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王绪海: 作品数：18 被引量：17H指数：3; 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金新疆生产建设兵团科技支疆计划项目新疆生产建设兵团博士基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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不同MHC-DRB1单倍型哈萨克绵羊感染包虫病初期小肠组织差异表达基因筛选与分析被引量：1: 2015年; 前期研究发现哈萨克绵羊的单倍型MHC-DRB1基因单倍型MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab与细粒棘球蚴病(包虫病)抗性密切相关,但具体分子抗病机制尚不明确。本研究旨在筛选和分析不同MHC基因型哈萨克绵羊感染包虫病早期小肠组织差异表达基因。以PCR-RFLP方法根据MHC-DRB1单倍型选择抗病和非抗病哈萨克绵羊,将实验动物分为包虫病抗性组(A)、包虫病非抗性组(B)和健康对照组(C),A、B两组分别于人工感染包虫病后2、3、4 h采集小肠组织,以C组为对照,采用基因芯片的方法分析不同各组间小肠差异表达基因。结果表明:A组与C组相比差异表达的基因共4 712个,其中表达量上调的有1 959个,表达量下调的有2 753个;B组与C组相比差异表达的基因4 944个,其中2 076个表达上调,2 868个表达下调;同C相比,A和B同为上调或下调,且表达量差异显著的基因有141个,其中32个基因表达上调,109个基因表达下调。综上,差异基因主要涵盖了代谢、细胞进程等方面,KEGG分析显示出现频率最高的补体凝集素通路代谢途径值得关注。; 李鑫惠文巧蒋松贾斌张永生申红李洪涛王绪海韩国华刘帅兵; 关键词：哈萨克羊包虫病小肠差异基因

细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备: 2017年; 为了表达、纯化细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白及制备多克隆抗体,本研究构建细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白原核表达载体p ET30a-M26,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的副肌球蛋白,免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对副肌球蛋白及抗体进行检测。结果显示:成功表达并纯化了细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白,重组蛋白分子质量约41 k D,纯化后目的蛋白纯度可达85%,蛋白浓度为0.5mg/ml。副肌球蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1∶12800,结果表明,成功表达并纯化了六钩蚴副肌球蛋白。本研究可为研究包虫病早期诊断奠定了基础。; 袁方园贾斌王绪海杜迎春孙丽蓉李鑫李亚强沈文; 关键词：副肌球蛋白原核表达多克隆抗体六钩蚴

猪Zfx基因RNAi载体筛选及性控效果的观察被引量：1: 2015年; 为了研究Zfx基因在精子发生过程中的作用,本研究利用RNA干扰技术针对猪Zfx基因m RNA设计3条si RNA并构建sh RNA干扰载体(p LL3.7/e、p LL3.7/f、p LL3.7/g)。对体外培养生精细胞进行干扰后,通过q RT-PCR测定Zfx基因m RNA表达丰度筛选出有效的干扰片段。然后利用有效的干扰载体进行睾丸注射,开展体内干扰试验。结果表明:构建的3个干扰载体,其中p LL3.7/e、p LL3.7/f对生精细胞Zfx基因的干扰率分别为44%(P<0.05)、56%(P<0.05),而p LL3.7/g对其无干扰效果(P>0.05);用p LL3.7/e、p LL3.7/f进行体内试验,结果显示后代仔猪雄性率率分别为51%(P>0.05),59%(P<0.05)。结论:Zfx基因干扰可以影响猪后代的性别比例,本研究可为今后进一步研究动物性别控制提供依据。; 宁孟影孙丽荣张永生贾斌秦炳燕魏丽敏王绪海; 关键词：RNAI 性别控制

抗性和非抗性哈萨克羊人工感染包虫虫卵早期小肠免疫指标的差异分析: 2018年; 包虫病又称棘球蚴病,是由细粒棘球绦虫引起的一种呈全球性的人畜共患病。本研究就包虫病抗性和非抗性哈萨克羊人工口服感染了细粒棘球绦虫虫卵后,对小肠组织中的免疫球蛋白和主要的细胞因子和趋化因子进行了研究。研究发现人工感染后6h、8h、10h屠宰绵羊,采集绵羊各段小肠组织并匀浆取上清液,ELISA试剂盒检测小肠组织中抗体(IgM、IgG、IgE)、细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、sIgA)和趋化因子(CCL8)的水平。结果表明,IgE(P<0.05)在空肠后段、IgM(P<0.01)在回肠、SIgA(P<0.05)在十二指肠和空肠以及IFN-γ(P<0.05)在十二指肠和空肠前段,抗性组显著高于非抗性组,IgG(P<0.05)在空肠前段、IL-2(P<0.05)在回肠抗性组显著低于非抗性组。而TNF-α、IL-4和CCL8在两组间没有显著差异。这说明携带MHC抗性基因型的绵羊在小肠组织表现出较强的包虫病抵抗力可能与其早期IFN-γ、SIgA和IgM分泌较高有关。; 王绪海蒋松李鑫张永生李超程营瑞文贾斌; 关键词：哈萨克羊抗性免疫

