徐芳
- 作品数：22 被引量：71H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 中职学校品德评价体系的建构研究——以石河子大学护士学校为例
- 德育是中职学校提高培养质量的重要内容，而品德评价体系的建构直接关系到学生德育教育的实效性。因此，在中等职业学校德育活动中应十分重视品德评价体系的构建。中等职业学校由于自身承担社会角色和人才培养规格的特殊性，更强调德育的作...
- 徐芳
- 关键词：社会角色
- 文献传递
- 结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体的构建与鉴定
- 2012年
- 结核分枝杆菌感染人体后主要寄生在宿主巨噬细胞内，结核分枝杆菌小分子热休克蛋白（smallheatshockproteins，sHSPs）Hsp16．3是其在宿主巨噬细胞内生存繁殖所必需的蛋白质，已有研究表明Hsp16．3与结核分枝杆菌的潜伏感染关系密切，本研究利用基因敲除技术构建了结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体，
- 田玺择徐芳董江涛姚楠吴芳章乐曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌感染HSP16.3基因敲除技术打靶载体强毒株小分子热休克蛋白
- 不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠对肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化的影响被引量：18
- 2012年
- 目的:探讨不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化。方法:不同毒力结核分枝杆菌悬液分别经小鼠尾静脉注射、复制及鉴定各组小鼠感染模型,各组小鼠感染模型复制成功后第1、3、5、7、9、11、13、15天,进行肺泡灌洗,收集小鼠肺泡灌洗液,获取感染小鼠肺泡巨噬细胞,以激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测上述各时间点、各组感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率,比较各组感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的时相性变化。结果:激光共聚焦显微镜检测结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)均被小鼠肺泡巨噬细胞大量吞噬。流式细胞技术检测结果显示:结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠模型组和卡介苗菌株(BCG)感染小鼠模型组,在小鼠感染模型复制成功后1～9天,小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率逐渐升高,9天时两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率均达最高,随着时间的延长,两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率呈现逐渐降低趋势。结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠组,感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率明显高于卡介苗菌株(BCG)感染小鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率与结核分枝杆菌的毒力强弱呈正相关。
- 董江涛徐芳田玺择姚楠吴芳章乐王远志曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌肺泡巨噬细胞凋亡
- Pup基因敲除的结核分枝杆菌H37Ra菌株的构建方法及应用
- 本发明公开了Pup基因敲除的结核分枝杆菌H37Ra菌株的制备方法及应用，属于基因工程领域。上述制备方法包括以下步骤：(1)扩增Pup基因上下游同源臂，并将上下游同源臂构建到Cosmid质粒上，构建重组质粒；(2)将所述重...
- 张万江冯楠柳小玲吴芳吴江东张杰董江涛王菊张辉徐芳赵正涌梁粟朱荟云
- 小拟南芥Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆及生物信息学分析被引量：19
- 2011年
- 为了克隆新疆特色植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)的Na+/H+逆向转运蛋白基因,本研究以经200mmol/L NaCl胁迫诱导12h的叶片总cDNA为模板,采用RT-PCR技术克隆到Na+/H+逆向转运蛋白基因,命名为ApNHX1(GenBank登录号:JF357965)。结果表明:ApNHX1全长开放阅读框1617bp,编码538个氨基酸残基。利用相关的生物信息学软件对ApNHX1蛋白氨基酸的等电点、结构域、二级结构组成、跨膜结构、亲水性等进行研究,并且构建植物NHX1基因家族系统进化树,结构表明ApNHX1和拟南芥、鼠尔芥、盐芥和油菜等的NHX1同源基因遗传距离最为接近,属于Ⅰ型液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白。因此,构建植物过量表达载体p35S::ApNHX1,转化到农杆菌GV3101中,这为进一步研究基因功能奠定基础。
