王秀青
- 作品数：51 被引量：208H指数：8
- 供职机构：宁夏医科大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 结核分枝杆菌宁夏分离株pstS1基因在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2013年
- 目的亚克隆结核分枝杆菌宁夏分离株pstS1基因,构建pPICZα-A-S1表达载体,并在毕赤酵母表达系统中分泌表达,为pstS1基因所表达的蛋白功能的研究奠定基础。方法 PCR方法亚克隆结核分枝杆菌宁夏分离株pstS1基因片段,构建毕赤酵母表达载体pPICZα-A-S1,重组质粒线性化之后电转化到在毕赤酵母表达菌株SMD1168感受态细胞中,挑选阳性克隆菌株并用甲醇进行诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定。结果构建了结核分枝杆菌pPICZα-A-pstS1重组质粒,以甲醇进行诱导,经过SDS-PAGE电泳进行分析,结果显示pstS1基因表达出了大约为38kD的蛋白,经过Western blot分析,分泌的蛋白与结核分支杆菌38KD抗血清能够特异性的识别。结论结核分枝杆菌pstS1基因可以在毕赤酵母中进行很好的分泌表达,为以后pstS1基因的表达产物在疫苗研制、诊断血清研究等方面的应用奠定了基础。
- 张婵朱明星杨风琴王秀青
- 关键词：结核分枝杆菌毕赤酵母
- 抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达被引量：21
- 2007年
- 通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵。经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性。
- 王秀青张素芳曹瑞兵周斌陈溥言
- 关键词：天蚕素B抗菌肽毕赤酵母
- 天蚕素A-马盖宁杂合肽体外抗白色念珠菌活性实验研究
- 2016年
- 目的:本实验旨在研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对白色念珠菌的体外抗菌活性。方法:选取10株临床分离的白色念珠菌和其标准菌株,采用K-B法和肉汤稀释法测定天蚕素A-马盖宁杂合肽对白色念珠菌的抑菌效果和最小抑菌浓度。结果:天蚕素A-马盖宁杂合肽对11株白色念珠菌均有抑菌作用,且最小抑菌浓度测定为0.16 mg/m L。结论:天蚕素A-马盖宁杂合肽对白色念珠菌具有一定的抑菌作用。
- 张爱君王秀青杨凤琴
- 关键词：白色念珠菌最小抑菌浓度
- 磷酸化蛋白质组学技术分析抗菌肽merecidin抑制人肺腺癌A549细胞增殖的作用机制被引量：2
- 2020年
- 目的:以磷酸化蛋白质组学技术分析抗菌肽merecidin处理人肺腺癌A549细胞后细胞内磷酸化蛋白质表达的差异,探究merecidin对肺腺癌A549细胞蛋白质活性、功能的影响以及涉及的信号通路。方法:采用9μmol/L merecidin处理肺腺癌A549细胞6 h,收集并提取总蛋白,SDS-PAGE检验全蛋白提取效果,加入胰酶来对蛋白质进行酶解。酶解所获肽段用TMT标记、采用HPLC分级分离、经IMAC磷酸化修饰富集以及液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)分离肽段。使用localization probability>0.75的标准对鉴定数据进行过滤,利用GO(Gene Ontology)数据库、KEGG(KyotoEncyclopedia of Genes and Genomes)数据库和STRING数据库对磷酸化蛋白组学数据进行分析。结果:SDS-PAGE结果显示,经9μmol/L merecidin处理后的A549细胞全蛋白分离效果清晰、无明显降解,且实验组与对照组条带差异明显;质谱共鉴定出位于3 089个蛋白上的10 320个磷酸化修饰位点,以|Fold change|>或<1.5且P<0.05为阈值从中筛选出差异明显的753个蛋白质及其1 172个磷酸化位点。蛋白质功能富集显示,磷酸化水平显著变化的蛋白质功能主要集中在蛋白质分子结合、代谢活性、分子功能调节、细胞进程、生物功能调节等方面;整合通路生物信息学分析结果显示,差异蛋白与Ras、PI3K/AKT、mTOR、AMPK等多条通路相关联;经过COG数据库筛选,发现差异性磷酸化蛋白主要集中在细胞信号转导、RNA转录、翻译后加工和修饰、核糖体合成蛋白质、细胞骨架蛋白形成及细胞内的物质转运和分泌、囊泡运输等多个方面;蛋白质互相作用层面分析结果显示,merecidin处理后的A549细胞中形成以MAPK1、RPL23A、SRSF3H、NCBP1等为关键蛋白的相互作用网,其中ATG2B、ULK1等蛋白显著上调,MAPK1、AKT1等蛋白显著下调。结论:磷酸化蛋白组学分析结果显示,抗菌肽merecidin可能通过MAPK、RPL23A、SRSF3H和AKT1等关键蛋白质在多方面生�
