王东武
- 作品数：11 被引量：72H指数：5
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 动态监测组织工程软骨的体外构建及三维静态培养被引量：5
- 2005年
- 目的采用荧光蛋白标记技术,对组织工程软骨的体外构建及三维静态培养进行连续观测,从而确定适宜的体外培养时间。方法将人间充质干细胞进行荧光蛋白标记,以2×107个/ml的细胞密度与可吸收性软骨支架材料在体外构建细胞材料复合体,再进行三维静态培养,通过倒置荧光显微镜对于接种后4d、1、2、3和4周的培养物,分别进行荧光强度观察和细胞数量分析。结果逆转录病毒载体pLEGFPN1成功标记种子细胞;采用沉淀法构建细胞材料复合体时,容易出现细胞在材料内分布不均匀的缺陷;连续培养复合体时其整体荧光强度会逐渐降低,单个复合体内的细胞数量在4d时为(1.90±0.12)×106,到第4周时降至(0.70±0.06)×106,差异有统计学意义(P<0.01)。结论体外静态培养组织工程软骨在4～7d时其中的细胞数量最高,适时翻转培养物有助于稳定细胞数量。
- 段小军杨柳周跃李忠陈光兴王东武李起鸿
- 关键词：体外组织工程软骨细胞数量荧光蛋白骨支架材料接种后
- 荧光蛋白表达对小鼠成纤维细胞系NIH3T3体外增殖能力的影响被引量：5
- 2005年
- 目的观察不同荧光蛋白表达对体外培养的小鼠成纤维细胞系NIH3T3增殖能力的影响,为细胞示踪技术提供理论依据。方法将体外扩增培养的NIH3T3细胞随机分为对照组、pLEGFP-N1组、pEGFP-N1组、pDsRed2-C1组。对照组不作任何处理,其他3组分别采用逆转录病毒载体pLEGFP-N1和真核表达载体pEGFP-N1、pDsRed2-C1两种转染方式进行增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RFP)标记,经G418筛选培养后,观察各组细胞荧光蛋白表达情况,并计算其阳性表达率;观察各组细胞贴壁率,绘制生长曲线并测定倍增时间。结果对照组NIH3T3细胞未见荧光蛋白表达;pLEGFP-N1、pEGFP-N1组均表达EFGP,pDsRed2-C1组表达RFP,而pLEGFP-N1组阳性表达率高于另外两组(P<0.01).各组细胞均有较高的贴壁率。pEGFP-N1组细胞倍增时间为(39.6±0.6)h,pDsRed2-C1组(40.3±0.7)h,pLEGFP-N1组(36.5±0.7)h,均明显晚于对照组(27.9±0.6)h(P<0.01).结论荧光蛋白表达对NIH3T3细胞体外增殖有一定程度的影响,但逆转录病毒载体抑制作用低于普通真核表达载体,可作为细胞移植时荧光蛋白标记的较好选择。
- 段小军杨柳周跃唐康来王东武
- 关键词：荧光抗体技术成纤维细胞细胞培养技术细胞增殖
- 可注射温固化支架复合异体软骨细胞修复关节软骨缺损的初步研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨可注射性温固化凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(C-GP)复合同种异体软骨细胞在体内形成透明软骨和注入关节腔后修复关节软骨缺损的可行性和有效性。方法将预制的壳聚糖和甘油磷酸钠按一定体积比制成混合液,实验组为支架复合同种异体软骨细胞,设单纯支架和生理盐水为两组对照。注入成年兔的背部皮下和预制关节软骨缺损的关节腔内,复合物在体内37℃形成凝胶,术后4、8、12周分别行大体、组织学(HE、TB)、Ⅱ型胶原免疫组织化学观察,并进行Wakitani评分。观察其体内成软骨和填充并修复关节缺损效果。结果液态C-GP复合物注入体内可形成凝胶,实验组皮下生长4周,组织学观察示典型的透明软骨样结构且分泌基质;C-GP复合细胞注入关节腔可很好地填充关节缺损,并于4周后开始形成透明软骨样结构且表面平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原。结论可注射性C-GP复合软骨细胞体内可形成具有一定形态功能的类软骨组织,能够应用于微创技术再生修复软骨的缺损。
- 王东武杨柳段小军李忠张洪鑫
- 关键词：软骨细胞甘油磷酸钠关节软骨
- 可注射性壳聚糖/磷酸甘油复合异体软骨细胞修复兔关节软骨缺损的初步研究
- ＜正＞目的实验观察了壳聚糖／磷酸甘油（C／GP）支架的生物相容性,及其用于体外或异体动物皮下构建软骨的效果。方法 1、计算幼龄兔关节软骨细胞接种C／GP表面的粘附率;观察三维接种于C／GP凝胶中细胞的形态及分布,计算细胞...
