熊长辉
- 作品数：41 被引量：113H指数：5
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- 发文基金：国家科技重大专项江西省卫生厅科技计划项目江西省卫生厅科研基金更多>>
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- 江西省钩端螺旋体分离株脉冲场凝胶电泳分型和分析被引量：6
- 2010年
- 目的采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术，对江西省钩端螺旋体（钩体）患者及动物宿主中分离的钩体菌株型别进行分子流行病学调查。方法利用核酸内切酶NotI对提取的钩体菌株染色体DNA进行酶切，通过PFGE将DNA片段分离。获得的PFGE图像采用分析软件BioNumerics4．0进行处理并建立数字化数据库，以相似度〉75％为标准，将获各钩体PFGE图谱与中国15群15型钩体参考标准株进行比较并进行聚类分析。结果江西省不同地区的139株钩体可分为46个PFGE型，优势型为LepNotI．0071、LepNotI．0072和LepNotI．0043型，分别占所有钩体菌株的28．06％、15．11％和7．19％。139株钩体分离株中，84．89％（118／139）菌株的PFGE图谱与6群6型中国钩体参考标准株基本相符，其中32．37％（45／139）钩体菌株属于黄疸出血群赖型，15．83％（22／139）和15．11％（21／139）钩体菌株分别属于澳洲群澳洲型和爪哇群爪哇型。结论PFGE是一种快速、准确、高效的钩体分型方法。黄疸出血群赖型是江西省人群及动物中优势血清型，澳洲群澳洲型和爪哇群爪哇型位于其次。
- 徐建民蒋秀高李秀文张艳王健熊长辉
- 关键词：钩端螺旋体脉冲场凝胶电泳分子流行病学
- 两种流脑抗原三个免疫途径对动物血清抗体产生的影响
- 目的：通过A群流脑抗原免疫动物，摸索一种较好的获得流脑血清抗体的方法。方法：用A群流脑疫苗和灭活A群流脑灭活细菌两种抗原，经三种途径免疫动物(耳缘静脉、腹腔和肌肉注射)，每周1次，连续3周，最后1次抗原刺激结束后1周，心...
- 丁晟邓奇涛杨梦夏芝璐谌乐礼徐晓倩熊长辉肖岗张维民吴争
- 江西省布鲁菌分离株的鉴定及分子特征分析
- 2022年
- 目的对江西省近几年分离的布鲁菌进行鉴定和分型,同时检测rpoB基因的携带情况并分析其遗传多态性。方法利用BCSP31-PCR对分离的菌株进行布鲁菌鉴定,利用AMOS-PCR对布鲁菌进行种型分析,利用普通PCR对rpoB基因进行检测,将rpoB基因的PCR扩增产物进行测序并用MEGA6.0软件进行多态性分析。结果经鉴定32株布鲁菌全部为羊种布鲁菌,通过对rpoB基因的PCR扩增产物序列分析显示羊种布鲁菌rpoB基因同源性较高。结论江西省近年人感染的布鲁菌均为羊种布鲁菌,且近几年人感染的羊种布鲁菌rpoB基因高度同源。
- 熊长辉徐建民杨梦宗俊潘欢弘刘晓青
- 关键词：布鲁菌分子分型基因型PCR
- 霍乱弧菌毒力基因zot的克隆表达及生物活性被引量：3
- 2017年
- 目的对霍乱弧菌zot毒力基因进行表达并研究重组蛋白的生物活性。方法从霍乱弧菌(Vibrio cholerae)MO45中克隆zot的全基因序列,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-zot并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中,通过诱导表达和亲和层析纯化重组蛋白,研究zot表达蛋白对人小肠上皮细胞的凋亡作用。结果纯化蛋白的浓度为0.324mg/mL,经Western blot验证表达蛋白为目的蛋白,用流式细胞仪检测经表达蛋白作用的人小肠上皮细胞显示重组zot蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡。结论成功克隆表达了霍乱弧菌毒力基因zot,重组蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡。
- 熊长辉杨梦刘晓青王鹏徐晓倩
- 关键词：霍乱弧菌克隆表达
- 江西省2011-2017年人间布鲁氏菌病疫情分析被引量：6
- 2019年
- 目的掌握江西省2011-2017年人间布鲁氏菌病疫情特征,为今后的防控工作提供参考依据。方法结合省内监测资料,对江西省2011-2017年在传染病报告信息管理系统中报告的布病病例进行分析。结果 2011-2017年江西省共报告布病239例,年均发病率为0. 08/10万。病例和聚集性疫情集中在南昌市地区(48例/4起)。地市分布由2011年的1个地级市至2016年全覆盖,涉及县(区)数由2011年的1个增长至2017年的68个,扩增趋势明显(x^2趋势=94. 31,P <0. 001)。男女性别比为3. 12∶1(181∶58)。年龄集中在40～65岁年龄组。职业分布以农牧民为主,占59. 83%(143/239)。5～9月为发病高峰(5～6月大高峰和9月小高峰)。2012-2017年共采集血清样本7 160份,阳性率1. 33%(95/7 160)。2013-2017年从193例病例血液中分离出布病菌株62株,羊Ⅰ4株,羊Ⅲ54株,猪Ⅰ4株。结论江西省人间布病疫情呈上升势态,流行范围在不断扩大。有关部门加强监管力度、扩充监测内容可能为今后的布病防控重点。
- 黄玉萍黄玉萍宗俊熊长辉潘欢弘胡国良
- 关键词：人间布鲁氏菌病流行病学分析
- 嗜肺军团菌血清1型基因检测及分子分型研究被引量：4
- 2010年
