徐艳花
- 作品数：11 被引量：16H指数：2
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：中华国际医学交流基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺小分子活性肽对H_2O_2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究胰腺小分子活性肽对H2O2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响。方法采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度与活性。对照组加入普通培养基,实验组培养基中加入不同质量浓度(100、200、300、400μg/ml)胰腺小分子活性肽,阳性对照组培养基中加入100nmol/L艾塞那肽。每组细胞做5个复孔(n=5),培养5d后每组均接受H2O2100μmmol/L处理1h。采用Hoechst33258核染色形态学观察;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;荧光定量PCR法检测bax、bcl-2及caspase3mRNA的表达;Western-bolt检测bax、bcl-2蛋白的表达。结果 300、400μg/ml胰腺小分子活性肽和阳性对照组胰岛细胞凋亡率小于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2蛋白表达高于对照组(P<0.05),bax与caspase3蛋白表达低于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2mRNA的表达高于对照组(P<0.05),且bax mRNA的表达低于对照组(P<0.05)。结论胰腺小分子活性肽在浓度为300、400μg/ml时对大鼠胰岛细胞凋亡有明显保护作用。
- 徐艳花王洪敏张振杨蕾蔡德鸿陈光明陈宏
- 关键词：过氧化氢胰岛细胞凋亡
- 真核过表达载体共转染3个胰岛发育关键基因在小鼠胎肝细胞内的表达
- 2012年
- 背景:大量文献表明,向肝脏细胞引入一个多个胰岛发育的关键因子(如Pdx1、MafA及Ngn3)可以使肝细胞向胰岛细胞的方向进行转化。目的:构建以pcDNA3.1(+)为骨架的质粒载体并共同转染胰十二指肠同源框蛋白(Pdx1)、神经源素3(Ngn3)及V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(MafA)至小鼠胎肝细胞并检测其表达情况。方法:以基因组或小鼠胰腺cDNA为模板扩增Pdx1、MafA及Ngn3三个目的基因,应用分子生物学技术,将3个目的片段克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点中,构建小鼠系列真核过表达载体pcDNA3.1(+)-MafAORF,pcDNA3.1(+)-Pdx-1ORF,pcDNA3.1(+)-Ngn3ORF通过Lipofectamine2000介导的脂质体转染小鼠胎肝细胞系BNLCL.2,用反转录PCR以及间接免疫荧光法检测3个目的基因的表达情况。结果与结论:目的基因克隆正确,反转录PCR,间接免疫荧光法证实了脂质体转染后小鼠胎肝细胞中有Pdx1、Ngn3以及MafA的表达。结果表明,真核过表达载体pcDNA3.1(+)-MafAORF,pcDNA3.1(+)-Pdx-1ORF,pcDNA3.1(+)-Ngn3ORF可成功构建,并能够将Pdx1、Ngn3以及MafA三个基因转至小鼠胎肝细胞进行表达。
- 于静雯张振徐艳花陈容平杨锐陈宏
- 关键词：脂质体转染
- 促胰素对大鼠胰岛细胞增殖及功能的影响
- 2012年
- 背景:有研究报道,促进胰岛β细胞增殖分化和再生是2型糖尿病患者一种潜在的治疗方案。目的:观察促胰素对体外培养大鼠胰岛细胞增殖及功能的影响。方法:采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度和活性,将胰岛细胞分为空白对照组和实验组,空白对照组加入普通培养基,实验组培养基中加入不同质量浓度(100,200,300,400mg/L)促胰素,培养1,3,5d后CCK-8法检测细胞增殖活性;培养5d后行低糖和高糖刺激胰岛素释放实验。结果与结论:随着促胰素质量浓度的增高,胰岛细胞增殖活性呈剂量依赖性增加(P<0.05),但无明显时间依赖性。除100,200mg/L组外,300,400mg/L两组胰岛素分泌量均显著高于空白对照组(P<0.05)。表明300,400mg/L促胰素不仅可促进胰岛细胞增殖,而且可显著增强胰岛细胞分泌胰岛素的功能。
- 徐艳花王洪敏张振蔡德鸿于静雯吴礼凤陈道明陈宏
- 关键词：胰岛细胞增殖胰岛功能胰岛分离纯化
- 利拉鲁肽对糖耐量异常OLETF大鼠胰岛白细胞介素-1β表达的影响
- 目的:观察利拉鲁肽对糖耐量异常大鼠胰岛炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和凋亡基因Caspase3表达的影响。方法:12周龄糖耐量异常OLETF大鼠分为生理盐水组和不同剂量利拉鲁肽干预组(50、100、200μg/k...
- 郭南京孙嘉陈宏徐艳花高飞张桦张振蔡德鸿
- 利拉鲁肽对糖耐量异常OLETF大鼠胰岛白细胞介素-1β表达的影响被引量：11
- 2012年
- 目的观察利拉鲁肽对糖耐量异常大鼠胰岛炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和凋亡基因caspase3表达的影响。方法 12周龄糖耐量异常OLETF大鼠分为生理盐水组和不同剂量利拉鲁肽干预组(50、100、200μg/kg),8只LETO作为正常对照组。实验12周结束时,所有大鼠均检测糖耐量试验空腹及服糖后30 min胰岛素,并检测胰岛IL-1β和caspase3 mRNA和蛋白水平。结果利拉鲁肽干预的糖耐量异常大鼠和生理盐水干预组相比,胰岛IL-1β和caspase3表达显著降低,血糖、胰岛β细胞功能及早期胰岛素分泌指数明显改善。结论利拉鲁肽可能通过抑制胰岛IL-1β炎症因子表达,从而改善胰岛功能及糖代谢,延缓或阻止糖尿病发生发展。
- 郭南京孙嘉陈宏徐艳花高飞张桦张振蔡德鸿
- 关键词：糖耐量异常利拉鲁肽白细胞介素-1ΒCASPASE3OLETF大鼠
- 胰腺小分子活性肽对过氧化氢诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响
- 目的:研究促胰素对H_2O_2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响。方法:采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度与活性,将胰岛细胞分为空白对照组、实验组和阳性对照组,空白对照组加入普通培养基,实验组培养基中...
