施金洪
- 作品数：25 被引量：36H指数：3
- 供职机构：南通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 海马放射状胶质细胞的体外诱导激活及其意义被引量：6
- 2009年
- 为探讨海马放射状胶质细胞在切割穹窿海马伞侧海马提取液的诱导下形态发生的变化,将培养的海马胶质细胞接种于24孔培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液,分别于培养后1、3、7和14d时行BLBP免疫荧光检测和Hoechst标记。计算两组各天时BLBP阳性细胞占Ho-echst阳性细胞的百分比,并用LeicaQiwn图像处理软件检测BLBP阳性细胞的周长和面积(含突起)。Stata8.0统计软件行组间比较。结果显示,1d时诱导组BLBP阳性细胞的比例稍高于对照组,两组细胞胞体均较小,突起均较短较细,无明显差异;3d时,诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组,且胞体较大,突起较粗较长;7d时诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组达到高峰,胞体更大,突起更粗更长交织成网;14d时两组BLBP阳性细胞的比例均稍有降低,但诱导组的比例仍明显高于对照组,两组细胞的胞体稍变小,突起稍变细变短。上述结果提示,切割穹窿海马伞侧海马提取液可明显地诱导BLBP阳性放射状胶质细胞增殖,并使胞体变大,突起变粗变长,呈"激活"状态。
- 赵荷艳田美玲施金洪秦建兵张新化金国华
- 关键词：免疫荧光细胞培养
- Brn-4在大鼠海马神经干细胞向神经元分化中的作用被引量：2
- 2007年
- 为探讨Brn-4在海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备切割海马伞侧和正常侧海马提取液,将鼠胚海马神经干细胞球分成3组:(1)切割组加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(2)正常组加入含正常侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(3)对照组加入单纯的DMEM/F12无血清培养基。培养后第14d行Brn-4/MAP-2免疫荧光双标染色。在荧光显微镜下分别计数每个视野下Brn-4单标神经元和Brn-4/MAP-2双标神经元的数量,并测量双标神经元的胞体面积、细胞周长以及Brn-4的免疫荧光强度。用图像处理系统和Stata7.0软件对所得数据进行统计学分析。结果显示:Brn-4/MAP-2双标神经元数在切割组中较多、胞体较大、突起较丰富,且Brn-4的免疫荧光亦较强;正常组次之,对照组最差。上述数据经组间比较分析,3组间差异有显著性意义(P<0.01)。本研究结果提示Brn-4在海马神经干细胞向神经元分化过程中可能发挥重要作用。
- 施金洪田美玲朱蕙霞秦建兵谭雪锋王磊金国华
- 关键词：海马神经干细胞分化神经元
- 切割穹隆海马伞海马提取液促进放射状胶质细胞增殖和向神经元分化被引量：3
- 2011年
- 目的探讨海马微环境的变化对体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化的影响。方法本实验在成功制备正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液的基础上,分别使用正常侧和切割侧海马提取液,观察其在体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化过程中所起的作用。结果在放射状胶质细胞增殖阶段,切割组与正常组及对照组相比,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的增殖细胞比例明显提高(P<0.05);在放射状胶质细胞分化阶段,切割组与正常组及对照组相比,Tuj1阳性神经元数量明显增多(P<0.05)。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液对大鼠放射状胶质细胞的增殖和向神经元的分化有明显促进作用,提示海马微环境对海马放射状胶质细胞的增殖和分化有重要影响。
- 秦建兵金国华李浩明施金洪田美玲谭雪锋张新化邹琳清
- 关键词：神经元海马细胞培养免疫荧光
- Lhx8在海马胆碱能神经再生中的作用
- LIM同源盒基因（LIM homeobox gene）家族成员之一的Lhx8与胚胎时期胆碱能神经元的发育有关，但是对于其在海马胆碱能神经再生中的作用及诱导其上调的机制尚未见有报道。本课题研究内容主要包括四个方面： 1、...
