时利
- 作品数：19 被引量：49H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
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- 大鼠耳蜗大上皮嵴的形态学演变
- 2005年
- 目的 观察不同胚胎期的大鼠和新生大鼠耳蜗大上皮嵴形态上的变化。方法 选取胚胎期 14、16、18、2 0天和出生后当天、2、5、7、10、14天等 10个时间段的大鼠耳蜗 ,分别进行冰冻切片和HE染色。结果 毛细胞的分化成熟是从底回向顶回进行 ,顶回较底回有 1～ 2天的延迟。大上皮嵴结构重排、细胞减少从腔侧开始 ,出生后 2周左右当毛细胞分化成熟时消失。结论 胚胎期 14天前后是大上皮嵴形态演变的关键时期。大上皮嵴是耳蜗形态不成熟的标志之一。
- 汪学勇胡吟燕时利翟所强
- 关键词：耳蜗大上皮嵴形态学
- 实验性犬侧颅底骨缺损修复材料的研究被引量：2
- 1997年
- 为达到修复颅底骨和硬脑膜缺损的目的，通过手术造成狗侧颅底骨及硬脑膜大面积缺损模型，利用自体阔筋膜或与细胞生长促进因子——骨形成蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）进行修复。观察移植后不同时期所修复组织的成活及成骨的组织学变化情况。探讨了阔筋膜修复硬脑膜后组织学变化，证实生物膜与骨形成蛋白是一种理想的颅底缺损修复材料，为临床修复硬脑膜、颅底缺损等提供了参考。
- 时利吴彦桥时文杰时文杰徐铮修贺明徐铮尚耀东修贺明毕爱芳
- 关键词：颅骨缺损外科手术骨形成蛋白
- P16(CDKN_2)、RB在喉癌组织中的表达被引量：1
- 1998年
- 为探讨抑癌基因P16及其相关基因RB在喉癌组织中表达的意义和其相互关系,应用免疫组化分析方法(SP法)对54例喉癌石腊标本中P16、RB蛋白产物进行检测。结果发现:P16、RB的表达缺失率分别为51.8％、16.7％,二者在喉癌中的表达呈负相关关系(r=-0.3646,P<0.05)。P16蛋白的表达随肿瘤恶性程度的提高而降低。提示:P16蛋白在抑制喉癌的恶性进展中具有重要作用。由P16、RB、CYCLIND_1,及CDK_4、CDK_6构成的调控细胞周期的负反馈通路作为细胞周期G1/S期的一个重要调节点,它的失调是导致肿瘤恶性发展的重要因素。RB可能对P16的表达具有调控作用。
- 时文杰时利王燕
- 关键词：喉肿瘤肿瘤抑制基因免疫组织化学
- 碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及其在内耳基因治疗中的实验研究被引量：7
- 2003年
- 目的 观察碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)双顺反子真核表达载体在豚鼠耳蜗中的表达 ,及噪声损伤后对毛细胞的保护作用。方法 利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES) ,构建人bFGF与增强型绿色荧光蛋白 (enhancegreenfluorescenceprotein ,EGFP)基因真核表达载体pIRES bFGF EGFP。采用硬脂胺 (stearylamine ,SA)脂质体介导bFGF基因转染豚鼠内耳 ,噪声暴露即刻通过圆窗向豚鼠耳蜗注入含有bFGF基因作为治疗基因的真核表达载体 ;或在噪声暴露前 7d ,作为保护因子转导转染豚鼠耳蜗。结果 构建的pIRES bFGF EGFP在转染 2 4h后开始表达 ,48h达到最高 ,表达时间可持续 1个月。治疗组在噪声后听性脑干反应平均阈值均低于噪声组 ,在保护组 :pIRES bFGF EGFP对耳蜗毛细胞有明显的保护作用。结论本研究成功地构建了pIRES bFGF EGFP真核共表达载体 ,具有bFGF、EGFP的双重活性 。
- 时利董明敏时文杰胡吟燕郭维翟所强杨伟炎
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子真核表达基因治疗内耳疾病
- 多肿瘤抑制基因—p16在喉癌中的丢失研究
- 1999年
