汪玄
- 作品数：52 被引量：95H指数：6
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阵发性睡眠性血红蛋白尿症CD34^+CD59^+细胞长期造血的动物实验被引量：2
- 2007年
- 目的获得阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者正常克隆干细胞(CD34^+CD59^+)支持长期造血的证据。方法纯化、扩增 PNH 患者骨髓 CD34^+CD59^+细胞并移植入联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内,90 d 后以首次移植的小鼠骨髓细胞进行二次移植。结果分别移植了 PNH 患者和正常对照骨髓 CD34^+CD59^+细胞的小鼠在移植后第90天,外周血细胞水平均恢复正常;两组小鼠的组织中均有 CD45的表达,且差异无统计学意义。分别移植了由 PNH 患者和正常对照骨髓 CD34^+CD59^+细胞重建造血的小鼠骨髓细胞的小鼠在移植后第30天,外周血细胞水平差异无统计学意义;两组小鼠的组织中均有 CD45的表达,且差异无统计学意义;移植后小鼠骨髓细胞里均可扩增出供者的 SRY 基因片段。结论经体外纯化、扩增后的 PNH 患者骨髓 CD34^+CD59^+细胞具有与正常CD34^+CD59^+细胞同样的长期造血的能力。
- 孙婉玲韩冰汪玄钟玉萍庄俊玲沈悌武永吉
- 关键词：血红蛋白尿阵发性造血干细胞
- PNH患者骨髓CD34^＋CD59^＋细胞体外扩增及植入体内重建造血的活性研究被引量：1
- 2008年
- 本研究应用BALB/c裸鼠为移植模型探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobin-uria,PNH)患者CD34+CD59+的增殖和重建造血的能力,为实现PNH患者自体骨髓移植或自体外周血造血干细胞移植提供实验依据。利用免疫磁珠双阳性分选法,从正常人及PNH患者骨髓中分离出两组CD34+CD59+细胞,分别进行体外扩增,并将体外扩增的正常人和PNH患者骨髓CD34+CD59+细胞分别输注给接受亚致死剂量照射的BALB/c裸鼠。应用流式细胞技术和DNA检测技术检测受鼠骨髓、脾脏和外周血中人CD45+细胞。结果表明:PNH组的CD34+CD59+细胞在体外生存、扩增能力似弱于正常人对照组。但CD34+CD59+细胞输注给受鼠后6周,在受鼠骨髓、脾脏和外周血中可检测到人CD45+细胞,PNH组受鼠CD45+细胞水平与正常人对照组相比,无统计学差异。结论:PNH患者CD34+CD59+细胞仍具有同正常人CD34+CD59+细胞相同的生物特性,能体外扩增并能保持正常干/祖细胞的特性。
- 钟玉萍武永吉沈悌汪玄张洁萍
- 关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿症细胞扩增
- 采用多功能流式细胞术分析分选造血干细胞和髓系定向分化祖细胞被引量：1
- 2008年
- 目的探讨富集纯化造血干细胞（HSC）和髓系定向分化祖细胞的新实验方案。方法根据造血干细胞和定向分化祖细胞在发育过程中表达某些特异性分化抗原的特性，通过免疫磁珠分选技术结合四色和六色流式细胞术分析14只健康小鼠的骨髓造血干细胞、造血祖细胞及定向分化祖细胞系列的表达，并对其进行分选，以进一步通过集落细胞培养和传代试验对分选后细胞的活性进行检测。结果经上述实验方案分析，14只健康小鼠骨髓造血祖细胞（HPC）的表达率约为HSC的10倍；但其生成活性远不如造血干细胞，共同髓系祖细胞（CMP）的传代能力仅为HSC的1／2，且次级分化的粒系单核系祖细胞（GMP）和红系巨核系祖细胞（MEP）的生成活性更弱，其传代次数为零。结论通过多色流式细胞术实验方案可以分析纯化HSC和髓系定向分化祖细胞的表达，并精确计数HSC和祖细胞。
- 崔巍许晓东许勇钢汪玄
- 关键词：流式细胞术分选造血干细胞髓系祖细胞
- 红细胞生成素对人单核细胞前炎症因子的影响及机理
- 2011年
- 红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是治疗慢性病贫血(anemia of chronic disease,ACD)的主要药物,通过刺激造血、抑制hepcidin和前炎症因子而改善贫血。近来发现单核细胞是hepcidin的另一来源,EPO能降低IL-6诱导的hepcidin,推测EPO可能通过降低IL-6进而抑制hepcidin的间接途径。然而,EPO降低单核细胞IL-6相应的分子生物学机制还不清楚。本研究探讨EPO对单核细胞前炎症因子的作用及其分子学机制。采用实时定量PCR检测IL-6 mRNA和TNF-αmRNA表达,Western blot方法检测PARP-1信号分子的蛋白水平。采用1μg/ml脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激THP-1单核细胞,观察EPO不同浓度(0.5,1,2,5,10 U/ml)和作用时间(0,3,6,12,24小时)对THP-1单核细胞IL-6 mRNA、TNF-αmRNA以及PARP-1蛋白的抑制作用。加用1μg/ml或5μg/mlEPO受体(EPOR)抗体和/或3-氨基苯甲酰胺(3AB,PARP-1抑制剂),观察其对EPO的拮抗作用以及对PARP-1信号分子的影响。