猪Zfx基因RNAi片段的筛选: 2014年; 为了研究Zfx基因在精子发生过程中的作用,本实验利用RNA干扰技术针对猪Zfx基因m RNA的不同靶位设计构建了4个不同的sh RNA干扰载体:3个RNAi-Ready-p SIREN-Retro Q-Zs Green(p SIREN)质粒重组载体(a、b、c),1个p LL3.7慢病毒骨架质粒重组载体(p LL3.7-sh RNA)。通过对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的Zfx基因进行人为干扰后,提取总m RNA,利用q RT-PCR对Zfx基因m RNA表达进行丰度测定。结果表明:p SIREN质粒重组载体干扰组对Zfx基因没有明显地作用,慢病毒骨架质粒重组载体干扰组对Zfx基因表达抑制效果显著,抑制率为51%(P﹤0.05)。结论:筛选获得了慢病毒骨架质粒重组干扰载体,其对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的Zfx基因表达具有显著地干扰作用。; 郭玉强程波宁孟影贾斌杜军戚帅刘帅兵王绪海张永生韩国华; 关键词：ZFX RNAI 性别控制

细粒棘球蚴侵染哈萨克绵羊早期血清IgE、IgM的变化规律研究: 2017年; 为探讨细粒棘球蚴侵染哈萨克绵羊早期血清IgE、IgM的变化规律,对每只哈萨克绵羊人工口服包虫虫卵约10000~15000枚,共6只。在喂服前0h、喂服后6h、8h、10h颈静脉采血。应用ELISA方法检测绵羊血清中IgE、IgM水平。结果表明,血清中IgE在喂服后各时间段逐渐升高,但与喂服前(0h)比极显著下降(P<0.01);血清中IgM在喂服后各时间段与喂服前(0h)相比均显著升高(P<0.01),喂服后各时间段之间无显著变化。提示哈萨克绵羊在感染细粒棘球蚴早期过程中血清IgE升高、IgM降低这一变化规律可为临床上诊断该病提供一定的理论依据。; 李亚强蒋松王绪海李鑫袁方园张永生贾斌; 关键词：细粒棘球蚴血清 IGE IGM

RNAi干扰片段、干扰载体、制备方法及其应用: 本发明提供一种RNAi干扰片段、RNAi干扰载体、及RNAi干扰载体的制备方法及其应用，涉及生物技术领域。其中，一种RNAi干扰片段，用于干扰绵羊Y染色体上的Zfy基因，其特征在于，所述RNAi干扰片段序列为SEQ？ID...; 贾斌张永生王绪海申红; 文献传递

哺乳器: 本实用新型是关于一种哺乳器，涉及畜牧设备领域，解决的问题使其智能化的为羔羊哺乳。主要采用的技术方案为：哺乳器，其包括：哺乳间和供奶装置，哺乳间为正面开设有开口的容纳空间，开口的左侧和右侧分别设置有第一感应装置和有第二感应...; 张永生贾斌席继锋王绪海王香祖李超程李亚强袁方园; 文献传递

zfx基因的RNA干扰片段及其控制小鼠性别的应用: 本发明公开了针对zfx基因的RNA干扰片段，由其构建的载体，及其在控制小鼠子代性别中的应用。本发明的有益效果为：本发明提供的RNAi干扰片段，通过对雄性小鼠的生殖细胞X精子中的zfx基因进行沉默，阻碍、损伤或者破坏X精子...; 贾斌马军德申红惠文巧蒋松曾献存刘帅兵王绪海张永生李鑫; 文献传递

驴Zfy基因cDNA克隆及生物信息学分析被引量：6: 2018年; 本研究旨在对驴Zfy基因的cDNA序列进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中公布的家牛Zfy基因mRNA序列(登录号:NM_177491.1)设计特异性引物,运用RT-PCR技术获取驴Zfy基因的cDNA序列,并对Zfy基因CDS区核苷酸序列与蛋白质结构进行生物信息学分析。结果表明,驴Zfy基因CDS区序列长度为2 325bp,编码774个氨基酸;蛋白质二级结构预测结果显示,Zfy蛋白没有信号肽及跨膜结构;驴Zfy基因CDS区序列与家牛、绵羊、人、家猫、家犬、马鹿、黑猩猩、藏羚羊的同源性分别为92.9%、92.6%、91.8%、93.8%、92.5%、92.3%、91.6%和92.6%;对驴和其他8种哺乳动物Zfy基因CDS区核苷酸序列构建的系统进化树显示,驴与绵羊、藏羚羊、家牛、马鹿亲缘关系较近,与家犬和家猫的亲缘关系稍远,与人和黑猩猩亲缘关系最远。本研究成功克隆出驴Zfy基因CDS区序列,为进一步研究驴Zfy基因的功能奠定了基础。; 营瑞文张永生夏欢王香祖李超程王绪海席继锋贾斌; 关键词：克隆生物信息学

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