李里
- 作品数：23 被引量：42H指数：4
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 环磷腺苷效应元件结合蛋白磷酸化在胰岛素样生长因子-1抑制耳蜗毛细胞凋亡中的作用
- 2015年
- 目的探讨磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(P-CREB)对胰岛素样生长因子(IGF)-1抑制小鼠毛细胞凋亡的作用。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜。实验分为A组:正常对照培养液;B组:庆大霉素(GM)(0.5 mmol/L);C组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(1 ng/ml);D组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(10 ng/ml);E组GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(50 ng/ml);F组:GM(0.5 mmol/L)+IGF-1(100 ng/ml)。培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western印迹及RT-PCR法观察P-CREB的表达情况。结果 A组无凋亡细胞。B组检测到凋亡细胞。C组细胞凋亡较B组明显减少。D组凋亡细胞减少最明显(与B组相比,P<0.05)。E组及F组凋亡细胞较D组有所增加。P-CREB:Western印迹结果及RT-PCR结果表明:A组及B组P-CREB蛋白及m RNA表达较低。与B组相比,C、D、E及F组P-CREB蛋白及m RNA明显增加,以D组增加最明显。结论 IGF可能通过激活CREB磷酸化抑制毛细胞凋亡。
- 宫亮陈冬李里
- 关键词：毛细胞胰岛素样生长因子
- 胰岛素样生长因子-1受体在小鼠毛细胞发育过程中的表达
- 2013年
- 目的观察在小鼠耳蜗毛细胞中胰岛素样生长因子(IGF)-1受体(IGF1R)分布和表达情况,探讨其生物学特点。方法制作耳蜗组织铺片,采用荧光免疫组织化学染色方法,激光共聚焦显微镜观察小鼠发育期间(出生后P0-P20)的IGF-1R在耳蜗毛细胞的分布和定位。应用Western印迹及实时PCR法检测新生小鼠毛细胞在出生后不同时期IGF-1R蛋白及mRNA的表达水平。结果耳蜗组织铺片荧光免疫组织化学染色方法显示:IGF-1R在小鼠耳蜗发育过程中在毛细胞均有表达,部位在细胞膜上。随着年龄的增加表达减少。Western印迹及实时PCR显示小鼠耳蜗毛细胞的细胞膜蛋白及mRNA表达水平随着出生年龄增加而逐渐减少。P0组和P4组,P12组,P20组细胞膜蛋白及mRNA的表达水平相比具有明显差异(P<0.05),而P12和P20两组间比较无明显差异(P>0.05)。结论在小鼠耳蜗发育成熟过程中在耳蜗毛细胞IGF-1R均有表达,表达量随着出生年龄增加而减少。推测在内耳细胞发育增殖过程中起重要信号转导作用。
- 陈冬贺欣宫亮李里
- 关键词：胰岛素样生长因子受体毛细胞耳蜗
- Wnt通路对胰岛素样生长因子-1抑制小鼠毛细胞凋亡的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)抑制小鼠毛细胞凋亡作用的调控机制。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜。在分别含有正常对照培养液(A组)、0.5 mmol/L庆大霉素(GM)(B组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF(C组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+5μg/mL wif(D组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+10μg/mLwif(E组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+15μg/mL wif(F组)的成分中培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western blot及Real-time PCR法观察Caspase-3的表达情况。结果 B组耳蜗毛细胞经刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较A组明显上升(P<0.01),C组耳蜗毛细胞经IGF刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3mRNA和蛋白表达较B组明显下降(P<0.01),应用Wnt阻断剂(wif)后D、E及F组细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较C组升高,其中F组升高显著(P<0.01)。结论 IGF可能通过激活Wnt通路抑制毛细胞凋亡。
- 宫亮李里陈冬
- 关键词：胰岛素样生长因子-1CASPASE-3毛细胞凋亡
- 肺炎支原体感染致小儿大叶性肺炎63例分析
- 2009年
- 罗英李里
- 大鼠PAX2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及沉默效果
- 2014年
- 目的构建PAX2特异性shRNA干扰慢病毒载体并观察其对大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)中PAX2基因的沉默效果。方法采用PAX2基因RNAi靶点序列合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与pGCSIL-GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,经PCR筛选阳性克隆进行DNA测序鉴定。用脂质体转染法将质粒共转染293T细胞,将包装产生的慢病毒颗粒感染NRK52E细胞,RT-PCR、Western印迹检测PAX2 mRNA和蛋白的表达。结果 PCR与DNA测序证实合成的含PAX2 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。经RNA干扰后的靶细胞PAX2 mRNA及蛋白表达水平明显降低。结论成功构建人PAX2基因RNA干扰慢病毒载体,为以PAX2基因为靶点的梗阻性肾病基因治疗研究奠定了基础。
