公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

PRL-3基因C104S位点突变体和CAAX缺失体的构建及表达被引量：1: 2009年; 目的:分别构建肝再生磷酸酶-3(phosphatase of regenerating liver 3,PRL-3)基因C104S位点突变和C端CAAX缺失的myc标签和GFP荧光标签重组质粒pcDNA3-myc-PRL-3(C104S)、pEGFP-PRL-3(C104S)、pcDNA3-myc-PRL-3(△CAAX)和pEGFP-PRL-3(△CAAX),并进行真核表达,为PRL-3的后续功能研究提供有效的工具。方法:设计PRL-3基因C104S点突变、C端CAAX缺失的特异性引物,以pcDNA3-myc-PRL-3质粒为模板,通过基因克隆、一步法点突变的方法构建各重组质粒,通过酶切和测序鉴定后转染真核细胞,检测其在细胞中的表达并观察定位情况。结果:成功构建了4种重组质粒,并能在结肠癌细胞LoVo中表达。用激光共聚焦扫描显微镜对细胞中绿色荧光融合蛋白的定位观察发现,当PRL-3的CAAX位点缺失后,PRL-3由内膜系统大量入核,与理论预期相符。结论:获得了PRL-3基因C104S位点突变体和CAAX缺失体重组真核表达质粒并能在细胞中表达,为进一步研究PRL-3的功能提供了条件。; 李伟军邢晓芳曲立科孟麟寿成超; 关键词：蛋白质酪氨酸磷酸酶点突变基因缺失

酪氨酸磷酸酶PRL-3增加人胃癌细胞BGC823的SP细胞比例并提高其对化疗药物的耐受性被引量：4: 2013年; 蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3是近年发现的蛋白酪氨酸磷酸酶家族成员,能促进肿瘤细胞的侵袭、转移及上皮细胞间质转型,提示PRL-3可能在肿瘤发生发展及诱导肿瘤干细胞生成中发挥重要作用.由于侧群(SP)细胞具有许多干细胞的性质,SP细胞分选是目前筛选和分离获得干细胞或前体细胞常用的有效方法.为探讨PRL-3在诱导干细胞生成中的潜在作用,本文在建立过表达PRL-3的人胃癌细胞BGC823的基础上,通过SP分选和CCK-8的方法分析PRL-3对BGC823细胞中SP细胞的比例以及对化疗药物耐受性的影响.结果提示,高表达PRL-3提高BGC823中SP细胞的比例(2.5%vs 9.4%),同时增加BGC823对化疗药物紫杉醇和顺铂的耐受性(相对于对照细胞,其耐药指数分别为1.75和1.29).由于SP细胞的产生和细胞耐药性的提高与ABC家族基因表达水平上调密切相关,通过定量RT-PCR和Western印迹检测发现,PRL-3能上调ABCB1和ABCG2的表达.上述研究结果表明,PRL-3有可能通过上调ABCB1和ABCG2的表达,增加胃癌细胞BGC823的SP细胞比例并增加其对化疗药物的耐受性.; 宋倩孟麟曲立科廉沈沂寿成超; 关键词：PRL-3 侧群细胞

分子佐剂TBhsp和MT在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体制备中的作用: 2014年; 目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp-PRL-3和pET28a-TBhsp-PRL-3-MT,并纯化其表达蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测并比较各组的抗血清效价,选取效价最高的小鼠,采用杂交瘤技术制备PRL-3 mAb,并进行类和亚类鉴定。结果成功构建了上述4种PRL-3相关的重组表达质粒,并表达纯化出相应的融合蛋白,其中PRL-3-MT融合蛋白免疫组抗体效价高于其他组;用该组小鼠进行细胞融合并筛选获得均为IgG类的10株分泌PRL-3 mAb的细胞株。结论 MT在PRL-3 mAb制备中可以发挥较为明显的免疫佐剂作用。; 曹燕飞吕娟孟麟曲立科寿成超

三阴乳腺癌较差预后相关分子的信息学挖掘和鉴定: 目的与非三阴乳腺癌(NTNBC)相比,三阴乳腺(TNBC)癌具有更强的临床症状表现和更差的预后,且一般对使用激素或曲妥珠单抗(Trastuzumab)治疗无效。目前,对于三阴乳癌治疗的系统性治疗基本依赖化疗药物,但效果往...; 章程韩勇黄昊闵力曲立科寿成超; 关键词：三阴乳腺癌生物信息学基因筛选