- 王东武杨柳段小军戴刚
- 文献传递
- 关节镜下手术治疗膝半月板损伤478例流行病学调查分析被引量：21
- 2006年
- 目的调查分析近期关节镜下手术治疗膝半月板损伤病例的临床流行病学特点及其变化趋势。方法回顾性调查西南医院关节外科中心2001年1月～2005年3月期间关节镜下手术治疗膝半月板损伤的全部病例，统计分析其性别比倒、年龄分布、病因分布、术前诊断准确率、发病至手术时间、损伤部位分布、术后住院天数、手术方式频次及合并症发生率。结果关节镜下手术治疗膝半月板损伤者478倒，其性别比（男：女）为0．83：1，年龄4～83岁，平均（40．88±16．96）岁；其病因分布：无外伤病史者（50．42％）＞其他外伤者（43．31％）＞运动损伤（6．28％）；术前诊断准确度为92．15％，发病至手术平均时间（28．96±60．37）个月，右膝半月板损伤的发生率（52．60％）与左膝半月板损伤（47．40％）相近（P＞0．05），外侧半月板损伤的发生率（65．56％）高于内侧半月板损伤（34．44％，P＜0．05），外侧盘状半月板损伤的病因分布为：无外伤病史者（57．00％）＞其他外伤者（39，00％）〉运动损伤者（4．00％）；手术方式频次为：部分切除术（46．72％）≈修整术（46．23％）＞全部切除术（6，12％）＞缝合术（0．92％）；术后平均住院天数（6。40±6。27）d；合并症发生率为：滑膜炎（42．97％）≈关节软骨损伤（42．37％）＞滑膜皱襞综合征（7．43％）≈前交叉韧带损伤（7．23％）。结论目前关节镜下手术治疗膝半月板损伤病例的性别比、年龄分布、病因分布、术前诊断准确率、发病至手术时间、术后住院天数、手术方式及并发症，较其开放手术治疗时期有一定变化，损伤部位分布则无明显改变；外侧盘状半月板损伤的病因分布具有其自身特点。
- 戴刚张卫东王东武杨柳唐康来代伟吴波代灿谭晓康简月奎傅强
- 关键词：流行病学半月板损伤关节镜微创手术
- 改进型纤维蛋白凝胶种植技术在组织工程骨体外构建中的应用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨纤维蛋白凝胶种植技术在组织工程骨体外构建中的应用,从而改善目前常规构建技术的缺陷。方法首先采用逆转录病毒pLEGFP-N1对人骨髓间充质干细胞进行荧光蛋白标记,经成骨诱导培养作为种子细胞,然后分别应用纤维蛋白凝胶种植技术(A组)和沉淀种植技术(B组),体外构建细胞-材料复合体,通过倒置荧光显微镜和扫描电镜等观测种子细胞在支架材料内的分布与数量。结果逆转录病毒载体pLEGFP-N1成功标记骨髓间充质干细胞,并应用于工程化组织体外构建的示踪;A组细胞在材料内分布更均匀、数量更多,构建第2天细胞数量为(6.83±0.15)×105/个复合体,而B组细胞为(3.28±0.18)×105/个复合体,两组数据有非常显著统计学意义(P<0.01)。结论纤维蛋白凝胶种植技术简单易行,不仅改善种子细胞在骨支架材料内的分布,而且提高细胞种植效率,为体外高效构建组织工程骨创造了条件。
- 段小军张洪鑫杨柳王东武陈光兴李忠
- 关键词：骨髓间充质干细胞纤维蛋白
- 可注射C/GP支架的组织相容性及与BMCs的细胞相容性观察被引量：9
- 2007年
