王继
- 作品数:6 被引量:3H指数:1
- 供职机构:东北师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金长春市科技局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 基因工程血管生成素肿瘤检测试剂的制备及应用
- 王丽杨琼邱田于得海杨剑丽王继沈卫赵振刚崔淑华郭丽艳王国峰
- 本项目以基因工程方法生产血管生成素蛋白,并制备血管生成素单克隆抗体及多克隆抗体,开发临床诊断肿瘤的试剂。简要技术说明如下: 1)利用基因重组技术,成功构建了带有6His纯化标签的人血管生成素蛋白的原核表达质粒;对工程菌...
- 关键词:
- 关键词:血管生成素基因工程肿瘤检测蛋白检测试剂
- 人野生型p53基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2009年
- 利用RT-PCR方法由人外周静脉血淋巴细胞中获得人p53 cDNA片段,并将其克隆入原核表达载体pQE40中,构建重组质粒pQE40-p53;转化于E.coliM15宿主菌,经IPTG诱导,表达了N端融合6His的p53融合蛋白.利用6His与Ni2+高亲合力结合的性质,经镍柱纯化、透析袋分级透析复性、Western Blot鉴定,结果表明获得了纯化的6His-p53融合蛋白.
- 王继高瑞娟袁大巍王丽
- 关键词:P53基因基因克隆原核表达
- RNA干扰对HeLa细胞VEGF表达和细胞增殖的影响被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨RNA干扰对HeLa细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达和细胞增殖的影响,为人宫颈癌的治疗提供理论依据。方法:构建针对VEGF165的RNA干涉质粒,稳定转染HeLa细胞,设HeLa组、对照组和干涉组,用RT-PCR方法检测稳定细胞株中VEGFmRNA的表达,Western blotting和ELISA方法检测VEGF165蛋白的表达,MTT及流式细胞术检测VEGF siRNA作用下的细胞增殖,Hoechst33342染色检测VEGF siRNA作用下细胞凋亡的变化。结果:成功建立了VEGF siRNA的稳定细胞株,与对照组比较,干涉组VEGF的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,稳定转染VEGF siRNA的细胞株在24、48和72h的细胞生长抑制率分别为12.8%±5.4%、17.4%±3.7%和27.2%±5.7%,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01)。与对照组比较,Hoechst33342染色显示VEGF siRNA对HeLa细胞的细胞凋亡率没有影响。结论:VEGFsiRNA可以有效抑制HeLa细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖,提示VEGF在宫颈癌的发生、发展中具有重要作用,抑制VEGF的表达有望成为一种治疗宫颈癌的途径。
- 王继李星蓉左丹王丽
- 关键词:HELA细胞内皮生长因子RNA干涉细胞增殖
- “a”决定簇145位点变异的HBsAg单克隆抗体制备及HBV变异株快速检测方法
- 2008年
- HBsAg抗原145位突变,可能导致临床上广泛使用的HBsAg诊断试剂出现漏检.通过杂交瘤技术制备出了一种抗该突变体的单克隆抗体,属IgG1亚类(κ型,效价为1∶9×104)与其他类型肝炎病毒抗原无交叉反应.采用该单抗与多克隆抗体所建立的AC-ELISA法,对临床上乙型肝炎病毒(HBV)的突变样品进行检测的特异性和敏感性较高.
- 王军王继王丽
- 关键词:乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体ELISA
- 肿瘤发生机制及肿瘤检测研究
- 王丽宋金娜高翔王桂云赵佳于得海吕宪波潘鹏涛野丽莉蒋子平王继杨剑丽邱琳琳
- 肿瘤发生机制研究方面,利用不同的肿瘤细胞,系统地研究了三种主要重要的血管发生因子血管生成素,碱性成纤维生长因子bFGF,内皮细胞生长因子VEGF相互作用关系。研究结果1)发现血管生成素能够负调节bFGF的表达;2)证实b...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤筛查肿瘤治疗
- 血管生成素与碱性成纤维生长因子之间相互作用关系及其分子机制的研究
- 血管生成素和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是重要的促血管生长因子,调节着细胞的增殖、分化和迁移,在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。目前关于血管生成素和bFG...
- 王继
- 关键词:血管生成素碱性成纤维生长因子分子机制肿瘤细胞