王会敏
- 作品数：9 被引量：5H指数：1
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院实验动物研究中心更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 牛MBD1基因表达的表观遗传调节及其对发育相关基因的作用
- DNA甲基化是高等真核生物的一种重要的表观遗传修饰方式，通过改变染色质的空间构象，富集特异的转录调控因子影响基因转录。其中甲基化CpG结合蛋白(methyl-CpG-binding domain protein，MBD)...
- 王会敏
- 关键词：早期胚胎发育DNA甲基化
- 甲基化CpG结合蛋白MBD1在牛早期胚胎发育中的表观遗传变化及其对发育相关基因的作用
- 根据MBD1基因调节区序列设计引物，利用甲基化PCR测序分析方法分析牛五种组织中MBD1调节区的甲基化变化，及其表达水平。在此基础上，检测该T-DMRs区在卵母细胞及胚胎发育不同时期的甲基化变化，并通过RT-PCR检测M...
- 王会敏奥旭东于海泉
- 关键词：DNA甲基化
- MBD1基因在牛组织中表达及DNA甲基化修饰
- 化CpG 结合蛋白MBD1 是MBDs 家族成员,能够结合甲基化及非甲基化的DNA,通过抑制域抑制基因的转录,在DNA 甲基化和转录抑制之间起重要联系作用.本研究对牛组织中的MBD1 基因的表达情况及DNA 甲基化状态进...
- 王会敏奥旭东岳永莉高海霞于海泉
- 关键词：DNA甲基化MRNA
- 牛早期胚胎发育中AID基因的表达及其调节区DNA甲基化的动态变化被引量：1
- 2016年
- 以具有DNA主动去甲基化作用的活化诱导胞苷脱氨酶(Activation-induced cytidine deaminase,AID,亦称为AICDA)基因为研究对象,检测其在牛卵母细胞及体外受精胚胎发育不同阶段的表达变化及其调节方式,揭示细胞重编程分子机制。应用Real-time PCR、BSP(Bisulfite Sequencing PCR)和免疫荧光化学等方法分析DNA甲基化对牛早期胚胎发育中AID基因表达的影响。结果显示,AID基因在牛早期胚胎发育中受DNA甲基化的调控,AID基因的T-DMR(tissue-dependent and differentially methylated region)位于其转录起始位点-88 bp--431 bp。在牛卵母细胞成熟过程中,T-DMR第2和第3号Cp G位点的DNA甲基化明显去除,而其他位点都未发生变化。卵母细胞在成熟过程中AID基因的积累与DNA甲基化状态变化相关。在牛体外受精胚发育早期的各阶段,尽管AID基因的表达不同,但AID基因T-DMR除第2和第3号CpG位点一直都维持去甲基化状态外,其他位点始终维持甲基化状态。推测其表达的变化可能是胚胎基因组激活有关。以上研究表明,AID基因T-DMR的低甲基化与其表达存在一定的相关性。通过免疫荧光检测发现,从卵母细胞成熟期到桑椹胚期,AID蛋白都是均匀分布于细胞核和细胞质中。而囊胚时期大量AID蛋白集中于内细胞团,这可能对于内细胞团多能性的维持起重要作用。综上所述,牛卵母细胞成熟中积累的AID作用于受精过程,其启动子区的DNA去甲基化与AID基因的表达有关,胚胎基因组激活后AID基因的表达可能与胚胎发育有关。
- 奥旭东萨如拉王杰王会敏于海泉
- 关键词：牛体外受精胚胎DNA甲基化
- 丙戊酸VPA对牛体外成熟卵母细胞及体外受精胚胎发育的影响研究
- 本研究利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂VPA (Valproic acid)处理牛卵母细胞及胚胎,探讨VPA处理对牛卵母细胞成熟、体外受精胚及孤雌激活胚发育的影响及对相关基因的作用.结果显示,1).0.03 mM和0.3 mM...
- 高海霞白海栋王振飞王会敏王杰萨如拉任晓律于海泉
- MBD1基因在牛组织中表达及DNA甲基化修饰
- 甲基化CpG结合蛋白MBD1是MBDs家族成员,能够结合甲基化及非甲基化的DNA,通过抑制域抑制基因的转录,在DNA甲基化和转录抑制之间起重要联系作用。本研究对牛组织中的MBD1基因的表达情况及DNA甲基化状态进行检测,...
- 王会敏奥旭东岳永莉高海霞于海泉
- 关键词：DNA甲基化MRNA表达
- 文献传递
- 牛组织中MBD1基因表达及其DNA甲基化调节被引量：3
- 2012年
- DNA甲基化是主要的表观遗传调节方式,在转录水平调节基因的表达,甲基化CpG结合蛋白MBD1能够结合甲基化及非甲基化的DNA,通过抑制域抑制基因的转录,在DNA甲基化和转录抑制之间起重要作用,但DNA甲基化对MBD1自身的调节作用还不清楚。本研究首先利用RT-PCR检测成年牛心脏、肾脏、肝脏、睾丸及卵巢5种组织中MBD1基因mRNA的表达;并根据牛MBD1调节区序列,针对其中的12个CpG位点设计引物,利用甲基化PCR测序分析方法,分析该调节区的DNA甲基化状态在牛5种组织中的变化。结果表明,在牛的5种组织中,MBD1基因在心脏和肾脏的表达量低于肝脏、睾丸及卵巢,且差异显著(P<0.05);DNA甲基化检测显示,心脏和肾脏MBD1调节区的甲基化比率较肝脏、睾丸及卵巢甲基化低,说明调控区DNA甲基化与MBD1基因的组织特异性表达相关。
- 王会敏奥旭东岳永莉高海霞于海泉
- 关键词：DNA甲基化MRNA表达
- DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR对AID基因修饰的牛胎儿成纤维细胞的作用被引量：1
- 2016年
- 以转AID基因细胞和AID基因敲减细胞为研究对象,旨在探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对其细胞形态、细胞周期、相关基因表达及其基因启动子区甲基化状态变化的影响。此外,还分析了整体基因组去甲基化和位点特异性去甲基化之间存在的差别,探讨提高体细胞重编程效率的方法及其作用机制。通过Real-time PCR、BSP(Bisulfite Sequencing PCR)、Western blotting和流式细胞术等技术分析了5-Aza-CdR对转AID基因细胞和AID基因敲减细胞的影响。结果表明,5-Aza-CdR对转AID基因细胞的影响存在明显的剂量效应,浓度为4μmol/L时,具有明显的细胞毒性,大量细胞死亡(P<0.05)。当使用处理浓度为1-3μmol/L时,细胞形态发生改变,细胞增殖被抑制。核型分析显示,3μmol/L浓度组处理就可以导致转AID基因细胞出现异常核型。使用1μmol/L浓度处理细胞,明显增加了表达报告基因细胞的数量,细胞AID和SOX2的表达量都有所提高,并且SOX2基因启动子区的DNA甲基化水平也有所下降。5-Aza-CdR处理AID基因敲减细胞后,OCT4和SOX2的表达量较对照组明显升高,而NANOG却没有发生变化。结果显示,5-Aza-CdR处理转AID基因细胞可改变细胞形态、细胞周期和报告基因的表达,5-Aza-CdR处理后基因组整体去甲基化和AID基因的位点特异性去甲基化协同作用于体细胞重编程。
- 奥旭东萨如拉王杰王会敏于海泉
- 关键词：5-AZA-CDR体细胞核移植