- 徐艳花王洪敏张振杨蕾蔡德鸿陈光明陈宏
- 海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放
- 2012年
- 目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析。方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组。对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18 h加入PMA(10 nmol/L);应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义。HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义。结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用。
- 高飞陈宏张桦郭南京徐艳花蔡德鸿
- 关键词：INS-1细胞胰岛素
- 骨髓腔注射骨髓间充质干细胞防治模拟失重大鼠的骨质疏松被引量：2
- 2012年
- 背景:模拟失重条件下自身骨髓间充质干细胞的增殖受到抑制,并且向成骨细胞分化的能力减弱,造成骨量减少与骨微结构的破坏,最终导致骨质疏松。目的:观察同种异体骨髓间充质干细胞骨髓腔注射对模拟失重大鼠胫骨骨密度和骨组织微结构的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为自由活动对照组、尾吊模拟失重组、细胞治疗组(尾吊模拟失重同时给予双侧胫骨骨髓腔注射成骨诱导的同种异体BMSCs细胞)。结果与结论:与自由活动对照组相比,尾吊模拟失重组胫骨骨密度、骨小梁面积百分比、骨小梁数量和厚度均显著降低(P<0.01),骨小梁分离度显著增加(P<0.01)。与尾吊模拟失重组相比,细胞治疗组中胫骨骨密度、骨小梁面积百分比、骨小梁数量和厚度均显著增加(P<0.01),骨小梁分离度显著降低(P<0.01)。说明骨髓腔注射能够增加模拟失重大鼠骨密度,改善骨超微结构,减缓骨量丢失,有效防治骨质疏松。
- 吴礼凤孙平麦燕兴刘海明徐艳花杨锐黄震
- 关键词：模拟失重骨质疏松骨髓间充质干细胞骨密度骨组织形态计量学
- 真核过表达载体共转染3个胰岛发育关键基因在小鼠胎肝细胞内的表达
- 目的:构建以pcDNA3.1(+)为骨架的质粒载体并共同转染胰十二指肠同源框蛋白(Pdxl)、神经源素3(Ngn3)及V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(MafA)至小鼠胎肝细胞并检测其表达情况。方法:以基因组或小鼠胰腺...
- 于静雯徐艳花张振陈容平杨锐陈宏
- 利拉鲁肽对糖尿病前期大鼠胰岛海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白的影响被引量：1
- 2012年
- 目的明确利拉鲁肽对糖尿病前期OLETF大鼠的阻抑作用,观察对胰腺海马胆碱能神经刺激肽前体蛋白(hippocampal cholinergicneurostimulating peptide precursor protein,HCNP-pp)的影响。方法检测空腹及餐后2小时血糖,将处于糖耐量减低阶段12～14周龄OLETF大鼠随机分为3组,安慰剂组(PBO组)、100μg/kg利拉鲁肽处理组(L-100组)、200μg/kg利拉鲁肽处理组(L-200组),LETO大鼠为阴性对照组(LETO组)。12周后检测大鼠体重、空腹血糖、餐后2 h血糖和胰岛素,以免疫组织化学染色分析胰岛细胞形态学变化,应用蛋白印迹技术检测HCNP-pp及胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)蛋白含量;应用实时定量PCR检测HCNP-pp和LGP-1R、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、3型毒蕈碱样受体(M3R)基因表达水平。结果PBO组OLETF大鼠空腹、餐后2 h血糖符合糖尿病诊断标准,而L-100组、L-200组及LETO组大鼠均未进展为糖尿病状态。PBO组OLETF大鼠体重及空腹胰岛素均明显高于L-100组、L-200组和LETO组(P<0.01)。与PBO组相比,L-200组、LETO组大鼠胰腺胰岛素阳性细胞表达密度明显增多(P<0.01),而与L-100组差别无统计学意义(P>0.05);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺HCNP-pp蛋白相对含量明显减少(P<0.05或P<0.01);L-100组、L-200组及LEITO组大鼠胰腺GLP-1R蛋白相对含量明显增多(P<0.01);L-100组、L-200组和LETO组大鼠胰腺HCNP-pp mRNA水平明显下降(P<0.01);L-200组和LETO组大鼠胰GLP-1R,ChAT、M3R mRNA水平均明显增多(P<0.01);L-100组大鼠GLP-1R和ChAT mRNA水平均明显增多(P<0.01),而M3R mRNA水平则无变化(P>0.05)。结论利拉鲁肽可阻抑糖尿病前期进展,可能与胰腺HCNP-pp表达下降、GLP-1R表达增高及胰岛β细胞密度增加相关。利拉鲁肽改善胰岛素分泌状态,可能与胰腺HCNP增多、ChAT和M3R表达增高相关。
- 高飞陈宏张桦郭南京徐艳花蔡德鸿
- 关键词：利拉鲁肽OLETF大鼠促分裂原活化蛋白激酶