沉默PES1基因表达对结肠癌细胞恶性表型的抑制作用被引量：2: 2015年; 目的 :探讨核仁蛋白PES1(pescadillo homolog 1)对结肠癌细胞恶性表型的影响。方法 :构建针对PES1基因的sh RNA干扰质粒,将其转染结肠癌HCT116细胞,经G418筛选耐药细胞克隆,蛋白质印迹法验证靶基因的沉默效果。采用MTT法、平板克隆形成实验、裸鼠成瘤实验、Transwell迁移及侵袭实验和FCM法分别检测沉默PES1表达对HCT116细胞增殖、克隆形成、体内成瘤、体外迁移和侵袭以及凋亡的影响,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达水平。结果 :成功获得PES1稳定低表达的结肠癌HCT116细胞。沉默PES1表达后,HCT116细胞的增殖、克隆形成和裸鼠体内成瘤能力均明显降低(P值均<0.01),细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P值均<0.01),细胞凋亡水平明显提高(P<0.05)。PES1表达被抑制后,HCT116细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P值均<0.01),而Bcl-2相互作用杀伤蛋白(Bcl-2 interacting killer,BIK)、prune同源蛋白2(prune homolog 2,PRUNE2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 3,TIMP3)的m RNA表达水平明显升高(P值均<0.01)。结论 :PES1可能对结肠癌细胞的多种恶性表型起促进作用。; 谢玮苏亚辉冯勤曲立科寿成超; 关键词：结肠肿瘤 RNA干扰

肿瘤转移灶克隆形成机制的研究进展被引量：3: 2013年; 转移灶克隆形成的概念由Weinberg等人在2011年提出,是指肿瘤细胞从原发灶脱落,经转移到达潜在的位点,在重新获得增殖能力后,由微小转移灶逐步生长扩大,形成肉眼可见的转移灶的过程。该过程是转移中的限速阶段,只有少部分转移细胞能够成功形成转移灶克隆。这一过程受到多类相关基因的调控,并与组织器官的结构有关。本文综合已经发表的一些研究结果,从形成过程、特点及影响因素等多个方面对转移灶克隆形成的机制进行了总结和分析,同时针对癌症转移这一特点的治疗方法进行了相关探讨。; 曾妍章程曲立科寿成超; 关键词：肿瘤转移基因表达调控肿瘤微环境

胃癌细胞MGC-803耐药细胞株的建立及分泌蛋白差异分析被引量：3: 2014年; 目的:应用蛋白质组学技术系统比较5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂耐药细胞与敏感细胞的分泌蛋白表达谱,以期发现胃癌耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法:通过药物梯度诱导建立胃癌MGC-803耐药细胞株。从培养上清中收集MGC-803亲代及耐药细胞的分泌蛋白,应用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)进行分离,通过PD Quest 7.1.0软件分析获得差异蛋白,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行鉴定,并用实时定量PCR检测各差异蛋白在耐药细胞株和亲本细胞间mRNA水平上的表达差异。结果:分别建立了对5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂耐药指数为110.6、70.0和13.3的耐药细胞株。顺铂耐药细胞对5-氟尿嘧啶和紫杉醇、5-氟尿嘧啶耐药细胞对紫杉醇均有较强的交叉耐药,前者耐药指数分别为23.5和114.0,后者为70.0。制备获得了耐药细胞培养上清的双向凝胶电泳蛋白组分图谱;经PD Quest软件分析获得18个差异在2倍以上、3株耐药细胞培养上清中丰度均增高的蛋白点,其中13个得到了质谱鉴定,它们分别属于蛋白酶类、信号转导分子等。与亲本细胞相比,在mRNA水平上,SLMAP、TOP3A、DYNC1H1、RHPN1、PUF60和SIAH1在3种耐药细胞中皆有明显上调;IFT172、FILIP在耐5-氟尿嘧啶和紫杉醇细胞中上调显著;PLVAP、LMNA在耐紫杉醇及顺铂细胞中表达有所升高,但在耐5-氟尿嘧啶细胞中升高不显著。在蛋白水平上的进一步验证发现,SIAH1在3种耐药细胞中的表达量及培养上清中的含量皆有升高。结论:本研究以胃癌细胞MGC-803为亲本细胞分别建立了针对5-氟尿嘧啶、紫杉醇及顺铂的耐药细胞株,在此基础上应用双向电泳及蛋白质谱技术,整体展示了耐药细胞与亲本细胞的差异分泌蛋白,并发现SIAH1蛋白在耐�; 黄昊韩勇吴健田志华曲立科寿成超; 关键词：抗药性多药蛋白质组学

乙酰转移酶Naa10p在不同肿瘤发生发展中作用的研究: :寻找新的肿瘤相关抗原和具有临床价值的分子标记物,并研究该分子标记物在不同肿瘤发生发展中的作用,探究其表达水平与结直肠癌、乳腺癌两种肿瘤患者生存预后的关联。方法:通过噬菌体展示肽库筛选与结直肠癌患者血清中抗体特异...; 闵力姜北海曾妍徐慧玉曲立科寿成超; 关键词：结直肠癌乳腺癌乙酰转移酶预后机制

Annexin A2和支原体蛋白P37的N′端多肽可分别通过竞争抑制阻断猪鼻支原体感染细胞: 目的支原体感染对细胞培养所造成的污染问题已经发展成一个世界性的难题,此外,支原体感染同肿瘤发生与进展的关系也有了较多的证据,其中猪鼻支原体感染扮演着非常重要的角色。目前用于预防和治疗支原体的药物常因特异性低、耐药性强及毒...; 袁仕琴曲立科寿成超; 关键词：多肽; 文献传递

全选清除导出

共1页<1>

曲立科

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

曲立科

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