杨照海
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西大学科研基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山羊Sox2基因克隆、原核表达和GST融合蛋白纯化被引量：4
- 2009年
- 本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGEX-Sox2转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳及Western blotting检测GST-Sox2融合蛋白表达,用谷胱甘肽Sepharose 4B介质分离纯化该融合蛋白。结果表明,山羊Sox2基因编码序列全长为960 bp;在优化的表达条件(1 mmol.L-1IPTG,22℃诱导16h)下,重组质粒(pGEX-Sox2)在大肠杆菌得到了高效表达;谷胱甘肽Sepharose 4B颗粒纯化蛋白得到预期大小的融合蛋白(约60 ku)。结论,本研究克隆了山羊Sox2基因,获得了纯化的GST-Sox2融合蛋白,为制备其多克隆抗体奠定了基础,为进一步研究山羊iPS细胞(Induced pluripotent stem cells)创造了条件。
- 郑喜邦杨照海刘平赵华卢晟盛卢克焕毕方方
- 关键词：原核表达蛋白纯化山羊
- 氦氖激光麻醉对犬心肾功能的影响
- 2009年
- 杨照海赵华郑喜邦杨丰利
- 关键词：临床麻醉氦氖激光肾功能麻醉方法病畜
- 南宁市郊奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定被引量：2
- 2009年
- 在南宁市郊两个奶牛场采集了45份奶牛子宫分泌物,其中10份来自健康奶牛,35份来自患子宫内膜炎奶牛,对其进行实验室细菌学分离鉴定及统计分析。结果共分离出69株病原微生物,其中金黄色葡萄球菌26株,占分离总数的37.7%;表皮葡萄球菌9株,占13.0%;链球菌10株,占14.5%;大肠杆菌14株,占20.3%;变形杆菌3株,占4.3%;绿脓杆菌1株,占1.4%;化脓放线菌4株,占5.8%;酵母菌2株,占2.9%,揭示了被检奶牛场奶牛子宫内膜炎病原菌的种类及比例。
- 覃庆玉毕芳芳张朝胜杨照海何宝祥
- 关键词：奶牛细菌