- 目的：探讨ｐ１６基因的缺失与人喉癌的发生、发展的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ及免疫组化方法检测ｐ１６。结果：４４例喉癌患者中２３例存在ｐ１６的失活，失活率为５２．３％，ｐ１６基因的失表达与喉癌的组织学分化程度及临床分期有密切关系（Ｐ＜０．０５），表明ｐ１６基因的变异有可能与人喉癌的发生发展有关，提示检测ｐ１６基因的丢失对于判断喉癌的恶性度及估计病情的进展具有重要意义。结论：随着对ｐ１６基因的不断了解，将为肿瘤的临床诊断、基因治疗提供新的思路和线索。
- 时利时文杰王燕楢
- 关键词：喉肿瘤RT-PCRP16基因多肿瘤抑制基因
- 毛细胞前体细胞的分离和鉴定被引量：6
- 2005年
- 目的:证实哺乳类耳蜗大上皮嵴和小上皮嵴分别能转化为内、外毛细胞。方法:采用体外培养wistar大鼠内耳基底膜,进行了大、小上皮嵴的定位和鉴定。结果:基底膜培养中,小上皮嵴细胞都能被毛细胞的早期标志肌球蛋白(myosinVIIa)染色,表明毛细胞分化,同时,在培养基中发现一些球囊型结构的细胞,细胞增殖标志(BrdU)、上皮细胞标志(ZO1)免疫组化阳性,表明该球囊不仅具有增殖能力,而且具有上皮特性。结论:建立了新生大鼠耳蜗铺片培养技术,识别和定位毛细胞前体细胞(即小上皮嵴和大上皮嵴区域),证明了小上皮嵴细胞和大上皮嵴细胞都具有转变成为毛细胞的潜能。
- 时文杰时利翟所强杨伟炎
- 关键词：前体细胞WISTAR大鼠外毛细胞肌球蛋白哺乳类基底膜
- C57胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞分离、培养及鉴定
- 2011年
- 背景:培养的心肌细胞被广泛应用于心肌细胞的生理特性、毒性实验、基因工程、疾病模型和药物筛选等方面的研究。获得纯度较高活性良好的品系小鼠心肌细胞是研究的关键前提。目的:分离和培养C57小鼠胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞。方法:应用机械切碎心室肌后,胰蛋白酶消化不同发育阶段的C57小鼠心室肌细胞,差速贴壁1h纯化心室肌细胞,锥虫蓝染色判定心肌细胞活力,体外分别培养48～72h后分别行倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,微电极阵列评价细胞电生理指标,免疫组化鉴定。结果与结论:经3～6次消化后,心室组织消化完全,即刻细胞存活率大于85%。倒置显微镜下观察,细胞呈梭形、多角形。12h有少部分细胞搏动,48h细胞交织成网,搏动呈同步性,搏动频率30～90次/min。说明用胰蛋白酶组织消化法可以成功地分离、培养,并获得形态、活力良好的胎鼠、乳鼠及成年C57小鼠心室肌细胞。
- 张玲段明军魏琴陈华时利侯月梅
- 关键词：心室肌细胞微电极阵列
- 狗硬脑膜与阔筋膜承受拉力比较被引量：5
- 2004年
- 目的 比较狗阔筋膜和硬脑膜所能承受拉力的差异。方法 使用XL-250A型拉力实验机分别测定同期、相同条件下取得的狗阔筋膜和硬脑膜所能承受的最大拉力。结果 两种不同方向的阔筋膜的拉力强度无显著差别,阔筋膜与硬脑膜二者之间的拉力强度差别不显著,然而,二者之间每毫米所承受的拉力差别显著。结论用阔筋膜修复硬脑膜缺损足以支持脑组织。
- 时文杰王学敏时利
- 关键词：阔筋膜硬脑膜缺损脑组织
- SA脂质体介导报告基因转染耳蜗的实验研究被引量：5
- 2002年
- 目的 探索直接注射质粒及SA脂质体与质粒复合物在豚鼠耳蜗内表达的情况。方法 以构建的含绿色荧光蛋白基因pEGFP cDNA的重组真核表达质粒为外源基因,与SA脂质体一起转染内耳耳蜗毛细胞;通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果 使用阳离子脂质体SA的脂质体质粒复合物组转染耳蜗,表达效率高于单纯质粒组,于转染后48h表达出的蛋白量最大。结论 应用脂质体及直接注射法是使外源基因在豚鼠耳蜗内表达的简便、有效途径。
- 时利翟所强杨伟炎董明敏
- 关键词：基因疗法耳蜗
- 人bFGF双顺反子真核表达载体的构建及其在听力损伤基因治疗中的实验研究
- 碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)是成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)家族的一员,已证明bFGF对耳毒性噪声损伤后的耳蜗毛细...
- 时利
- 关键词：碱性成纤维细胞因子耳蜗基因治疗
- 文献传递
