李玉媚 作品数:15 被引量:28 H指数:4 供职机构: 广西医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西卫生厅科研项目 广西壮族自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
miR-24靶向调控Sp1与鼻咽癌放射增敏作用的关系的研究 康敏 黄婷婷 吴芳 丁华 胡凯 黄素宁 龙沙 李玉媚 张文宇 毛艳 鼻咽癌是广西高发肿瘤,治疗以放疗为主;对放射线抗拒是其局部治疗失败及预后不良的主要原因。增加肿瘤细胞对放射治疗的敏感性是提高鼻咽癌放射治疗效果的关键;近年来,从分子基因组学的角度寻找高效的新型功能性分子(例如功能性mic...关键词:关键词:鼻咽癌 肿瘤治疗 AS-miR-21对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及对PTEN/PI3K/Akt信号通路的作用 被引量:4 2016年 目的探讨miR-21的反义寡核苷酸(AS-miR-21)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和迁移能力的影响及对PTEN/PI3K/Akt信号通路的调控作用机制。方法将NSCLC A549细胞分为3组,分别为AS-miR-21组、miR-NC组和Blank组,前两组分别应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000瞬时转染ASmiR-21及阴性对照miRNA(miR-NC),后者未进行任何干预。应用qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLC A549细胞中miR-21表达的影响;应用MTT检测NSCLC A549细胞增殖抑制率;Giemsa染色检测NSCLC A549细胞克隆形成;细胞划痕实验检测NSCLC A549细胞迁移潜能;qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLC A549细胞中PTEN mRNA表达水平的影响;蛋白质免疫印迹法检测AS-miR-21对NSCLC A549细胞中PTEN、PI3K、Akt蛋白表达水平的影响。结果与miR-NC组和Blank组比较,AS-miR-21组miR-21表达水平下调(P<0.05);ASmiR-21显著抑制NSCLC A549细胞增殖能力(P<0.05),显著减少NSCLC A549细胞克隆形成(P<0.01)和迁移率(P<0.01);AS-miR-21显著上调NSCLC A549细胞中PTEN蛋白表达水平(P<0.01),而显著下调PI3K和Akt蛋白表达水平(P<0.01)。结论 AS-miR-21能抑制NSCLC A549细胞增殖及迁移,此外,AS-miR-21通过负调控PTEN/PI3K/Akt信号通路有可能成为NSCLC治疗新靶点。 王辉 黄江南 李玉媚 张文宇 陈伟 莫国君 罗雪兰 欧和生关键词:非小细胞肺癌 增殖 迁移 全文增补中 miRNA-24对内皮型一氧化氮合酶表达调节及血管内皮细胞增殖的影响 被引量:8 2014年 目的:为进一步探讨miRNA-24是否参与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的调控及其对血管内皮细胞增殖的影响,本研究构建miRNA-24高表达质粒,并用脂质体将其导入人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察miRNA-24对eNOS表达及HUVECs增殖的影响。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,RT-PCR、免疫组织化学和Western blotting检测eNOS与Sp1转录因子mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,miRNA-24高表达组细胞增殖减慢41.97%(0.47±0.04 vs 0.81±0.03,P<0.01),eNOS mRNA降低44.8%(0.48±0.01 vs 0.87±0.03,P<0.05),蛋白表达减少71.92%(0.16±0.06 vs 0.57±0.08,P<0.05);同时Sp1 mRNA降低53.00%(0.45±0.02 vs 0.93±0.01,P<0.05),其蛋白质表达量也相应减少62.31%(0.13±0.07 vs 0.31±0.09,P<0.05)。