放下来并最终到达细胞外成为导致某些自身免疫性疾病的抗原.近来研究显示,DEK蛋白与细胞凋亡密切相关,DEK蛋白的过表达对细胞凋亡的作用具有双重性,即促进或抑制细胞凋亡.
- 华颖胡红刚彭向雷
- 关键词：DEK细胞凋亡磷酸化CASPASE
