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梁望旺: 作品数：120 被引量：287H指数：8; 供职机构：重庆市动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：湖北省农业科技创新中心资助项目国家科技支撑计划湖北省科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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重庆市2011—2019年区县兽医实验室检测能力比对结果分析被引量：3: 2021年; 根据农业农村部部署,为全面提升基层兽医系统实验室检测能力,重庆市于2011年起每年开展覆盖全市所有区县的兽医实验室检测能力比对工作。根据动物疫病流行情况,结合各年度省级兽医系统实验室比对项目,2011—2019年全市共开展了涉及PCR/RT-PCR(含普通、荧光定量)、ELISA(含iELISA、cELISA、LpBELISA)、血凝抑制试验(HI)和试管凝集试验(SAT)等多个项目的比对工作。结果显示,比对样品结果正确率由92.94%稳步上升至98.99%,区县兽医实验室整体检测水平有了很大提升;所有区县均具备PCR、ELISA、HI和SAT检测能力,但区县间检测水平存在一定差异,个别区县HI、SAT等项目检测能力还有待进一步提高。建议加大基层兽医实验室投入,加强实验室管理,强化技能培训,提升检测人员能力和素质,提高检测结果准确性,为建立科学完善的动物疫病防控体系提供技术支持。; 曹芸黄诚杨泽林冯刚梁望旺; 关键词：兽医实验室

猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5基因的遗传变异与系统进化分析被引量：1: 2009年; 为进一步了解猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在国内的分子遗传进化情况，对中国大陆1996-2008年问33株PRRSV分离毒株（29株来自GenBank）的GP5序列与国外部分代表毒株进行了分析比较。结果表明，所选PRRSV中国分离毒株中有32株属于北美洲型（NA），并大致可分为2个基因亚群，1株属于欧洲型（EU）。其中，自2006年在我国暴发的高致病性蓝耳病病毒（H—PRRSV）属于亚群1，且与YA株亲缘关系较近；亚群2毒株则与Ingelvac的弱毒疫苗株及其亲本株VR-2332具有较高的同源性。; 梁望旺杨克礼伍锐熊忠良刘泽文段正赢徐涤平; 关键词：进化分析 GP5 ORF5

猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF7基因的克隆、序列分析及原核表达: 2009年; [目的]对猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2毒株核蛋白编码基因ORF7进行研究,为进一步了解其编码蛋白的功能和研制新的血清学诊断方法奠定基础。[方法]采用RT-PCR方法扩增HBKM2株的ORF7基因,然后利用DNA Star软件包对克隆的序列进行序列分析,将ORF7基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-KG上,构建重组表达质粒pKG-N。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21,并经IPTG诱导表达,最后利用Western-blot对表达蛋白的免疫反应活性进行鉴定。[结果]HBKM2毒株的ORF7基因长约372 bp;序列分析表明与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的同源性达99%以上;SDS-PAGE表明克隆的ORF7基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达;Western-blot分析表明,重组蛋白GST-N能够与PRRSV高免猪血清发生特异性的免疫反应。[结论]成功地扩增了ORF7基因,且GST-N融合蛋白能在大肠杆菌中高效表达。; 梁望旺熊忠良刘泽文杨克礼伍锐邓均华段正赢余爱冬唐文娟徐涤平; 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒核衣壳蛋白 ORF7基因原核表达

羊肉产品中的布鲁氏菌污染及其风险传递调查被引量：6: 2017年; [目的]了解羊肉产品的布鲁氏菌污染情况和风险传递过程。[方法]对养殖和屠宰环节的羊及羊肉产品进行取样调查。[结果]屠宰环节布鲁氏菌检出率从高到低依次为羊内脏(3.14%)、羊肉(2.96%)和环境(1.11%);大中型屠宰场布鲁氏菌检出率(6.23%)高于小型屠宰场(0.48%);控制性结果表明在不发生二次污染的情况下,仅可从内脏中检出布鲁氏菌;子宫(77.78%)和脾脏(46.67%)存在布鲁氏菌的风险较大,不表现临床症状的羊子宫也有带菌风险;屠宰环节布鲁氏菌感染抗体阳性率为1.13%,羊肉产品和环境中均存在布鲁氏菌污染;屠宰环节工作人员对布鲁氏菌病防控的认识不到位,本次调查发现2名从业人员被感染。[结论]存在养殖环节的布鲁氏菌病感染羊进入屠宰生产链的风险。; 谢建华周莉汪子淳叶洁莹梁望旺杨泽林熊仲良; 关键词：布鲁氏菌病污染

仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的效力和安全试验: 2010年; 将带有K88、K99和987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)菌株(C83549、C83644和C83710)和免疫原性良好的C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C)菌株(C59-2、C59-37和C59-38)第10代基础种子制备的原液进行浓缩、甲醛溶液灭活和脱毒后,按抗原含量,加氢氧化铝胶制成3批二联灭活疫苗。经过对免疫怀孕母猪所产仔猪的攻毒测定,得到疫苗最小的免疫剂量为每头2mL,确定使用剂量为每头4mL。疫苗的免疫攻毒试验结果表明,疫苗在怀孕母猪中采用颈部肌肉注射进行免疫,二次免疫才能使仔猪通过吮吸初乳获得80%以上的被动免疫保护能力,与单苗具有相似的免疫保护力;单剂量、单剂量重复和超剂量的安全性试验结果显示,3批二联灭活疫苗不会引起母猪的全身不良反应和明显的局部反应,无流产,胎儿发育完全正常。; 邓均华刘泽文杨克礼梁望旺伍锐段正赢周丹娜郭锐徐涤平田永祥; 关键词：大肠埃希氏菌 C型产气荚膜梭菌二联灭活疫苗效力试验

一种快速检测牛支原体的免疫胶体金试纸及其制备方法: 本发明公开了一种快速检测牛支原体的免疫胶体金试纸及其制备方法，所述试纸的底层为支撑板，该支撑板上依次黏附有紧密相连的样品垫、结合垫、NC膜和吸收垫，所述结合垫上吸附有胶体金标记的牛支原体P33单克隆抗体，NC膜上喷涂兔抗...; 吴胜昔梁望旺曾政李令臣李俊萱侯力嘉鲁友铭蔺露陈忠琼

猪病毒病抗体及病原的检测及分析被引量：3: 2011年; [目的]研究猪场猪病毒病的抗体水平及感染情况,为猪病的防制提供理论依据。[方法]抽样采集各类猪只血液和组织样品,分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链式反应(PCR)及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)及猪圆环病毒病(PCV-2)的抗体、病原进行检测分析。[结果]结果表明,猪场存在CSF、PR野毒感染;PRRS免疫抗体水平不太理想,阳性感染率为3.3%～17.3%;PCV-2阳性感染率为0～9.6%。[结论]试验猪场病毒病,应采取完善的综合措施才能获得理想的效果。; 段正赢杨克礼梁望旺刘泽文邓均华熊忠良郭锐周丹娜徐涤平田永祥; 关键词：猪瘟猪伪狂犬病猪繁殖与呼吸综合征猪圆环病毒病

重庆地区猪圆环病毒2型的分离鉴定与序列分析被引量：5: 2013年; 为了解2007年以来重庆地区猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行情况,对2007年—2013年重庆地区送检样品进行了PCV-2荧光定量PCR检测,并对阳性样品进行了病毒的分离鉴定,成功分离到12株PCV-2,对分离的12株PCV-2进行了全基因组克隆与序列分析。结果显示,所分离的PCV-2均处于PCV-2b分支,基因组全长均为1 767bp,与PCV-2b参考毒株（AF055394）的核苷酸同源性为96.2%-99.7%,与疫苗SH株的核苷酸同源性为96.0%-98.4%,而与疫苗LG株同源性仅为95.5%-95.8%。研究结果为PCV-2的研究及其感染的防控奠定了基础,也为重庆地区PCV-2疫苗毒株的选择提供了理论依据。; 梁望旺曾政吴胜昔凌洪权蔺露孙燕候权书向帆; 关键词：猪圆环病毒2型

牛支原体p30蛋白的原核表达与鉴定: 2018年; 为了实现牛支原体p30蛋白在大肠杆菌中的高效表达,试验根据GenBank发表的p30（登录号为AIA33998.1）基因序列,在不改变p30蛋白氨基酸序列的情况下优化基因序列,全基因合成p30基因,并将其克隆到pET28a（＋）载体中,构建的重组质粒pET28a（＋）-p30转化至BL21（DE3）工程菌中进行诱导表达,筛选重组菌pET28a（＋）-p30/BL21（DE3）诱导表达的最适诱导温度、诱导时间及IPTG诱导浓度,利用His-tag镍柱纯化p30重组蛋白,并对纯化后的重组蛋白进行鉴定。结果表明：当重组菌株pET28a（＋）-p30/BL21（DE3）诱导条件为37℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导4 h时,p30蛋白表达量最高;SDS-PAGE电泳显示经镍柱纯化后p30蛋白达到了电泳纯,经Western-blot分析,目的蛋白具有抗原特异性,在36 ku处有明显的蛋白印迹条带,与预期大小相符。说明成功实现了在大肠杆菌中高效表达牛支原体p30重组蛋白。; 李俊萱吴胜昔梁望旺李令臣鲁友铭侯利嘉李志曾政黄恒张运群; 关键词：牛支原体原核表达蛋白免疫印迹

荧光PCR诊断猪流行性腹泻病毒与猪轮状病毒混合感染病例被引量：3: 2013年; 猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PRV）足3种引起猪病毒性腹泻的重要病原。该3种病毒既可单独感染，也可混合感染,; 凌洪权黎朝燕曾政曾政杨泽林梁望旺孙燕骆璐谢建华蔺露董春霞黄恒周琼; 关键词：猪流行性腹泻病毒猪轮状病毒感染病例 PCR诊断猪传染性胃肠炎病毒荧光

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