李文平
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼠源抗体的基因改造工程的发展与未来
- 1999年
- 李文平宋增璇
- 关键词：重组蛋白质免疫原性人源化基因工程
- 人源化抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的表达和功能被引量：1
- 2000年
- 目的 探索人源化抗人纤维蛋白单链抗体 链亲和素融合蛋白的表达和功能。方法 构建人源化抗人纤维蛋白单链抗体 (ScFv 8E5 )基因与链亲和素基因的重组表达载体 ,制备融合蛋白 ,ELISA观察其稳定性、与人及不同动物纤维蛋白的反应。结果 人源化融合蛋白可特异性识别人、大鼠、豚鼠纤维蛋白 ,同时有生物素的结合位点 ,且稳定性好 ,可耐受至少两周 4℃保存 ,数次反复冻融或一定时间的 37℃孵育。结论 此人源化融合蛋白适用于大鼠及豚鼠血栓病模型 ,是作临床前研究的有用材料。
- 李文平许静隋建华徐冬宋增璇
- 关键词：抗纤维蛋白人源化融合蛋白链亲和素单链抗体
- 一种人FLT3配基同源异型蛋白在组织中的分布被引量：1
- 1999年
- 目的研究人ＦＬＴ３配基膜外区缺失１３９ｂｐ的同源异型蛋白在组织中的分布特点。方法采用聚合酶链或逆转录聚合酶链反应法对ＦＬＴ３配基在人肝脏、脑、骨髓、肌肉、肾脏、正常人外周血及４种白血病细胞系中的分布进行了研究，并利用ＤＮＡ测序法鉴定ＰＣＲ产物。结果除脑中未见ＦＬＴ３配基表达外，在肝脏、肌肉、骨髓、肾脏、胎肝、正常人外周血细胞及白血病细胞系中均可检测到ＦＬＴ３配基，而膜外区缺失１３９ｂｐ的ＦＬＴ３配基同源异型蛋白只分布于骨髓、胎肝中。结论ＦＬＴ３配基膜外区缺失１３９ｂｐ的同源异型蛋白分布于造血组织中，可能与造血调控有关。
- 李会良蔡英林许静李文平马正宇罗寿青郭亚林
- 关键词：FLT3配基造血组织
- 抗人纤维蛋白单链抗体重链可变区的人源化
- 1999年
- 目的人源化抗人纤维蛋白单链抗体的重链，降低人抗鼠抗体反应。方法从基因文库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体重链（ＶＨ－８Ｅ５）同源性７１．８％的人源免疫球蛋白ＨＵＭＨＣＨ１０９重链（ＶＨ）序列，作为人源化改造ＶＨ－８Ｅ５的框架。人工合成人源化ＶＨ－８Ｅ５片段，用连接酶连接成完整的人源化ＶＨ－８Ｅ５，构建表达载体ｐＯＰＥ１０１－ＶＨ－８Ｅ５。转化ＪＭ１０９后用异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷诱导表达。结果经聚丙烯酰胺电泳和ＥＬＩＳＡ证明表达产物相对分子质量３０×１０３左右，有特异性识别和结合人纤维蛋白能力，是亲本抗体ＳｃＦｖ－８Ｅ５活性的４／５左右。人源化ＳｃＦｖ－８Ｅ５表达产量为转化菌总蛋白的１１．２％。结论人源化ＶＨ－８Ｅ５仍具有特异性识别人纤维蛋白的活性。
- 李文平蔡英林许静许静李彬李彬
- 关键词：单链抗体免疫原性人源化
- 抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的稳定性及对动物纤维蛋白的识别被引量：1
- 1999年
- 目的：探索抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白的应用前景。方法：构建抗人纤维蛋白单链抗体ｓｃＦｖ８Ｅ５基因与链亲和素基因的重组表达载体ｐＳＴＥ２８Ｅ５ ，表达的融合蛋白可特异性识别人纤维蛋白，同时有生物素的结合位点。转化ＪＭ１０９ 后用ＩＰＴＧ 诱导表达，ＥＬＩＳＡ 观察融合蛋白的稳定性。结果：抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白稳定性好，可耐受至少２ ｗ ，４ ℃保存、数次反复冻融或一定时间的３７ ℃孵育。它能与大鼠和豚鼠的纤维蛋白结合，而与猪纤维蛋白反应不明显。结论：抗人纤维蛋白单链抗体链亲和素融合蛋白适用于大鼠或豚鼠血栓病模型，是临床前研究的有用材料。
- 李文平许静隋建华宋增璇
- 关键词：链亲和素融合蛋白抗纤维蛋白稳定性
- 抗人纤维蛋白单链抗体的人源化被引量：5
- 1999年
- 目的：人源化抗人纤维蛋白单链抗体，降低人抗鼠抗体反应。方法：从人免疫球蛋白基因数据库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体ｓｃＦｖ－８Ｅ５重链（ＶＨ－８Ｅ５）和轻链（ＶＬＳＭ）同源性最高的序列，作为人源化改造的框架，其中植入ｓｃＦｖ－８Ｅ５的互补决定区。人工合成其ＤＮＡ片段，用ＤＮＡ连接酶连接成完整的人源化ＶＨ－８Ｅ５和ＶＬ－８Ｅ５，构建表达载体，转化ＪＭ１０９后用ＩＰＴＧ诱导表达，ＥＬＩＳＡ测定其抗原结合活性。结果：表达产物分子量３０ｋＤ左右，人源化ｓｃＦｖ－８Ｅ５与亲本抗体ｓｃＦｖ－８Ｅ５抗原结合活性无明显差别，可耐受至少２ｗ，４℃保存，数次反复冰融或一定时间的３７℃孵育。结论：人源化ｓｃＦｖ－８Ｅ５具有特异性识别人纤维蛋白的活性，鼠源ｓｃＦｖ－８Ｅ５的人源化基本获得成功。
- 李文平许静李彬蔡英林宋增璇
- 关键词：单链抗体免疫原性人源化
- 大肠良恶性肿瘤核仁组成区蛋白定量测定的临床诊断价值
- 1998年
- 应用AgNORs银染技术结合图像分析对67例大肠癌(其中45例有癌旁粘膜)、39例腺瘤及15例正常大肠组织进行了AgNORs检测和分析。大肠癌与良性病变(腺瘤、癌旁粘膜、正常肠粘膜)的AgNORs各项参数之间有显著性差异(P<0.01)。经逐步判别对AgNORs参数评定,选出2项较优指标(颗粒数、颗粒总面积),建立判别函数,对良性病变及大肠癌的判定回代符合率分别为94.79％、86.57％。结果表明,图像分析结合有效的统计学方法,能对大肠良恶性病变诊断提供客观可靠的依据。AgNORs测定对鉴别大肠良恶性肿瘤有重要意义。
- 李文平夏养志王焕华陈玲金丽萍
- 关键词：大肠肿瘤AGNOR染色
- 单链抗体分子与链亲和素融合蛋白的制备<英文>被引量：4
- 1999年
- 研究了抗人纤维蛋白单链抗体分子scFV-8E5与链亲和素融合蛋白的制备。链亲和素拼接在scFV-8E5 cDNA的3’端,制备的融合蛋白单体分子量约45kD。表达产物少数为周质间可溶型蛋白,多数为包涵体。无论是可溶型的蛋白产物或从包涵体中回收并复性的蛋白产物均有结合人纤维蛋白和生物素的功能。这个双特异性融合蛋白的成功制备证明了在scFV-8E5的3’端拼接其它效应分子的可行性。
- 许静李文平隋建华宋增璇
- 关键词：链亲和素单链抗体融合蛋白抗纤维蛋白
