沈佩同
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 供职机构：天津医科大学生物医学工程学院更多>>
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- 双分离法记录wistar大鼠脑皮层神经元全细胞电流
- 为了寻找一种简单可行的实验方法来降低个细胞膜片钳试验的难度，提高其工作效率，提出了采用改良的急性分离法与电流分离相结合技术，大幅度缩短了整个试验的时间，从根本上降低了膜片钳实验的难度，在全细胞电压钳制模式下，可以分别记录...
- 沈佩同毕平李刚
- 关键词：膜片钳脑皮层神经元
- 双分离法记录Wistar大鼠神经元的全细胞电流被引量：1
- 2010年
- 背景:细胞培养与通道电流记录是全细胞膜片钳实验的主要难点。目的:介绍一种简单可行的降低全细胞膜片钳实验方法,将细胞急性分离与电流的分离技术结合起来,以提高工作效率,缩短实验的时间,从根本上降低膜片钳实验的难度。方法:SPF级出生4～7d的wistar大鼠40只,雌雄不限。采用改良的急性分离的方法制备Wistar大鼠脑皮质细胞,将大鼠脑皮质切成400～600μm厚度的薄片,在人工脑脊液中通混合气静止1h,并通以氧气。将脑组织块放入含有16u/mL(typeX)和2u/mL(typeXIV)蛋白水解酶的人工脑脊液中,孵育60min,清除消化酶。在全细胞电压钳制模式下,保持电位-80mV,给予-60mV到60mV的去极化脉冲刺激,步阶为+10mV,刺激波宽160ms。记录到跨膜总电流,在全细胞电极液里面加入70mmol/LCsCl,70mmol/LCsF;在外液中先后加入11μmol/L阻断剂河豚毒素、30mmol/L的氯化四乙胺、1mmol/L的4-AP。分别记录内向钠电流,瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流,结果用clampfit分析处理。主要观察:①细胞的形态学观察。②全细胞电流的记录。③内向钠电流的记录。④外向钾电流的记录。结果与结论:细胞空间立体结构强,表面光滑,有完整的树突或者轴突,且细胞的活性可以在25℃室温下维持8～10h。在外液中加入1μmol/L的河豚毒素基本上可以阻断钠电流;30mmol/L的氯化四乙胺和1mmol/L的4-AP可以阻断外向钾电流。结果表明,改良的细胞急性分离方法细胞功能完好。通过电流分离技术,不改变细胞外液和电极液,仅需添加特异阻断剂,可记录到内向钠电流,瞬时外向钾电流以及延迟整流钾电流,较之传统方法可显著提高工作效率。
- 沈佩同毕平李刚
- 关键词：膜片钳
- 工频电磁场对皮层神经元瞬时外向钾电流的影响
- 瞬时外向钾电流具有维持兴奋性细胞静息电位,决定细胞的兴奋性等重要作用,本实验采用频率为50Hz、强度为2.0mT的工频电磁场对小鼠的脑皮层神经细胞进行刺激,而后应用全细胞膜片钳技术测量并研究其瞬时外向钾电流特性。实验发现...
- 沈佩同毕平张璐林凌李刚
- 关键词：瞬时外向钾电流膜片钳技术工频磁场生物效应神经元
- 文献传递
- 工频电磁场对皮层神经元瞬时外向钾电流的影响
- 瞬时外向钾电流具有维持兴奋性细胞静息电位，决定细胞的兴奋性等重要作用，本实验采用频率为50Hz、强度为2.0mT的工频电磁场对小鼠的脑皮层神经细胞进行刺激，而后应用全细胞膜片钳技术测量并研究其瞬时外向钾电流特性。实验发现...
- 沈佩同毕平张璐林凌李刚
- 关键词：瞬时外向钾电流膜片钳技术工频电磁场生物效应皮层神经元
- 工频磁场对小鼠海马CA3区椎体神经元兴奋性的影响
- [目的] 随着电子、电力及现代无线通讯业的高速发展和人类生活水平的提高,电磁辐射特别是低频电磁场辐射对人类健康的影响日益引起人们的极大关注。频繁接触低频磁场,会对生物体的神经、视觉、内分泌、心血管等产生一定的影响。...
- 沈佩同
- 关键词：工频磁场钠离子通道钾离子通道兴奋性
- 文献传递
- 0.5 mT工频磁场对小鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾离子通道和动作电位的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 研究与日常生活密切相关的0.5 mT工频磁场对小鼠海马CA3区锥体神经元的影响.方法 采用急性分离的方法制备小鼠海马CA3区锥体神经元,用0.5 mT、50 Hz磁场对小鼠海马CA3区锥体神经元刺激30 min后,运用全细胞膜片钳技术研究其延迟整流钾通道电流,Ik和动作电位特性.结果 0.5 mT工频磁场照射小鼠海马CA3区锥体神经元30 min后,其电流密度减小,对照组和曝磁组最大电流密度分别为（171.05＋1.32）pA/pF、（139.65±2.37）pA/pF（n=12,P〈0.05）;对照组和曝磁组半数激活电压分别为（7.44±0.64）mV、（34.09＋6.48）mV（n=12,P〈0.05）;斜率因子分别为11.36±0.57、19.97±3.45（n=12,P〈0.05）;动作电位复极化时程APD90由（14.63±0.34）ms延长为（21.74±1.47）ms（n=12,P〈0.05）.结论 0.5 mT工频磁场可使小鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道电流Ik减小,通道开放延迟,通道激活速度减慢,动作电位复极化时间延长.
- 沈佩同毕平李刚林凌
- 关键词：膜片钳技术电磁场动作电位神经元
