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B19病毒XA株VP1独特区真核表达系统的建立及鉴定: 2010年; 目的:克隆B19病毒XA株VP1u基因,构建真核重组表达载体。方法:从已构建好的B19病毒XA株原核表达载体中获得VP1u基因,将其克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,经酶切鉴定并测序验证后,获得真核表达载体pIRES2-EGFP-VP1u。将其转染至HeLa细胞,提取细胞总蛋白,用Western blot技术检测VP1u蛋白的表达。结果:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-VP1u,荧光显微镜下可见pIRES2-EGFP-VP1u转染HeLa细胞后表达EGFP蛋白而发出绿色荧光,Western blot证明VP1u蛋白在HeLa细胞中表达。结论:成功构建了携带人B19病毒VP1u基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-VP1u并在HeLa细胞中正确表达,为今后B19病毒VP1u基因疫苗的研究奠定基础。; 迟明迟海峰许东亮王楠聂晓晶杨晓蕾吕香萍张国成; 关键词：基因克隆

95例肺炎支原体快速液体培养阳性标本分析被引量：4: 2010年; 目的:采用巢式PCR法(nPCR)及全自动微生物鉴定仪对肺炎支原体(MP)快速液体培养阳性标本进行分析,探讨MP快速培养假阳性情况及原因。方法:收集95例MP快速液体培养阳性标本,巢式PCR检测MP核酸,用全自动微生物鉴定仪检测导致培养假阳性的微生物。结果:95例MP快速液体培养阳性标本中,90例巢式PCR结果阴性,假阳性率94.7%;经全自动细菌鉴定仪鉴定,97.8%为真菌所致。结论:普通的敏感细菌在MP快速液体鉴定培养基中可以被有效抑制;真菌是引起的快速培养假阳性的主要原因。; 王楠张国成许东亮; 关键词：肺炎支原体巢式PCR

儿童肺炎支原体西安流行株的基因分型被引量：8: 2013年; 目的了解现阶段西安地区儿童肺炎支原体(MP)流行株的基因分型。方法将收集到的274例呼吸道感染患儿咽拭子分泌物标本行巢式PCR检测,其中MP阳性标本及FH-MP标准株进一步行巢式PCR基因分型鉴定。结果巢式PCR检测显示,274例标本中31例MP阳性;再经巢式PCR基因分型鉴定,31例MP阳性标本基因型均为P1-Ⅰ型;而FH-MP标准株的基因型为Pl-Ⅱ型。结论 MP西安流行株基因型为P1-Ⅰ型。; 王楠张凯张国成; 关键词：肺炎支原体流行株基因分型儿童

基因表达谱技术:贵亦需有道: 2010年; 肿瘤是最常见的危害人类健康的疾病之一,但其早期诊断困难,导致患者不能及时、恰当地接受治疗。因此,探索肿瘤早期诊断的新方法,早发现、早治疗是肿瘤治愈的关键。目前,基因表达谱技术等新型诊断方法得到越来越多的应用。本文针对发表在《临床医师肿瘤杂志》(CA Cancer J Clin)2009年第5期上的1篇综述文章,提出虽然基因表达谱技术是一项很有前景的诊断方法,但是经济效益分析暂时不支持其在临床大范围推广,期望能够引起同行的争鸣。; 豆玉凤张国成孙新刘颖悦王楠黄娜; 关键词：恶性肿瘤

快速培养结合显微镜排除法检测肺炎支原体的研究: 肺炎支原体(Mycoplasma Pneumonise,MP)是介于细菌与病毒之间，能独立生活的无细胞壁的最小的原核细胞型微生物。本文中分别利用快速液体培养、培养显微镜法、巢式PCR及荧光定量PCR四种方法，对243例呼...; 张国成王楠; 关键词：肺炎支原体; 文献传递

快速培养结合显微镜排除法检测肺炎支原体的研究被引量：8: 2010年; 目的探讨快速培养显微镜排除法(培养显微镜法)提高肺炎支原体(MP)检测特异性的可行性,分析快速培养假阳性的情况及原因。方法将收集到的243例MP快速液体培养标本,用显微镜、巢式PCR及荧光定量PCR分别进行检测,采用SPSS13统计软件进行统计分析;快速培养阳性标本在培养皿中继续培养,生成的菌落用全自动微生物鉴定仪检测,分析导致快速培养假阳性的原因。结果在243例检测标本中,快速液体培养检测出MP阳性97例,阳性率39.92%;培养显微镜法阳性23例,阳性率9.47%;巢式PCR及荧光定量PCR法检测结果一致,阳性各20例,阳性率均为8.23%。快速液体培养法与培养显微镜法、PCR法得到的检测结果有差异;培养显微镜法与PCR法得到的检测结果相同。97例MP快速液体培养阳性标本用培养皿培养,81例产生菌落,经全自动细菌鉴定仪鉴定,真菌75例,其余为耐药菌株,无普通敏感细菌。结论培养显微镜法可有效降低快速培养的假阳性率,特异性与巢式PCR及荧光定量PCR一致。普通的敏感细菌在MP快速液体鉴定培养基中可以被有效抑制,真菌及耐药菌株是引起的快速培养假阳性的主要原因。然而,真菌及MP的混合感染所致快速培养阳性的标本不能用显微镜鉴别排除。; 王楠张国成刘芳杨晓蕾豆玉凤; 关键词：肺炎支原体显微镜 PCR

多媒体超高倍显微仪在小儿呼吸道支原体感染中的应用被引量：1: 2013年; 目的探讨多媒体超高倍显微分析仪对小儿呼吸道肺炎支原体（MP）感染的诊断价值及应用。方法对114例疑似MP感染的呼吸道感染患儿，用多媒体超高倍显微分析仪对其咽分泌物直接镜检观察，同时于发病7d后，测血清MP-IgM，对二者结果进行比较。结果多媒体超高倍显微分析仪咽拭子MP检出率61．4％（70／114），血清MP-IgM阳性率26．3％（30／114），二者差异有统计学意义（χ^2=28．50，P〈0．01），以血清MP—IgM作为急性感染指标，前者诊断的灵敏度60．0％、特异度36．9％、阳性预测值25．7％、阴性预测值78．5％。结论多媒体超高倍显微分析仪对小儿呼吸道MP感染的早期、快速诊断有一定的价值，对指导抗菌药物应用有重要意义。; 高建兴何文刚乔艳妮李彤陈娟王楠许茜芳; 关键词：肺炎支原体儿童

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王楠

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