- 李里吴玉斌
- 关键词：PAX2慢病毒RNA
- 孕期不同时间低蛋白饮食致宫内发育迟缓鼠脑白质细胞凋亡的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨孕期不同时间给予低蛋白饮食致宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑白质细胞凋亡的影响。方法:怀孕wistar大鼠分为对照组(C组)及孕早期(E组)、孕中期(M组)、孕晚期低蛋白饮食组(L组),测量脑重及体重,观察脑组织损伤,脑细胞凋亡及Caspase-3表达情况。结果:出生时体重:E、M组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);脑重:E、M、L组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。E组出生时脑损伤病变较轻,2周时加重。细胞凋亡数量:出生时E、M、L组均明显高于C组,随年龄增加凋亡细胞数量逐渐减少,生后4周仅E组明显高于C组。Caspase-3的表达:出生时E、M、L组均明显高于C组,随年龄增加Caspase-3的表达逐渐减少,生后4周仅E组明显高于C组。结论:低蛋白饮食应用越早,脑白质细胞凋亡率越高,持续时间越长。Caspase-3活性增强参与了IUGR的病理过程,与细胞凋亡密切相关。
- 乐原李里王金凤
- 关键词：宫内发育迟缓低蛋白
- 孕期低蛋白饮食致脑损伤模型中中NF-KB表达变化的研究
- 2012年
- 目的利用宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑白质损伤模型,探讨孕期低蛋白饮食致脑损伤模型中NF-KB表达变化。方法 Wistar大鼠分为孕早期、孕中期及孕晚期低蛋白饮食组。各组大鼠分别于出生后各个时间点处死取材,观察脑组织损伤情况,检测脑细胞凋亡情况及NF-KB蛋白的表达。结果细胞凋亡数量:生后1天B组,C组及D组明显高于A组,生后4周仅B组明显高于A组。NF-KB的表达:生后1天B组、C组及D组明显高于C组,生后4周仅B组明显高于C组。结论孕期低蛋白饮食致脑损伤后NF-KB的表达增加,凋亡细胞增加,表明NF-KB参与了孕期低蛋白饮食致脑损伤过程。
- 李里乐原王金凤
- 关键词：低蛋白NF-KB细胞凋亡
- Wnt信号传导通路与肾纤维化被引量：1
- 2012年
- 肾纤维化是各种肾脏疾病进展到慢性肾功能衰竭的共同途径和主要病理基础。研究发现肾纤维化过程中存在Wnt信号传导通路，并且在肾纤维化的发生发展中起重要作用。该文就目前关于Wnt信号传导通路与肾纤维化研究的最新进展作一综述。
- 李里吴玉斌
- 关键词：WNT通路肾纤维化
- 小鼠螺旋神经节发育过程中IGF-1R表达的变化
- 2013年
- 目的观察胰岛素生长因子1受体(IGF-1R)在小鼠螺旋神经节(SGC)发育过程中表达和分布特点。方法制作耳蜗组织铺片,采用荧光免疫组织化学染色方法,激光共聚焦显微镜观察小鼠发育期间(出生后0～20 d)的IGF-1R在耳蜗SGC的分布和定位。应用Western印迹及实时PCR法检测新生小鼠SGC在出生后不同时期IGF-1R蛋白及mRNA的表达水平。结果耳蜗组织铺片标本荧光免疫组织化学染色方法显示IGF-1R在小鼠耳蜗发育期中在SGC均有表达,表达在整个细胞膜上。Western印迹及实时PCR显示小鼠耳蜗SGC的IGF-1R蛋白及mRNA表达水平随着出生年龄增加而逐渐减少。小鼠出生后0 d(P0)组和出生后4 d(P4)组,出生后12 d(P12)组,出生后20 d(P20)组IGF-1 mRNA的表达水平有明显差异(P﹤0.05),P12和P20两组无明显差异(P>0.05)。结论 IGF-1受体在耳蜗发育期中耳蜗SGC有表达,表达量随着出生年龄增加而逐渐减少。推测其在内耳细胞增殖中可能起重要信号转导作用。
- 陈冬贺欣宫亮李里
- 关键词：胰岛素样生长因子受体螺旋神经节耳蜗
- PAX2稳转细胞系构建及对细胞迁移和侵袭能力的作用研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨PAX2稳转细胞系构建及生物学作用。方法选择处于对数生长期大鼠肾小管上皮细胞,实验分为稳转组、空载组、对照组。稳转组采用阳离子脂质体转导将p EGFP-PAX2转入大鼠肾小管上皮细胞,空载组采用同样方法配置空载质粒转染溶液,对照组不添加质粒转染溶液。经G418筛选,建立稳定转染细胞系。通过细胞划痕实验及Transwell实验检测PAX2稳转细胞系的细胞迁移率及细胞侵袭作用。结果应用G418筛选14 d,稳转组大鼠肾小管上皮细胞有明显克隆长出,建立PAX2基因稳定转染肾小管上皮细胞系。稳转组在荧光显微镜下可见绿色荧光,基因融合表达获得成功。稳转组细胞PAX2条带密度与β-action吸光度比值为(1.00±0.04),空载组为(0.83±0.03),对照组为(0.85±0.04),3组吸光度比值比较,差异有统计学意义(F=398.7,P<0.05);其中稳转组吸光度比值高于空载组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕后18 h,对照组、空载组和稳转组细胞迁移率分别为(39.34±5.34)%、(40.56±7.54)%和(83.72±7.12)%,3组细胞迁移率比较,差异有统计学意义(F=431.8,P<0.05);其中稳转组细胞迁移率高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组细胞培养48 h后,对照组、空载组和稳转组迁移细胞分别为(23.33±3.63)、(22.00±8.14)、(45.67±7.14),3组迁移细胞数比较,差异有统计学意义(F=248.5,P<0.05);其中稳转组迁移细胞数高于对照组和空载组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 p EGFP-PAX2质粒成功转染大鼠肾小管上皮细胞,并成功筛选出高效稳定表达PAX2的稳转细胞系。PAX2稳转增加了肾小管上皮细胞的迁移及侵袭能力。
- 李里宫亮吴玉斌
- 关键词：细胞侵袭细胞运动肾小管上皮细胞
