王绍军
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分泌型重组mPSMA腺病毒的构建及表达被引量：3
- 2009年
- 目的构建分泌型重组小鼠前列腺特异膜抗原腺病毒(Ad-mPSMA),并检测其免疫效果。方法利用AdEasy重组腺病毒载体系统,通过PCR扩增小鼠PSMA全长序列,并在基因的5′端加上人IL-2的信号肽序列,亚克隆至pAdenoVator CMV5穿梭质粒,与pAdenoVatorΔE1/E3进行同源重组获得pAd-mPSMA重组质粒,经HEK293细胞包装扩增获得重组病毒颗粒。通过RT-PCR及Western blot检测小鼠PSMA基因在HeLa细胞中的转录及表达。以该重组腺病毒免疫小鼠,对mPSMA的特异性抗体进行检测。结果成功将mPSMA基因克隆至pAdenoVatorΔE1/E3载体上,病毒滴度为1.32×1011IU/mL,RT-PCR证实mPSMA的转录,Western blot证实mPSMA的分泌表达,并在小鼠血清中检测到mPSMA的特异性抗体。结论成功构建分泌型重组mPSMA腺病毒,为前列腺癌特别是激素难治性前列腺癌的预防和治疗提供了更广阔的前景。
- 张冬梅王绍军彭星辰杨莉
- 关键词：前列腺特异膜抗原腺病毒载体基因治疗
- 大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒诱导小鼠特异性抗体的研究
- 2011年
- 目的构建含大鼠前列腺特异膜抗原基因(PSMA)的重组腺病毒Ad-rPSMA,并研究其在小鼠体内的特异性体液免疫反应。方法提取大鼠脑组织总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因片段,利用Adeasy腺病毒载体系统构建pAd-rPSMA重组腺病毒质粒,包装复制缺陷型重组腺病毒Ad-rPSMA,制备病毒颗粒。用制备的病毒感染HeLa细胞,Western blot检测PSMA基因的表达。以Ad-rPSMA重组腺病毒免疫C57小鼠,检测血清中PSMA特异性抗体。结果成功构建了含有大鼠PSMA基因的重组腺病毒,制备的病毒颗粒数为1.97×1012VP/mL,A260/A280值为1.32,病毒滴度为5×1010IU/mL;Western blot检测可见大鼠PSMA基因在HeLa细胞中的表达;ELISA法检测出免疫小鼠血清中存在PSMA特异性抗体。结论成功构建了大鼠前列腺特异膜抗原基因重组腺病毒Ad-rPSMA,并诱导小鼠产生了针对PSMA的特异性抗体。
- 王绍军张冬梅杨莉
- 关键词：前列腺癌前列腺特异膜抗原腺病毒载体
