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李玥: 作品数：37 被引量：79H指数：5; 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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华支睾吸虫ICT和PCR检测方法的建立及其应用研究被引量：4: 2016年; 目的建立华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,比较两者检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S r RNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫Ig G抗体阳性例数为20例,阳性率为10.0%;ICT法为16例,阳性率为8.0%,灵敏度为80.0%,特异度为100.0%,符合率为98.0%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=2.25,P>0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9.0%,灵敏度为90.0%,特异度为100.0%,符合率为99.0%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=0.05,P>0.05)。说明ICT、RT-PCR两种检测方法与ELISA的测定结果比较一致。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高,两种检测方法均适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。; 李佳陈春红张仁利阳帆吴春利李玥唐屹君黄达娜; 关键词：华支睾吸虫免疫胶体金实时荧光定量PCR

深圳市首例本地登革热3型病例的病原学检测与分析: 2017年; 目的对2016年深圳市报告的首例本地疑似登革热病例查明病因.分离鉴定病原体,从分子水平分析分离株的生物学特征.方法对疑似患者血清标本采用ELISA、胶体金免疫层析法和荧光RT-PCR方法分别检测登革病毒抗体、NS1抗原和病毒核酸,并用C6/36细胞分离登革病毒.采用RT-PCR方法扩增病毒PrM/M-E基因后进行序列测定,并与不同国家和地区的登革毒株进行同源性比较和进化树分析.结果从患者血清标本中检测到登革病毒IgM抗体、NS1抗原和登革3型病毒核酸,并成功分离到登革3型病毒,将其命名为DENV3-SZ1648.深圳市登革3型病毒分离株SZ1648与登革3型国际标准株H87株、国内外流行株80-2、GWL-25株在PrM/M-E基因上核苷酸同源性分别为92.0％、91.8％和90.3％,而与登革1、2、4型国际标准株HAWAII、NGC、H241同源性分别为68.7％、64.2％和63.2％.进化树显示SZ1648株与2007年印度尼西亚分离株MKS-0098亲缘关系最近,在进化树的同一分支上,和85-159株（Indonedia 1985）、2167株（Tahiti 1989）、29472株（Fiji1992）等同属基因Ⅰ亚型.患者发病前1个月在深圳居住,无输血史、无外出史.结论从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该本地病例是由登革3型病毒引起,这也是深圳市首次报道存在本地登革3型病毒的疫情,该毒株最有可能来源于印度尼西亚.; 阳帆王敬忠黄亚兰吴春利黄达娜李玥唐屹君张仁利; 关键词：登革3型病毒

异尖线虫的实时荧光PCR检测试剂盒及检测方法: 本发明提供了一种异尖线虫的实时荧光PCR检测试剂盒，包括PCR特异性引物和荧光探针；其中，PCR特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的异尖线虫核糖体18s上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序...; 黄达娜张仁利阳帆吴春利李玥武伟华耿艺介李晓恒高世同; 文献传递

深圳市2014年登革热流行病学和病原学特征研究被引量：9: 2016年; 目的研究深圳市2014年登革热疫情的流行病学特征，分析流行毒株的分子进化特征，为今后登革热的防控提供科学指导。方法采用描述性流行病学方法分析2014年深圳市登革热疫情，分别采用胶体金免疫层析法和荧光PCR检测疑似登革热患者血清中的特异性IgM、IgG抗体和病毒核酸，并用C6/36细胞对急性期血清进行病毒分离，采用荧光PCR方法对其进行型别鉴定。同时扩增病毒E基因后进行序列测定，并与不同国家和地区的登革热毒株进行同源性比较和进化树分析。结果2014年深圳市累计报告登革热病例454例，以本地病例为主（占76.21%），输入病例以东南亚国家及周边城市为主（占23.79%）。发病高峰为9—11月（占97.14%）。发病人群以20～50岁青壮年人群为主，占病例总数的76.73%，男女比为1.43∶1。对332份病毒核酸阳性标本进行分型检测，共检出270例，型别以1型登革病毒（DENV-1）为主（占87.41%），其次为DENV-2（占8.89%）。进化分析发现深圳地区流行的DENV-1分布在两个分支上，其一为基因Ⅰ亚型，与深圳市2010年首次本地暴发疫情流行株同源性较高；其二为基因Ⅴ亚型，为深圳市首次报道。DENV-2核苷酸序列的差异相对较小，均为基因Ⅳ亚型。结论2014年深圳市报告登革热病例达到历年高峰，其流行具有输入病例与本地传播并存特点，主要是DENV-1流行，同时今年新出现DENV-2型病例明显增多，推测主要流行株由东南亚国家及周边城市输入，是否具有地方性登革热流行趋势还需进一步研究。; 阳帆王敬忠吴春利黄达娜李玥满云翔李瑞敏唐屹君张仁利; 关键词：登革病毒 E基因进化分析

