焦静雨
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:浙江省科技厅科技计划项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种基因工程菌及其应用
- 本发明公开了一种基因工程菌及其应用。所述基因工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞中的目的基因,所述目的基因为木糖还原酶基因和NADPH再生酶基因。所述应用为该基因工程菌在制备木糖醇中的应用,包括:将所述工程菌接种至培养液中培...
- 吴绵斌焦静雨林建平杨立荣
- 文献传递
- 基因工程技术改造木糖醇生产菌株的研究进展被引量:4
- 2012年
- 木糖醇是一种低热量的五碳糖醇,广泛应用于医药、食品和化工等领域。生物合成法相对于化学合成法具有工艺条件温和、能耗低、环境污染小等特点,已成为研究的热点。但由于野生微生物体内具有不同的木糖代谢途径,且木糖还原酶的专一性不强以及转化过程需要辅酶参与等原因,影响了该技术的产业化应用。对生物转化法生产木糖醇的现状及存在的问题进行了分析,展望了采用基因工程技术改造微生物的代谢途径,提高生物催化转化木糖醇的产率的新技术和方法。
- 焦静雨吴绵斌赵炯烽林建平杨立荣
- 关键词:基因工程生物转化
- 木糖还原酶基因克隆及表达菌株的代谢工程改造
- 木糖醇是一种五碳糖醇,其化学名称为1,2,3,4,5-戊醇,分子式为C5H12O5,是一种白色结晶,它的溶解度、溶液密度和折光系数等理化性质与蔗糖基本相同,可以作为蔗糖的替代品和糖尿病人的营养剂而受到人们的关注。 本文...
- 焦静雨
- 关键词:木糖还原酶基因克隆代谢工程
- 文献传递
- 重组大肠杆菌的构建及利用木糖生产木糖醇的研究被引量:3
- 2016年
- xylB基因失活可以降低木酮糖的磷酸化,使木糖还原为木糖醇而不进入PPP途径。利用Red重组技术构建xylB缺失大肠杆菌DxylB/E.coli BL21(DE3)可以提高木糖醇的产率。通过PCR克隆得到来自Neurospora crassa的木糖还原酶基因xr,将该基因与载体p ET30a(+)连接构建表达质粒p ET30a-xr;PCR克隆得到来自E.coli K-12的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6-PGDH)基因gnd和葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PDH)基因zwf,依次与双启动子原核表达载体p CDFDute-1连接构建表达质粒p CDFDuet-gnd-zwf;将上述构建好的两个重组质粒同时转化到DxylB/E.coli BL21(DE3)宿主体内。经异丙基-?-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得分子量约为38、51、54 k D的三种蛋白,酶活测定显示,重组菌种XR的比酶活为7.25 U×mg-1,6-PGDH的比酶活为2.26 U×mg-1,G6PDH的比酶活为1.31 U×mg-1。5 L发酵罐发酵结果显示,xylB基因敲除可以提高木糖醇的产率,含NADPH再生系统的菌株木糖醇的体积产率是1.04 g×(L×h)-1,比只含有木糖还原酶的重组菌株0.88 g×(L×h)-1高24.32%,为后续工业化利用大肠杆菌生产木糖醇奠定了基础。
- 张哲焦静雨陈姣孟强吴绵斌林建平杨立荣
- 关键词:木糖醇