结果表明,1μg/ml LPS可以明显促进THP-1单核细胞IL-6和TNF-αmRNA表达。EPO可抑制LPS诱导的IL-6和TNF-αmRNA表达,且呈浓度和时间依赖性:对于IL-6 mRNA,2 U/ml EPO作用6小时的抑制作用最明显;对于TNF-αmRNA,10 U/ml EPO作用3小时的抑制作用最明显。研究发现,LPS诱导IL-6 mRNA表达升高的同时PARP-1蛋白水平也明显增加,EPO抑制IL-6 mRNA表达的同时PARP-1蛋白也下降,且2 U/ml EPO作用6小时对IL-6和PARP-1蛋白均有明显抑制。3AB是PARP-1的直接抑制剂,EPO受体的抗体与3AB相似,可拮抗EPO对IL-6的抑制作用。结论 :EPO能够抑制单核细胞IL-6和TNF-α表达,EPO可能通过降低PARP-1水平抑制IL-6的表达。
- 韩潇周道斌许彩民杨洋段明辉汪玄张洁萍赵永强沈悌武永吉
- 关键词：慢性病贫血白介素-6红细胞生成素单核细胞
- 血液肿瘤细胞促红细胞生成素受体表达情况
- ＜正＞背景:虽然EPO是治疗ACD的有效药物,但其有促进肿瘤增殖的风险。其作用是通过细胞表面EPO-R实现的。目前已在乳腺癌、肾癌及前列腺癌等多种肿瘤细胞表面发现EPOR。血液系统中,B淋巴细胞表面可表达EPOR;而多种...
- 冯俊周道斌汪玄赵永强
- 文献传递
- 来那度胺可抑制单核细胞向M2型巨噬细胞分化及相关细胞因子的分泌被引量：4
- 2015年
- 目的探索来那度胺在肿瘤微环境中对于单核细胞向M2型巨噬细胞分化及IL-10、VEGF和TGF-β1水平的影响。方法密度梯度离心法分离初治淋巴瘤患者及健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs)。用Transwell24孔板共培养PBMCs与淋巴瘤细胞系HUT-78,并于共培养体系中加入来那度胺。流式细胞术分析肿瘤相关巨噬细胞(TAM)特征性表型CD68和CD163的表达,ELISA法检测共培养体系细胞因子IL-10、VEGF和TGF-β1的含量。结果在PBMCs与HUT-78构成的体外共培养体系中加入来那度胺后,CD68+、CD163+、CD68+CD163+细胞及CD68+CD163+在CD68+细胞中所占比例均有显著的下降(P<0.05)。加入来那度胺后患者组CD68+CD163+/CD68+下降程度明显高于健康志愿者(P<0.05)。加入来那度胺的患者共培养组相对于未加来那度胺的共培养组IL-10和VEGF水平均有显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论来那度胺在PBMCs与淋巴瘤细胞构建的体外共培养体系中能够有效抑制单核细胞向M2型TAM的分化,且能够抑制患者组共培养体系中IL-10、VEGF分泌。
- 魏冲姜志超王昊天张薇李天骄汪玄周道斌
- 关键词：来那度胺淋巴瘤肿瘤相关巨噬细胞
- 地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响被引量：2
- 2004年
- 目的:观察地塞米松(DEX)对内毒素(LPS)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后表达组织因子(TF)、凝血酶调节蛋白(TM)和蛋白S(PS)的影响.方法:24孔板培养的第1～5代HUVEC,在含不同浓度LPS和DEX的无血清培养基中培养一定时间后裂解细胞,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定裂解液中的TF、TM和PS含量.结果:在LPS刺激下,HUVEC表达TF的量呈剂量依赖性升高,在LPS0.1μg/ml下TF的表达量为对照组的4倍(P＜0.01),同时加入0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX则可使TF的表达量由128.3±25.7 pg/105细胞分别降至94.9±19.4 pg/105细胞和98.8±7.8 pg/105细胞(P＜0.05);LPS(0.01～10μg/ml)可抑制HUVEC表达TM,在LPS 10 μg/ml下,TM表达量降至对照组的60%(P＜0.05).DEX可拮抗LPS抑制HUVEC表达TM的效应,0.1 μg/ml、0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX可使LPS(10 μg/ml)作用下TM的表达量由0.282±0.014 ng/105细胞分别增至0.409±0.009、0.462±0.017和0.362±0.019 ng/105细胞(P＜0.05);LPS(0～10 μg/ml)可抑制HUVEC表达PS,在LPS浓度1.0 μg/ml及10 μg/ml时,PS的表达量分别为对照组的43%和38%(P＜0.01).DEX则拮抗LPS抑制HUVEC表达PS的效应,0.5 μg/ml DEX可使LPS刺激下PS的表达量由13.1±4.8%/2×105细胞增至48.5±10.2%/2×105细胞(P＜0.01).结论:LPS促进HUVEC表达TF,抑制HUVEC表达TM和PS.DEX能部分拮抗上述作用,提示DEX可能纠正内毒素血症时的高凝状态.