深圳市3例由输入性病例引发的本地登革热病例溯源调查被引量：4: 2019年; 目的对深圳市2017年本地感染登革热病例进行病原溯源研究。方法对3例本地感染登革热病例开展流行病学调查,采集患者血清进行登革病毒IgM与IgG抗体、NS1抗原和核酸检测。用C6/36细胞进行病毒分离,用荧光RT-PCR方法对其进行型别鉴定。采用RT-PCR方法扩增病毒E基因后,进行序列测定构建进化树。结果实验室检测3例本地病例登革病毒核酸及NS1抗原均为阳性。分离到的2株登革毒株与1株马来西亚输入病例分离株E基因序列同源性为100%,为登革病毒2型Ⅳ亚型,与马来西亚2014年流行株TM280亲缘关系最近,核苷酸和氨基酸同源性分别为99.7%和99.8%,病毒株来源于马来西亚的可能性较大。结论现场流行病学资料和实验室分子遗传学分析均提示,深圳市2017年3例本地感染登革热病例可能是由马来西亚旅游归国的输入性病例引发的继发病例。; 阳帆张仁利何雅青黄亚兰李玥熊玲红张晓敏; 关键词：登革热 E基因流行病学

异尖线虫的实时荧光PCR检测试剂盒及检测方法: 本发明提供了一种异尖线虫的实时荧光PCR检测试剂盒，包括PCR特异性引物和荧光探针；其中，PCR特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的异尖线虫核糖体18s上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序...; 黄达娜张仁利阳帆吴春利李玥武伟华耿艺介李晓恒高世同

隐孢子虫PCR检测体系的建立及其应用被引量：3: 2016年; 目的建立快速检测隐孢子虫卵囊的PCR检测体系,以期在人群和食品及其饮用水腹泻原虫监测中推广应用。方法以隐孢子虫小亚基SSU r RNA和卵囊壁蛋白(COWP)为靶基因,设计巢式PCR和荧光PCR的引物和探针;以分离纯化后的微小隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行扩增,分别进行两种检测方法的敏感性和特异性试验;再用某水牛养殖场采集的58份牛粪样考核检测体系的应用价值。结果设计的巢式PCR引物和荧光PCR引物探针特异性都很高,巢式PCR对隐孢子虫DNA的检测最低OD阈值为2 pg隐孢子虫DNA;实时荧光PCR显示最低检测阈值为200 fg隐孢子虫DNA,灵敏性都比较高,实时荧光PCR的灵敏性比巢式PCR高1个数量级(10倍);58份检测样本中,有一份为阳性样本,PCR产物经序列分析显示为微小隐孢子虫。结论巢式PCR和实时荧光PCR检测隐孢子虫的特异性和灵敏性均高,操作简便,能为隐孢子虫感染的诊治和预防提供有效的技术手段和方法依据。奶牛感染人兽共患微小隐孢子虫基因亚型,具有人兽共患传播的可能性。; 黄达娜张仁利唐屹君李晓恒阳帆吴春利李玥曹建平; 关键词：隐孢子虫巢式PCR 荧光PCR

粪便中隐孢子虫的提取与检测方法的建立: 2014年; 目的建立粪便中隐孢子虫的提取与检测技术,分析腹泻病人粪便中隐孢子虫的感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据。方法选择经病原学检测已经确诊的5份隐孢子虫阳性和4份阴性粪便,分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA,经荧光PCR法进行扩增,比较核酸提取效果;同时用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法对63例腹泻病人隐孢子虫感染情况进行粪样检测分析。结果应用FTA卡抽提DNA效果优于应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA。同时对63份腹泻病人粪便运用直接涂片法、改良抗酸染色法及荧光PCR法都未检出隐孢子虫。结论应用FTA卡进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点,可以应用于粪便中隐孢子虫的检测,同时可联合多种检测手段来提高腹泻病人原虫感染的检出率。; 黄达娜唐屹君李迎慧阳帆吴春利李玥; 关键词：隐孢子虫

华支睾吸虫检测方法的建立及其应用研究: 目的建立和比较华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,并评价检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S rR...; 黄达娜张仁利阳帆吴春利李玥唐屹君; 关键词：华支睾吸虫 ICT RT-PCR; 文献传递

深圳市输入性基孔肯雅热病例的流行病学和病原学特征分析被引量：2: 2015年; 目的对深圳市2010年首例基孔肯雅热疫情及病原学特征进行分析。方法调查分析流行病学特点；对疑似患者血清标本采用ELISA和荧光PCR方法分别检测病毒IgM、IgG抗体和核酸，并用BHK-21细胞分离病毒。采用RT—PCR方法扩增病毒结构蛋白基因后进行序列测定，并与不同国家和地区的基孔肯雅毒株进行同源性比较。结果深圳市2010年10月报告的一起基孔肯雅热疫情为输入性病例。从患者血清标本中检测到病毒IgM抗体和核酸，并首次成功分离到基孔肯雅病毒，将其命名为CHIKV—SZ1050。深圳市基孔肯雅病毒分离株SZ1050与CHIKV非洲原型株S27-African、我国广东省2010年暴发疫情株GD05／2010、印度2010年流行株TN06310在E1基因上核苷酸同源性分别为98．2％、98．3％和98．7％。进化树显示SZl050株与2010年中国分离株GZ1029亲缘关系最近，其次为印度2010年流行株TN06310，属于ECSA基因型。结论从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该例基孔肯雅热输入病例是由基孔肯雅病毒ECSA基因型引起，病毒遗传特征与印度地区流行CHIKV-致，输入病例未引起继发病例。; 阳帆许少坚张仁利谢旭何雅青黄达娜武伟华李玥; 关键词：病人转诊基孔肯雅病毒流行病学研究

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