- 目的观察温固化可注射性壳聚糖/甘油磷酸钠(C/GP)凝胶的组织与细胞相容性,评估其作为组织工程支架的可行性。方法将7∶1体积比的壳聚糖和甘油磷酸钠溶液混合,注入成年兔的背部皮下、皮内和腹腔,从大体和组织学观察其局部炎症、皮肤刺激及全身中毒反应。以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的骨髓间充质干细胞(BMCs)为示踪细胞,复合C/GP凝胶行体外培养,注入兔的背部皮下或预制关节缺损的关节腔内,术后一定时间制作冰冻切片,荧光显微镜下观察,图像分析细胞存活及修复关节缺损效果。结果C/GP具有良好的组织相容性和生物安全性,与EGFP-BMCs以一定细胞浓度混悬,体外及皮下培养数周均可见荧光标记的细胞,支架与细胞复合物完全充填关节缺损,细胞荧光标记阳性,细胞参与修复。结论可注射性C/GP支架具有良好的组织相容性,细胞在支架内存活良好。
- 王东武杨柳戴刚
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白甘油磷酸钠
- 骨髓间充质干细胞在壳聚糖凝胶中体外三维培养的实验研究被引量：6
- 2006年
- 目的研究猪骨髓间充质干细胞在壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶中体外三维培养的生长和增殖情况,探讨壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶与骨髓间充质干细胞的细胞相容性。方法将间充质干细胞与壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶混合,体外三维培养3周,采用倒置相差显微镜观察细胞在凝胶内粘附、生长和增殖等情况,复合物行组织形态学观察。结果间充质干细胞能良好地在壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶内伸展、粘附、生长和增殖,细胞在新形成的组织内保持成活。结论壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶与间充质干细胞具有良好的细胞相容性,可作为间充质干细胞的载体。
- 李忠杨柳戴刚王东武谭美云王富友金旭红
- 关键词：间充质干细胞壳聚糖水凝胶细胞相容性
- 体外构建可注射性组织工程软骨的初步研究被引量：16
- 2006年
- 目的利用关节软骨细胞复合壳聚糖-磷酸甘油(ch itosan/glycerophosphate,C/GP)凝胶,体外构建可注射性组织工程软骨,为微创方式治疗关节软骨缺损提供依据。方法以体外培养扩增的兔关节软骨细胞为种子细胞,以自制温固化可注射C/GP凝胶为支架,按5×107/m l细胞浓度复合体外培养。于倒置显微镜下观察细胞形态与分布,四甲基偶氮唑盐(MTT)法计算培养1周时种子细胞存活率,培养4周时样本进行组织学及扫描电镜观察。结果软骨细胞在7∶1(体积分数)C/GP凝胶中保持球形,细胞存活率95%以上;HE染色可见软骨较为典型的陷窝样结构、软骨囊及同源细胞群等现象;甲苯胺蓝异染及免疫组化Ⅱ型胶原染色呈强阳性。结论软骨细胞在C/GP凝胶中可存活并保持分泌软骨基质的功能,形成类软骨组织。温固化可注射性C/GP凝胶能作为软骨组织工程的载体材料。
- 王东武杨柳段小军李忠
- 关键词：软骨细胞壳聚糖甘油磷酸钠
- 关节镜下手术治疗膝关节半月板损伤478例流行病学调查分析
- 背景:膝关节半月板损伤是关节外科的常见疾病。近年来，随着四肢关节MRI的应用和关节镜技术的改进，膝关节半月板损伤的诊断率和手术疗效显著提高，其临床流行病学特点可能发生某些变化。通过关节镜下手术治疗膝关节半月板损伤的流行病...
- 戴刚吴波代灿谭晓康简月奎傅强代伟杨柳唐康来郭林陈光兴段小军张晓星王东武张卫东
- 关键词：膝关节半月板损伤关节镜流行病学
- 文献传递
