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王淑豪: 作品数：12 被引量：11H指数：2; 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>; 发文基金：军队医学科研项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

人肝脯氨肽酶基因的克隆表达及其生化药理学性质: 有机磷化合物如梭曼(Soman)、沙林(Sarin)、塔崩(Tabun)、对氧磷(Paraoxon)和对硫磷(Parathion)等是一类不可逆地抑制胆碱酯酶(AchE)的剧毒化合物，主要作为化学武器或农药使用。对Ach...; 王淑豪; 关键词：基因克隆原核表达毕赤酵母表达

转基因迷你番茄及其对酒精引起的胃伤害的保护作用(英文)被引量：2: 2007年; 表皮生长因子(EGF)具有促进多种细胞增殖的作用, 尤其在维持消化道黏膜完整和促进消化道溃疡愈合方面作用巨大。以前的研究多集中在细菌和酵母中表达, 本研究试图以番茄作为生物反应器生产重组人 EGF, 使之成本降低, 应用方便。依据人 EGF 的基因序列, 设计合成了番茄密码子偏爱的人 EGF 基因, 并将其构建到植物表达载体 pCAMBIA2300 中, 通过农杆菌介导得到了含有人 EGF 基因的转基因番茄。放射免疫法检测到每克鲜重果实中的表达量达 3.48 ± 1.01 ng。将果汁灌喂小白鼠 15 天(相当于每鼠每天喂服 24 ng rhEGF)能显著抵抗酒精引起的胃溃疡形成, 溃疡指数由 42.20 ± 18.13 下降为 16.25 ± 9.57。; 智庆文王淑豪柴敏张凤英李前李仕贵孙曼霁; 关键词：番茄胃溃疡酒精

PTD-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及活性分析被引量：2: 2007年; 为获得hEGF在大肠杆菌中的高效表达,构建了pPTD-hEGF原核表达载体。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经0.3mmol/LIPTG诱导,PTD-hEGF融合蛋白进行了有效表达,表达产物主要形成了包涵体。经Ni2+-NTA亲和层析纯化,融合蛋白的纯度达99.5%。MALDI-TOF-MS分析证明表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。PTD-hEGF融合蛋白能明显促进HEK-293细胞的分裂和生长。; 智庆文王淑豪张凤英李仕贵孙曼霁; 关键词：原核表达 HEK-293细胞

人肝脯氨肽酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达: 利用酶清除神经性化学毒剂及有机磷农药作为一个研究课题已经有50多年的历史。1991年美国军事研究发展及工程中心生化防御部郑笃诚等从温泉中分离了嗜盐菌交替单胞菌属(Alteromonas)菌株JD6.5,其胞内含有高浓度有...; 王淑豪智庆文付爱玲孙曼霁; 文献传递

重组hEGF基因的原核表达及活性分析: 表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)是一类广泛存在于人和动物体内的可促进或抑制多类细胞生; 智庆文王淑豪付爱玲孙曼霁李仕贵; 文献传递

脯氨肽酶的生化性质: 2003年; 综述了脯氨肽酶 (prolidase)的生化性质 ,详细论述了人脯氨肽酶的生理、理化性质、序列及其空间结构 ,并对动物组织与微生物中存在的脯氨肽酶性质进行了比较。; 王淑豪孙曼霁; 关键词：生物化学动物微生物学

Q型人血清对氧磷酶在杆状病毒感染的昆虫细胞中的表达被引量：3: 2003年; 目的　研究对氧磷酶与心血管疾病的关系。方法　采用BAC TO BAC杆状病毒系统表达Q型人血清对氧磷酶 (PON 1) ,在已获得人PON 1全长cDNA的基础上 ,通过PCR扩增 ,得到上游含EcoRⅠ酶切位点 ,下游不含终止密码子而含HindⅢ酶切位点的PON 1基因 ,将其克隆到带有 6×His·Tag的pFASTBACⅡCD14质粒中 ,构建杆状病毒转移载体pFASTBACⅡ PON 1。将含有PON 1基因的重组质粒pFASTBACⅡ PON 1转化DH10BAC感受态细胞 ,使目的基因通过同源重组插入BacmidDNA中。PCR鉴定正确后再转染入sf9昆虫细胞中 ,产生有感染力的重组杆状病毒。用乙酸苯酯为底物测定表达上清液中的酶活性。结果　比较不同感染复数(MOI)和不同感染时间PON 1在培养上清液中的表达情况 ,确定感染复数MOI为 6～ 8,感染时间 96～10 8h为PON 1的最佳表达条件 ,产率约为 4 .5mg·L- 1上清液。免疫印迹法表明重组蛋白有与抗 6×His单克隆抗体结合的抗原性。顺磁共振实验证明 ,基因工程产人重组血清对氧磷酶rhPON 1能有效清除Fe2 +诱导亚油酸脂质过氧化产生的脂质自由基 ,清除率为 5 5 .9%。结论　BAC TO; 滕霞朱洁武军华张杰王淑豪池木根邵宁生秦浚川孙曼霁; 关键词：对氧磷酶杆状病毒心血管疾病