- 院海英顾超徐芳崔百明黄先忠
- 关键词：小拟南芥NA+/H+逆向转运蛋白克隆
- 结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达模型的建立及鉴定被引量：4
- 2012年
- 为了建立及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达的模型。采用将0.3mL浓度约为1.0×107个/mL结核分枝杆菌菌悬液经昆明小鼠尾静脉注射,复制结核分枝杆菌感染小鼠模型,经鉴定小鼠感染模型复制成功后第15天,进行小鼠肺泡的灌洗,收集小鼠肺泡灌洗液,获取感染小鼠肺泡巨噬细胞,以提取的感染小鼠肺泡巨噬细胞内的结核分枝杆菌基因组DNA为模版PCR扩增结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3的基因,同时进一步利用激光共聚焦显微镜观察小鼠肺泡巨噬细胞的方法进行研究。PCR结果证实感染结核分支杆菌的巨噬细胞内有结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的基因表达;同时激光共聚焦显微镜下可见感染小鼠肺泡巨噬细胞内吞噬有大量结核分枝杆菌,并且证实有结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的分泌表达。成功建立了结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达的模型。
- 董江涛徐芳田玺择姚楠吴芳章乐王远志曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp16.3的表达、纯化及鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的构建结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3原核表达载体,获得Hsp16.3蛋白,并进行纯化及鉴定。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增Hsp16.3基因,以pET28a为载体,构建重组质粒pET28a-Hsp16.3,测序正确后,转入宿主菌BL21(DE3)进行诱导表达。融合蛋白经SDS-PAGE,Western blot分析鉴定,并通过镍柱进行亲和层析纯化,表达蛋白分子质量约17ku,能被结核杆菌16ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别。结果成功构建了Hsp16.3原核表达载体pET28a-Hsp16.3,并在宿主菌BL21(DE3)中表达,表达蛋白分子质量单位约17ku,能被结核杆菌16ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别。结论 Hsp16.3基因克隆入宿主菌中并成功表达,纯化Hsp16.3蛋白具有生物学活性,为Hsp16.3的进一步研究奠定了基础。
- 徐芳姚楠田玺泽董江涛吴芳章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌HSP16.3蛋白表达纯化
- 一种结核杆菌PUP蛋白过表达菌株的制备及其应用
- 本发明公开了一种构建结核杆菌类泛素样蛋白PUP过表达菌株的制备及其应用，培养BCG菌株并提取其基因组DNA。以BCG菌株基因组DNA为模板，PCR扩增结核杆菌Pup蛋白基因；测序、鉴定。以大肠杆菌‑结核分枝杆菌穿梭质粒p...
- 张万江赵正涌吴芳吴江东张杰董江涛徐芳柳小玲梁粟王洪洲赵彦恒邵萌
- 文献传递
- 结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的表达、纯化和鉴定
- 目的：构建结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3原核表达载体，获得Hsp16.3蛋白，并应用生物信息学技术对结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3进行分析，获取该基因的相关信息。 方法：以结核分枝杆菌H37Rv...
- 徐芳
- 关键词：结核分枝杆菌生物信息学技术氨基酸组成
- 文献传递
- 小拟南芥液泡膜H^+-PPase基因OpVP1的克隆、序列分析及表达被引量：8
- 2013年
- 植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基因,命名为OpVP1。OpVP1基因的cDNA全长为2698bp,开放阅读框(ORF)为2313bp,编码770个氨基酸。OpVP1蛋白与琴叶拟南芥、拟南芥相似性最高,分别为98.6%、98.4%。系统进化分析表明OpVP1基因属于Ⅰ型液泡膜质子焦磷酸酶基因。OpVP1蛋白的分子量是80745.9Da,等电点pI为5.13,含有14个跨膜螺旋结构。三维结构分析表明OpVP1蛋白是由2个单体组成的二聚体蛋白。qRT-PCR表明OpVP1基因在角果中表达高于根、茎、叶和花中的表达。
- 徐芳赵云霞魏艳玲李超孙黎黄先忠
- 关键词：焦磷酸酶小拟南芥克隆
