李东
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院微生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人类致病菌新型隐球酵母Snf1/AMPK蛋白激酶调节细胞壁的完整性(英文)被引量：2
- 2011年
- 【目的】Snf1/AMPK在真核生物中是重要的且高度保守的一类蛋白激酶。在新型隐球酵母中,SNF1基因在调节致病因子的生物合成和细胞毒力方面具有重要作用。本文进一步报道了该基因在维持细胞壁完整方面的新功能,这一功能在其他微生物中未见报道。【方法】利用荧光增白剂染料(Calcofluor white dye)染色,荧光显微观察细胞分离、胞壁完整性;利用恒定流速和压力水流冲击菌落,测定细胞黏附琼脂表面能力;在含有十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS),刚果红(Congo red)染料和增白剂(FluorescentBrightener 28)的培养基上观察突变株的生长情况,以验证细胞壁完整性。【结果】SNF1基因突变菌株对细胞壁抑制剂SDS等敏感,表明细胞壁完整性的损坏;在葡萄糖固体培养基上表现为细胞与琼脂间的黏附力丧失;在热击压力下,该菌株不能正常生长,而这种生长缺陷能够被渗透平衡抑制。【结论】新型隐球酵母SNF1基因对于维持细胞壁完整性是非常重要的,并且影响细胞与琼脂间黏附作用以及细胞对抗热的能力。
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- 新型隐球酵母氯离子通道在阳离子内稳态中的趋异作用
- 2012年
- 新型隐球酵母Cryptococcus neoformans有两个变种(varieties),即grubii和neoformans。目前研究最多的两个菌株H99(血清型A)和JEC21(血清型D)分别代表这两个变种,两者的毒性差别显著,为研究新型隐球酵母菌株间毒性的进化提供了良好模型。通过比较JEC21的clc1-突变体Tx1与早先鉴定的H99clc1-菌株Mlac3发现,JEC21CLC1同样决定铜离子的吸收。Tx1中丧失的漆酶活力可以通过外源Cu2+的加入得以恢复,而漆酶基因LAC1的转录与野生型相比没有明显变化,此外铜离子转运蛋白基因CTR4在Tx1中的转录水平有着明显的上调,并且不能被外源铜离子抑制--这说明Tx1细胞中缺乏铜离子。另外实验发现,Tx1对1mol/L Na+或者K+十分敏感,生长受到明显的抑制,而Mlac3则不受影响。同时,与Mlac3不同,Tx1在pH8.0的条件下仍然能够正常生长。实验表明,CLC1在新型隐球酵母不同变种中对于Cu2+存在相同调节作用,但是对于Na+、K+、H+的调节作用在JEC21与H99菌株间存在差异。这个工作对于解释H99和JEC21间的毒力差异提供了证据。
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- 关键词：漆酶阳离子