miRNA-24抑制组中,上述指标比对照组降低,但比miRNA-24高表达组明显升高。结论:miRNA-24高表达明显抑制HUVECs的增殖及eNOS的表达;Sp1可能是参与miRNA-24调控eNOS表达的重要因素之一。 张文宇 王辉 李玉媚 陈伟 胡楠 欧和生关键词:细胞增殖 一氧化氮合酶 一氧化氮 高血压相关性内皮型miRNAs的鉴定与功能分析及其对高血压的治疗价值研究 欧和生 康敏 张文宇 李玉媚 罗雪兰 陈伟 莫国君 杨 高血压病是最常见的心血管疾病,被称为严重危害人类健康的“第一杀手”。降低血压仍是治疗高血压的对症措施,传统的抗高血压药虽然在降压方面有明显作用,但其对高血压的治疗率很低。因此,寻找更高效、无副作用的抗高血压新药是心血管领...关键词:关键词:高血压 心血管疾病 AS-miR-21对鼻咽癌转移潜能及其对Bcl-2调控作用研究 被引量:2 2014年 目的探讨AS-miR-21对鼻咽癌转移潜能及其对Bcl-2调控作用机制。方法应用MTT检测鼻咽癌细胞增殖抑制率;Giemsa染色检测鼻咽癌细胞克隆形成;细胞划痕实验检测鼻咽癌细胞迁移能力;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bcl-2 mRNA表达;免疫组化方法和蛋白质印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平。结果结果显示,AS-miR-21、miR-21和miR-NC组24hA值分别为0.12±0.01、0.23±0.02和0.22±0.02,F=106.47,P<0.000 1;48hA值分别为0.21±0.02、0.53±0.03和0.52±0.02,F=340.01,P<0.000 1;72hA值分别为0.43±0.03、0.75±0.03和0.66±0.02,F=209.45,P<0.000 1;96hA值分别为0.74±0.02、0.95±0.03和0.93±0.01,F=114.52,P<0.000 1。Giemsa染色结果显示,AS-miR-21组克隆形成率为(0.35±0.02)%,比对照组的(0.65±0.06)%减少46.2%,t=8.215 8,P=0.001 2;miR-21组克隆形成率为(0.82±0.08)%,比对照组的(0.65±0.06)%增加20.7%,t=2.944 5,P=0.042 2。划痕实验结果显示,12h后AS-miR-21组愈合率为(0.207±0.015)%,比对照组的(0.487±0.032)%减少57.49%,F=185.68,P<0.000 1;24h后AS-miR-21组愈合率为(0.471±0.002)%,比对照组的(0.810±0.036)%减少41.85%,F=264.96,P<0.000 1。RT-PCR结果显示,AS-miR-21组Bcl-2 mRNA表达为0.252±0.053,比对照组的1.000±0.095减少74.8%,t=11.909 6,P=0.000 3;miR-21组Bcl-2 mRNA表达为1.837±0.152,比对照组的1.000±0.095增加83.7%,t=8.087 9,P=0.001 3。免疫组化结果显示,AS-miR-21组Bcl-2蛋白表达灰度值为196.2±11.8,比对照组的126.9±7.3减少54.6%,t=15.793 7,P<0.000 1。蛋白质印迹结果显示,AS-miR-21组Bcl-2蛋白表达为0.125±0.073,比对照组的1.000±0.163减少87.5%,t=15.492 7,P<0.000 1;miR-21组Bcl-2蛋白表达为2.018±0.182,比对照组的1.000±0.095增加101.8%,t=13.176 1,P<0.000 1。结论AS-miR-21能抑制鼻咽癌迁移及增殖并促进其凋亡,此外,AS-miR-21通过负调控Bcl-2有可能成为鼻咽癌新靶点之一。 李玉媚 王辉 康敏 胡楠 张文宇 陈伟 欧和生关键词:MIR-21 反义寡核苷酸 鼻咽肿瘤 BCL-2 广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化及体外抗血小板聚集作用 被引量:1 2013年 目的从广西眼镜蛇粗毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO),并对其物理、生化性质及体外抗血小板聚集作用进行研究。