- 蒋建霞汪玄华宝来潘家绮赵永强
- 关键词：地塞米松表达组织因子凝血酶调节蛋白蛋白S
- 疑难病例析评第389例皮疹--急性白血病--母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤被引量：1
- 2016年
- 病历摘要
患者男，14岁，因“发现右小腿肿物8个月，面部结节3周，胸痛2d”，于2016年2月2日人院。患者2015年6月发现右小腿内侧皮肤暗红色斑块（图1），直径约1．0cm，不高于皮面，压之不褪色，无红、肿、热、痛、破溃或波动感。
- 贾觉睿智李剑汪玄蒋显勇曹欣欣
- 关键词：急性白血病浆细胞样母细胞性皮疹
- 流式-原位杂交方法在中国骨髓衰竭综合征患者端粒长度检测中的应用被引量：5
- 2009年
- 目的评估流式-原位杂交(Flow-FISH)方法在中国骨髓衰竭综合征(BMF)患者端粒长度检测中的应用价值。方法采用Flow-FISH方法检测8例中国BMF患者外周血单个核细胞端粒长度和其中3例再生障碍性贫血(AA)患者的粒细胞端粒长度,并分别与相应年龄、性别的正常对照值进行比较。采用Southern blot方法检测3例患者外周血有核细胞端粒长度,并与其Flow-FISH检测结果进行比较。结果8例患者中,有5例患者的外周血单个核细胞端粒长度较正常人缩短;其中3例AA患者外周血单个核细胞和粒细胞端粒长度较正常人的缩短程度均不一致。3例同时行Flow-FISH和Southern blot检测的患者中有2例检测结果一致。结论Flow-FISH方法可用于中国BMF患者端粒长度的检测。
- 刘博崔巍韩冰汪玄林洁赵永强
- 关键词：端粒长度
- 重组人红细胞生成素对人多发性骨髓瘤患者铁调节蛋白Hepcidin mRNA表达的影响被引量：4
- 2011年
- 本研究探讨人多发性骨髓瘤血清对肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞铁调节蛋白hepcidin表达的影响,及白介素-6(IL-6)单克隆抗体或重组人红细胞生成素(rhEPO)对其的抑制作用。在Hep-3b细胞培养液中按10%终浓度加入人多发性骨髓瘤患者血清,共培养后用逆转录聚合酶链式反应半定量方法检测Hep-3b细胞hepcidin mRNA的表达水平。在上述培养体系中,加入人IL-6单克隆抗体或rhEPO观察hepcidin mRNA表达的变化。结果表明,未治疗的多发性骨髓瘤组hepcidin mRNA表达量高于正常对照组及缺铁性贫血组,这种升高作用能被IL-6单克隆抗体或rhEPO完全抑制。对多发性骨髓瘤患者短期随访中,规律治疗能稳定血红蛋白,降低患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响。结论:未治疗的多发性骨髓瘤患者血清能促进肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞hepcidin表达,这种促进作用可被人IL-6单克隆抗体拮抗,提示IL-6可能导致Hep-3b细胞hepcidin表达量升高,从而造成慢性病性贫血(anemia of chronic disease,ACD)。这种促进作用也能被rhEPO抑制,提示rhEPO可能对ACD有治疗作用。在多发性骨髓瘤患者短期随访中,血红蛋白水平稳定,患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响减小,这表明治疗使病情稳定,改善了ACD。
- 王凤丹周道斌李淑兰汪玄张洁萍段明辉沈悌武永吉
- 关键词：多发性骨髓瘤铁代谢铁调节蛋白慢性病贫血