- 贾琴琴杨婷婷王雅蓉张倩楠王秀青
- 关键词：肺腺癌抗菌肽A549细胞磷酸化蛋白质组学
- PBL结合EBM教学模式在临床分子诊断学教学中的效果评价被引量：3
- 2021年
- 目的:探讨以问题为基础的学习(Problem-Based Learning,PBL)结合循证医学(Evidence-Based Medicine,EBM)在临床分子诊断学教学中的应用效果。方法:选择宁夏医科大学2016级医学检验技术专业41名本科生为研究对象,将其随机分为实验组(21人)和对照组(20人),实验组采用PBL结合EBM教学法,对照组采用传统LBL(LectureBased Learning)教学法,两组均通过成绩考核及问卷调查结果评价教学效果,使用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果:实验组学生在文献检索能力、解决问题能力、交流表达能力、团队合作能力及对教学模式的满意度方面显著优于对照组(P<0.05)。结论:PBL结合EBM教学模式优于传统LBL教学法,能够提高学生的综合素质及临床能力。
- 师志云丁淑琴牛宁奎张玉英潘琳马婷婷张爱君王秀青王利茹
- 关键词：循证医学教学效果
- 天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin突变体的合成以及在毕赤酵母中的分泌表达被引量：6
- 2009年
- 根据天蚕素类抗菌肽作用机制假说,设计引物对前期构建成功的载体天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin进行定点突变,使其生成杂合肽的衍生物,测序正确后转化Pichia pastoris受体菌SMD1168,在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,分子质量约119ku的cecA-mag杂合抗菌肽突变体获得表达,并通过琼脂扩散试验对表达产物的抑菌活性与cecA-mag进行了比较。结果表明,突变体对金黄色葡萄球菌抑菌活性比cecA-mag提高了1.2倍。
- 王秀青朱明星张爱君丁淑琴风琴
- 关键词：突变体毕赤酵母分泌表达
- 课程思政在“临床微生物学检验技术”教学中的应用
- 2023年
- 文章首先阐述了课程思政在“临床微生物学检验技术”教学中应用的目标,然后说明了课程思政在“临床微生物学检验技术”教学中应用的主要特色和关键点,接着提出了课程思政在“临床微生物学检验技术”教学中应用的具体方案,最后对课程思政在“临床微生物学检验技术”教学中的应用进行了积极反思。
- 王秀青张爱君贾伟李刚
- 关键词：医学检验技术专业
- 枸杞籽油对小鼠缺氧耐受性影响及哈白免抗动脉粥样硬化的作用的研究
- 方新明王秀青毛忠英董泉洲曹军李桂忠赵讯霞马玲娜于海娇姜怡邓董晓薇
- 枸杞具有降低血浆胆固醇、减少血管壁中胆固醇含量、防止高血脂及动脉粥样硬化症、延缓皮肤衰老等功能。该项目研究发现枸杞籽油对小鼠具有抗疲劳、耐缺氧、抗脂质过氧化，及抗动脉粥样硬化作用，其机制是通过影响PKC、MMP-2、MM...
- 关键词：
- 关键词：缺氧耐受性动脉粥样硬化
- 六处天蚕素类基因工程抗菌肽的研制及应用
- 抗生素的滥用不仅导致了药物残留等公共卫生隐疾，而且由于耐药菌株的出现，使得细菌性疾病的防治再次成为困扰人类的难题。一种全新抗菌药物的开发已经成为当代微生物学家、医药学家和兽医工作者的主攻课题。抗菌肽由于其广谱高效抗菌活性...
- 王秀青
- 文献传递
- 研究性实验应用于寄生虫学检验实验教学中的思考
- 2012年
- 在临床寄生虫学检验实验教学中,开展研究性实验教学,探索实验教学新模式。实践表明,研究性实验教学模式受到学生普遍欢迎,此种模式能激发学生学习的自觉性、积极性和获取大量知识信息的主动性,促进专业技能的掌握,有利于培养学生的创新思维,提高实验教学质量。
- 张爱君王秀青丁淑琴哈丽娜
- 关键词：研究性实验实验教学