- 施金洪
- 关键词：胆碱能神经元神经再生
- 当前局部解剖学教学中的问题与解决对策被引量：3
- 2012年
- 局部解剖学（topographicor regional anatomy）是在系统解剖学的基础上,研究人体各个局部区域的层次和器官的位置、毗邻关系的一门科学[1]。学习该课程的主要目的是通过实地解剖,
- 施金洪金国华张新化
- 关键词：局部解剖学教学体系教学改革
- HCNP与海马提取液对神经干细胞向胆碱能神经元分化的协同作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨海马胆碱能神经元刺激肽(hippocampal cholinergic neurostimulating peptide,HCNP)与海马提取液对海马神经干细胞向神经元及胆碱能神经元分化的协同作用。方法:取孕17 d SD大鼠海马组织进行神经干细胞的培养、增殖、传代,并将其接种于2块24孔板中,培养基中均含B27、微量脑源性神经营养因子(BD-NF),将培养孔分为6组:H+T组,加入HCNP和切割穹窿海马伞侧海马提取液;H+N组,加入HCNP和正常侧海马提取液;H组,加入HCNP;T组,加入切割穹窿海马伞侧海马提取液;N组,加入正常侧海马提取液;对照组,不加HCNP和海马提取液。分化14 d后行MAP-2/ChAT免疫荧光双标检测。结果:与其它各组相比,H+T组分化的MAP-2阳性神经元最多,ChAT/MAP-2双标阳性神经元占MAP-2阳性神经元的比例最高(P<0.05);与N组相比,H+N组MAP-2阳性神经元较多,ChAT/MAP-2双标阳性神经元占MAP-2阳性神经元的比例也较高(P<0.05);与对照组相比,H组T组均可见一定数量的MAP-2阳性神经元及ChAT/MAP-2双标阳性神经元(P<0.05);N组以及对照组中MAP-2阳性神经元的数量和ChAT/MAP-2双标阳性神经元占MAP-2阳性神经元的比例则最低。结论:在微量BDNF存在的情况下,HCNP可促进海马神经干细胞向神经元和胆碱能神经元分化,切割侧海马提取液与HCNP可发挥协同作用。
- 杨伟伟金国华施金洪田美玲李浩明秦建兵张新化
- 关键词：脑源性神经营养因子海马神经干细胞神经元胆碱能神经元
- Jagged1对海马放射状胶质细胞增殖和向神经元分化的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Jagged1在体外培养的海马放射状胶质细胞增殖和向神经元分化中的作用。方法体外培养海马放射状胶质细胞,在培养液中加入Notch信号通路的激动剂Jagged1和(或)抑制剂{氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯,DAPT},将细胞分为空白对照组、Jagged1组、Jagged1联合DAPT组、DAPT组;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞活力;免疫荧光法检测脑脂结合蛋白(BLBP)/Ki67双标阳性细胞数及分化所得的微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞数。结果 Jagged1组中细胞活力明显高于其他各组,并且Jagged1组中BLBP/Ki67双标阳性细胞及分化所得的MAP-2阳性细胞数也多于其他各组。结论 Jagged1能够促进体外培养的海马放射状胶质细胞增殖,并且能够促进其更多地向神经元分化。
- 秦建兵成敏金国华李浩明施金洪邹琳清田美玲
- 关键词：分化海马神经元免疫荧光
- 脑脂结合蛋白促进大鼠星形胶质细胞增殖的研究
- 2017年
- 目的:明确脑脂结合蛋白(brain lipid binding protein,BLBP)在体外培养的大鼠星形胶质细胞增殖过程中的作用。方法:构建BLBP过表达重组质粒、进行腺病毒包装,并感染体外培养的大鼠星形胶质细胞。培养3 d后检测BLBP基因和蛋白的表达情况,Ki67阳性细胞和EdU阳性细胞所占的比例,并用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:感染BLBP过表达腺病毒后,星形胶质细胞中BLBP基因的表达水平明显增高,外源性BLBP蛋白也能够在星形胶质细胞中正常表达;Ki67阳性细胞和EdU阳性细胞所占的比例明显增高,S期和G_2/M期细胞比例明显上调。结论:腺病毒能够感染体外培养的大鼠星形胶质细胞,过表达BLBP能够促进星形胶质细胞的增殖。
- 杨清清彭敏秦建兵韩笑施金洪金国华李浩明
- 关键词：星形胶质细胞腺病毒细胞增殖
- Lhx8基因沉默抑制NGF诱导的海马NSCs向胆碱能神经元分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:明确Lhx8在神经生长因子(nerve growth factors,NGF)促进海马神经干细胞向胆碱能神经元分化中的作用。方法:体外培养海马神经干细胞并应用NGF促进其向胆碱能神经元分化的过程中,将构建的Lhx8干扰慢病毒加入至培养液中,7 d后应用免疫荧光标记技术检测分化所得胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,Ch AT)和微管相关蛋白-2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)双标阳性细胞。结果:在空白对照组中,仅检测到少量的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞;在NGF组或是NGF联合阴性对照慢病毒组中则可检测到较多的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞;在加入Lhx8干扰慢病毒的实验组中,分化所得的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞数较NGF组或是NGF联合阴性慢病毒组明显减少。结论:Lhx8基因沉默抑制了NGF诱导的海马神经干细胞向胆碱能神经元的分化。
- 李浩明金国华朱培培施金洪邹琳清张新化田美玲衣昕秦建兵成翔
- 关键词：基因沉默神经生长因子神经干细胞胆碱能神经元海马
- 一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用
- 本发明公开了一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用，其包括：切割穹窿海马伞后侧脑室灌注NGF，能提高海马齿状回中的ChAT活性；将Lhx8干扰慢病毒注入脑室灌注NGF的正常海马齿状回后，齿状回中Lhx8和ChAT基因和蛋...
- 施金洪李浩明衣昕何辉金国华
