徐栋梁 作品数:5 被引量:13 H指数:3 供职机构: 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家质检总局科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
大蒜抗菌活性蛋白的分离、纯化和鉴定 被引量:5 2012年 目的从大蒜中分离纯化具有抗真菌活性的蛋白。方法提取大蒜粗提液,通过DEAE-SephadexTM A-50阴离子交换层析、Affi-gel blue gel亲和层析和ResourceTMS阳离子交换层析纯化目的蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE、抗真菌活性检测鉴定该蛋白对不同真菌的抑制活性。结果纯化得到的蛋白分子质量为13ku,该蛋白对落花生褐斑病菌有明显的生长抑制活性,而对绿色木霉、黑曲霉、白地霉和产黄青霉没有生长抑制活性。纯化得到另外一种蛋白的分子质量约为4.6ku,该蛋白对绿色木霉有明显的生长抑制活性,而对落花生褐斑病菌、黑曲霉、白地霉和产黄青霉没有生长抑制活性。结论大蒜中存在抗真菌活性蛋白。 魏雪盈 徐栋梁 闫浩 夏立新 刘志刚关键词:大蒜 离子交换层析 活性抑制 花生抗菌活性蛋白的分离、纯化和鉴定 2012年 目的从花生中分离、纯化具有抗真菌活性的蛋白。方法提取花生粗提液,通过Affi-Gel Blue Gel亲和层析和SuperdexTM75分子筛层析,纯化得到目的蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE、抗真菌活性检测鉴定该蛋白对不同真菌的抑制活性。结果对花生总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析结果显示,其相对分子质量为12 000~70 000。组份C对绿色木霉有抑菌活性,对落花生褐斑病菌、黑曲霉、白地霉、产黄青霉均无抑菌活性。活性组份C层析得到的组份23对绿色木霉有抑菌活性。对活性组份23进行Tricine-SDS-PAGE电泳分析结果显示,组份23相对分子质量为24 000。结论花生中存在抗真菌活性蛋白。 贾梦阳 徐栋梁 高安健 闫浩 夏立新 刘志刚关键词:花生 离子交换层析 拟穴青蟹抗菌肽CrusSp基因克隆表达及抑菌活性分析 被引量:5 2011年 从拟穴青蟹血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增编码CrusSp成熟肽的cDNA序列,克隆至pET-32a(+)表达载体中,转化至E.coli OrigamiTM(DE3)中表达CrusSp蛋白,通过Ni2+亲和层析柱纯化获得CrusSp蛋白,表达出的CrusSp蛋白相对分子量约10.27 ku,等电点为8.54,滤纸片扩散法结果显示CrusSp蛋白抑制绿色木霉. 徐栋梁 李洁颖 彭永鹤 夏立新 刘志刚关键词:拟穴青蟹 抗菌肽 纯化 抑菌活性 黑虎虾Crustin的克隆表达纯化及抑菌活性测定 被引量:4 2010年 从黑虎虾血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码Crustin成熟肽的cDNA序列,将其克隆至pMD18-T载体进行扩增,然后克隆到pET-32a(+)表达载体中,转化至E.coliOrigamiTM(DE3)中表达Crustin抗菌蛋白,后通过Ni2+亲和层析柱纯化获得Crustin蛋白,采用滤纸片扩散法检测该蛋白的抑菌活性。表达出的Crus-tin蛋白分子量约14.7 kDa,滤纸片扩散法显示Crustin蛋白对绿色木霉具有抑制活性。 徐栋梁 朱超亚 彭永鹤 夏立新 刘志刚关键词:抗菌肽 克隆 纯化 抑菌活性 芝麻主要过敏原清蛋白基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定 2009年 芝麻是亚洲地区重要的油料作物,主要含有两种储存蛋白,为11S的球蛋白和2S的清蛋白,这两种蛋白占芝麻中总蛋白的80%~90%,清蛋白是其中主要的致敏蛋白之一。从SWISS—PROT和TrEMBL以及NCBI的GenBank等数据库下载到一些芝麻中清蛋白的核酸序列,利用生物信息学方法对这些芝麻清蛋白序列进行同源性比对,确定其保守区域。 徐栋梁 邬玉兰 刘志刚 孔小丽关键词:免疫学鉴定 芝麻 克隆表达 纯化 油料作物