方法用Sephacryls-200凝胶过滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换,CM-SepharoseCL-6B离子交换层析法分离纯化广西眼镜蛇毒中的LAAO,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在还原与非还原条件下测定其蛋白分子量,等电聚焦法测定等电点,比浊法测定广西眼镜蛇LAAO对二磷酸腺苷、胶原、凝血酶、花生四烯酸引起的血小板聚集率的影响。结果从广西眼镜蛇毒中分离出的LAAO分子量约为55.2 KD,等电点为7.6;生物活性检测发现,该蛋白不具有磷脂酶A2和精氨酸酯酶活性,无纤溶及出血活性,能明显抑制二磷酸腺苷、胶原、凝血酶、花生四烯酸引起的血小板聚集,并呈明显的正相关。结论分离纯化的广西眼镜蛇毒LAAO为电泳纯,并具有较强的抑制体外血小板聚集作用。 王辉 张文宇 李玉媚 欧和生关键词:蛇毒 L-氨基酸氧化酶 分离纯化 血小板聚集 阿托伐他汀通过转录因子AP1抑制AS大鼠VSMC增殖及促凋亡 2014年 目的探讨阿托伐他汀对动脉粥样硬化(AS)大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)调节及转录因子AP1的作用。方法 80只大鼠随机分为:普通饲料组、AS组和阿托伐他汀高低剂量组(40和10 mg/kg·d)。用原位TUNEL检测细胞凋亡;用免疫组化检测血管中AP1和α-SM-actin蛋白表达;用蛋白免疫印迹法检测血管相关蛋白AP1表达。结果阿托伐他汀高和低剂量组TG、TC和LDL明显下降(P<0.05)。阿托伐他汀抑制AS大鼠VSMC增殖,促进其促凋亡(P<0.05)。阿托伐他汀干预后AS大鼠VSMC中AP1和α-SM-actin蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论阿托伐他汀通过下调AP1抑制AS大鼠VSMC增殖及促凋亡。 李玉媚 王辉 康敏 张文宇 陈伟 胡楠 欧和生关键词:阿托伐他汀 血管平滑肌细胞 27nt miRNA对eNOS调节及HUVECs增殖相关因子AP-1作用机制研究 目的: 前期工作发现,内皮型一氧化氮合酶第4内含子的27碱基重复子产生相应27nt miRNA,并对eNOS的转录和表达有负反馈调节作用。进一步探讨该内含子源性27nt miRNA对内皮型一氧化氮合酶基因调节的分子机制... 李玉媚关键词:脐静脉内皮细胞 文献传递 内含子源性miRNA通过转录因子AP1调节内皮型一氧化氮合酶表达及血管内皮细胞增殖作用 被引量:3 2014年 目的前期工作发现,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)第4内含子的27碱基重复子产生相应27-nt miRNA,并对eNOS的转录和表达有负反馈调节作用。进一步探讨该内含子源性27-nt miRNA对内皮型一氧化氮合酶基因调节的分子机制及血管内皮细胞增殖相关转录因子AP1的作用机制。方法应用MTT法检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖抑制率;细胞划痕实验检测HUVEC迁移能力;免疫组织化学方法检测内皮细胞中eNOS和AP1蛋白表达水平;进一步用Western Blot检测27-nt miRNA表达相关情况及细胞核转录因子eNOS表达情况。结果27-nt miRNA对HUVEC增殖具有强烈抑制作用(P<0.05);27-nt miRNA对HUVEC迁移具有显著抑制作用(P<0.05);27-nt miRNA显著降低eNOS和AP1蛋白表达(P<0.05);27-nt miRNA通过负调控AP1降低eNOS蛋白表达(P<0.05)。结论 27-nt miRNA显著抑制eNOS和AP1蛋白表达,AP1在27-nt miRNA对eNOS表达调节中起重要作用。 李玉媚 王辉 张文宇 陈伟 胡楠 欧和生关键词:MIRNA 内皮型一氧化氮合酶 miRNA对血管内皮细胞功能调节的研究进展 被引量:5 2014年 miRNA是一类长约18~24个核苷酸的高度保守性的小分子非编码RNA,主要通过与特异性靶基因miRNA 3’-UTR区结合来调控基因的表达。miRNA与细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育、组织器官等形成以及多种疾病的发生发展密切相关。新近研究显示,内皮型miRNA对心血管内皮细胞生理功能具重要的调节作用。本文就miRNA对血管内皮细胞功能调节的研究进展作一概述。 李玉媚 欧和生关键词:MIRNA 血管内皮细胞 基因表达