杜嫚
- 作品数:4 被引量:6H指数:2
- 供职机构:中南民族大学生命科学学院武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 利用TALENs技术构建zfol基因的斑马鱼突变体
- 凝集素广泛存在于动、植物体内,具有多种生物活性,在鱼类胚胎发育早期,各组织还未完全发育之时,对外界病原体仍然有一定的抵御能力,这种抵御能力来自自身非特异性免疫和母源性免疫,而存在于卵母细胞中的凝集素等物质被认为是来自母体...
- 杜嫚
- 关键词:凝集素斑马鱼基因敲除
- 文献传递
- 斑马鱼一种母源凝集素基因zfol的原核表达和抗体制备分析被引量:1
- 2013年
- zfol是斑马鱼的一种母源凝集素基因。从斑马鱼胚胎中提取RNA,应用RT-PCR从斑马鱼中得到zfol的基因片段,重组入原核表达载体pEASY-E2中得到重组质粒,并测序鉴定其序列的正确性,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21中诱导表达,并纯化蛋白,利用纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子,制备斑马鱼母源凝集素Zfol蛋白的多克隆抗体,利用Western-blot方法检测抗体特异性,得到特异的多克隆抗体,为进一步研究母源凝集素基因zfol的功能奠定了基础。
- 杜嫚王红莹
- 关键词:斑马鱼原核表达多克隆抗体
- 鲫鱼一种新型SNRPC基因的蛋白表达和抗体制备分析被引量:2
- 2010年
- 本研究构建了鲫鱼卵母细胞特异表达的新型SNRPC基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体特异性,为进一步研究新型SNRPC基因的功能奠定基础。首先设计引物,应用RT-PCR从鲫鱼成熟卵母细胞中获得含该基因片段,重组入原核表达载体PinPoint T中,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体,用Western blot方法检测此抗体特异性。成功构建了新型SNRPC基因重组表达载体,表达的蛋白经纯化后免疫家兔得到了特异的多克隆抗体。鲫鱼卵母细胞的新型SNRPC基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及抗体的制备为后续的研究提供了理论基础。
- 王红莹杜嫚
- 关键词:鲫鱼蛋白表达多克隆抗体抗体
- 斑马鱼母源凝集素基因zfol的克隆和表达分析被引量:3
- 2016年
- 为验证凝集素Zfol是否为母源蛋白及其具体表达模式,揭示凝集素这类来源于母体的免疫物质在鱼类胚胎发育早期的免疫保护作用并提供理论依据,克隆Zfol的基因全长进行了生物信息学分析.利用RT-PCR和Western blot分析了zfol mRNA和Zfol蛋白的时空表达.结果表明:zfol mRNA及Zfol蛋白在斑马鱼胚胎发育过程中的表达均呈动态变化.zfol mRNA在成鱼的卵巢、心脏、肝脏、肾脏、脑中表达,在精巢中未检测到表达.Zfol蛋白在精巢、心脏、脑、肝脏等组织中检测不到表达,而在肾脏中有低含量表达,在卵巢中有高含量表达.
- 王红莹杜嫚
- 关键词:凝集素斑马鱼克隆