- 目的了解南昌市宾馆业中央空调冷却塔水中分离的嗜肺军团菌菌株的基因特征。方法 6株分离嗜肺军团菌菌株分别经血清学凝集试验、胶乳凝集试验确定为Lp1型嗜肺军团菌后,利用PCR技术对军团菌属5SrRNA基因和嗜肺军团菌mip毒力基因的特异序列进行扩增,应用多位点测序(SBT)分析,获得相应的SBT型别。使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术,对菌株进行全染色体DNA酶切电泳分型,并用BioNumerics数据库软件进行分型分析。结果所有的菌株均带有属特异性5SrRNA基因及mip毒力基因,SBT分型6株菌均为ST1型,PFGE聚类分析结果显示菌株带型之间有差异,6株菌可分为4种带型。结论南昌市公共场所冷却塔水中分离的Lp1型嗜肺军团菌菌株基因呈多样性。
- 杨梦程慧键熊长辉徐晓倩陈福辉刘晓青周海建袁辉
- 关键词：嗜肺军团菌分子分型
- 江西省猪和啮齿动物宿主小肠结肠炎耶尔森菌病原学研究被引量：5
- 2020年
- 目的了解江西省不同宿主动物中小肠结肠炎耶尔森菌的分布以及病原特征,为该菌防控提供科学依据。方法采集江西省不同年份的屠宰猪与鼠类标本,对foxA筛检阳性的标本进行分离培养,对分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行血清型、生物型、毒力基因与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析。结果从1018份标本中分离到79株小肠结肠炎耶尔森菌,阳性率为7.76%(79/1018)。猪的阳性率为20.86%(63/302),均为O∶3血清型;鼠的阳性率为2.24%(16/716),血清型为O∶5、O∶8和未分型,生物型均为1A型。79株小肠结肠炎耶尔森菌中,致病性菌株均来自猪,占总分离菌株数的79.75%(63/79),其中59株(ystA^+、ystB^-、yadA^+、virF^+、ail^+、rfbc^+),4株(ystA^+、ystB^-、yadA^-、virF^-、ail^+、rfbc^+);非致病性菌株均来自鼠,占总分离菌株数的20.25%(16/79),其中12株(ystA^-、ystB^+、yadA^-、virF^-、ail^-、rfbc^-)、4株(ystA^-、ystB^-、yadA^-、virF^-、ail^-、rfbc^-)。致病性菌株可分为6种带型,以K6GN11C30021为主要型别,占比80.95%(51/63)。结论在江西省的不同宿主动物中,致病性小肠结肠炎耶尔森菌的主要携带者为生猪。应加强江西地区以生猪为宿主的小肠结肠炎耶尔森菌的监测。
- 杨梦王鹏袁辉刘晓青徐晓倩熊长辉黄星魁段然王鑫
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森菌生物型脉冲场凝胶电泳分型
- PCR技术在流行性脑脊髓膜炎诊断中的应用研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究PCR检测技术在流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)疑似病例诊断中的应用。方法应用PCR技术检测流脑疑似病例脑脊液和血清标本中脑膜炎奈瑟菌种属及各群的特异性DNA片段。结果11例流脑疑似病人的脑脊液标本中检出7份NmCrgA基因阳性,其中1份含有NmA群Orf-2基因片段,1份含有NmB群siaD(B)基因片段,5份含有NmC群siaD(C)基因片段;血清标本中检出3份NmCrgA基因阳性,3份均含有NmC群siaD(C)基因片段。结论PCR技术可应用于临床标本中脑膜炎奈瑟菌种属及各群的特异性检测,以快速诊断流脑疑似病例。
- 熊长辉杨梦袁辉程慧健徐晓倩陈福辉
- 关键词：PCR脑膜炎奈瑟菌DNA流行性脑脊髓膜炎
- 2000-2021年江西省O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株基因组学研究
- 2022年
- 目的分析2000—2021年江西省O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株的基因组变异特征。方法使用基因组重测序技术获得菌株的基因组精细图,使用IQ-tree构建基于核心基因组单核苷酸多态性(SNP)的遗传系统发生树,使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)研究密切相关菌株的差异,使用最小抑制浓度(MIC)测定菌株的抗生素敏感性。结果江西省的O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株基因组多态性较引起霍乱流行和大流行的产毒株高,其中部分O1群霍乱弧菌非产毒株携带耐药质粒,表现出对多种抗生素的敏感性降低。结论O1群和O139群霍乱弧菌的基因组多态性高,应该密切关注携带多耐药质粒的霍乱弧菌非产毒株。
- 王鹏赵文轩徐晓倩周海健熊长辉李小英章承锋袁辉杨梦
- 关键词：基因组抗生素敏感性质粒
- 一次食物中毒相关的侵袭性大肠杆菌分子分型分析被引量：3
- 2015年
- 目的对一起食物中毒分离的病原菌进行鉴定、毒力基因检测及分子分型。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,用普通PCR和real-time PCR对病原菌进行毒力基因检测,用PFGE对其同源性进行分析。结果分离的12份病原菌均为Escherichia coli I,血清型为EIEC O136K78,12份病原菌均携带uid、ipaH基因,其中5份检测携带vir基因。PFGE电泳图谱显示12株病原菌带型完全相同,表明来源于同一克隆株。结论分子生物学技术与传统方法的有机结合对侵袭性大肠埃希菌的快速鉴定及分子分型具有重要意义。
- 熊长辉杨梦刘晓青徐晓倩王鹏袁辉
- 关键词：侵袭性大肠埃希菌分子分型脉冲场凝胶电泳
