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新型基因工程干扰素受体结合域的改造及其生物活性测定被引量：7: 2002年; 目的　改造干扰素功能结合域 ,以提高干扰素的生物学活性。方法　在新型基因工程干扰素 (IFNα1c 86D)AB环内通过点突变技术引入 2个独立酶切位点EcoRⅤ和EstEⅡ ,用聚合酶链反应 (PCR)技术在干扰素cDNA水平对母体干扰素LoopAB的 31位甲硫氨酸换成天冬氨酸 (M D) ,32位天冬氨酸换成脯氨酸 (D P) ,将重组基因在大肠埃希菌中表达 ,用滤泡口炎病毒 (VSV) 人羊膜传代细胞 (WISH)系统检测抗病毒活性。用比色MTT实验检测抗增殖活性。结果　通过突变 ,31和 32位氨基酸获得重组突变体 31 32IFNα1c 86D ,经限制性内切酶图分析、DNA序列和抗病毒活性测定 ,初步表明 31 32IFNα1c 86D是母体干扰素IFNα1c 86D抗病毒活性的 8倍 ,抗增殖作用与母体干扰素相比差异无显著性。结论　改造干扰素受体结合域。; 胡荣马学军魏开坤王虹薛水星段招军侯云德钱振超; 关键词：干扰素Α 病毒抗体 DNA突变分析

人血小板生成素cDNA转染及表达产物对实验性血小板减少症的治疗作用: 1997年; 目的探讨将人血小板生成素（ｈＴＰＯ）ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞中及表达产物对实验性小鼠血小板减少症（卡铂诱导）的治疗作用。方法以哺乳动物表达载体ＰＣＩｎｅｏ为运载体，构建受控于ＳＶ４０早期启动子ｈＴＰＯｃＤＮＡ的表达载体，利用脂质体介导转染技术，将重组ＰＣＩｎｅｏ－ｈＴＰＯ表达载体转染ＣＯＳ－７细胞中，经Ｇ４１８作用后，对挑选阳性克隆ＣＯＳ－７细胞中ｈＴＰＯｃＤＮＡ和ｍＲＮＡ分别进行ＰＣＲ扩增Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测和斑点杂交鉴定；对转染ＣＯＳ－７细胞培养上清进行ｈＴＰＯＥＬＩＳＡ夹心法检测；应用ｈＴＰＯｃＤＮＡ转染的ＣＯＳ－７细胞表达产物对实验性小鼠血小板减少症进行腹腔注射。结果ｈＴＰＯｃＤＮＡ不仅可在ＣＯＳ－７细胞中获得表达，且分泌到细胞培养上清中，最高表达量为４８．２８ｎｇ／ｍｌ。实验组小鼠第１０天，骨髓巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＭＫ）集落数增加近３倍（Ｐ＜０．０１）。骨髓ＣＦＵ－ＭＫ以小集落数为主，巨核细胞体积增大（Ｐ＜０．０１）；外周血中血小板数保持在（８０±２６）×１０９／Ｌ，Ｐ＜０．０１。结论ｈＴＰＯｃＤＮＡ转染ＣＯＳ－７细胞中获得有效地表达，且表达的ｈＴＰＯ对实验性小鼠血小板减少症具?; 刘东旭尹华丽吴小林吴小林王虹魏文宁王虹王爱莲; 关键词：血小板生成素血小板减少症 CDNA转染

慢性粒细胞白血病患者血小板膜糖蛋白Ⅳ再分布和胞内凝血酶敏感蛋白的释放: 1997年; 目的：探讨慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者血小板膜糖蛋白Ⅳ（ＧＰⅣ）再分布和胞内凝血酶敏感蛋白（ＴＳＰ）释放及血浆中β－血小板球蛋白（β－ＴＧ）和血小板第４因子（ＰＦ４）对其的影响作用。方法：应用１２５Ｉ分别标记血小板ＧＰⅠｂ、ＧＰⅡｂ／Ⅲａ、ＧＰⅣ和ＴＳＰ单克隆抗体并结合放射免疫法检测ＣＭＬ患者血小板膜上相应的结合位点，同时观察β－ＴＧ和ＰＦ４的抑制作用。结果：（１）ＣＭＬ患者未活化和诱导活化（凝血酶１Ｕ／ｍｌ）血小板膜ＧＰⅣ分布和再分布分别为３６０８０±１７０１０、４４３２０±３２３１０抗体结合分子数／血小板，明显高于相应对照组（Ｐ＜０．０１），而血小板膜ＧＰⅠｂ和ＧＰⅡｂ／Ⅲａ则无异常分布；（２）ＣＭＬ患者血小板胞内ＴＳＰ释放并未伴随血小板膜ＧＰⅣ再分布而发生相应的增多；（３）ＣＭＬ患者血浆中β－ＴＧ和ＰＦ４含量增高（Ｐ＜０．０５），体外实验发现β－ＴＧ和ＰＦ４明显地抑制血小板胞内ＴＳＰ释放。结论：ＣＭＬ患者血小板膜ＧＰⅣ再分布增多，可能成为判断血小板功能异常指标之一；而血小板胞内ＴＳＰ释放障碍或结合下降，则受血浆中β－ＴＧ和ＰＦ４的影响。; 刘东旭沈迪沈迪吴小林邹萍吴小林王虹王虹杨锐魏文宁; 关键词：慢性白血病 CML 血小板膜

泌尿生殖道疾患与沙眼衣原体感染的相关性研究被引量：4: 1997年; 对155例慢性前列腺炎患者，52例非前列腺炎的其它泌尿生殖遣疾患和正常人对照；123例宫颈炎患者、52例正常育龄妇女对照，30例疗后复查患者，同时进行沙眼衣原体（Ct）PCR检测。结果显示：慢性前列腺炎患者的前列腺液Ct阳性率为27.1％（42／155），而且均为非细菌性前列腺炎，对照组皆为阴性，二者具有非常显著性差异。对53例在前列腺按摩前初始尿和尿道脱落的上皮细胞，PCR结果：9例仅前列腺液阳性，3例仅尿液阳性，3例前列腺液与尿液同时阳性．其余皆为阴性，这结果似可说明，前列腺液的Ct主要来源于前列腺并非来源于尿道。123例宫颈炎患者的宫颈分泌物Ct阳性率为31．7％（39／123）．52例正常育龄妇女，Ct阳性单为3．8％（2／52）．从显示的阳性率来看．二者具有非常显著性差异（P＜0．01）。30例PCR阳性的疗后复查患者Ct皆转为阴性。; 张月清周茉邵强张玉海林青王虹; 关键词：沙眼衣原体前列腺炎宫颈炎

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王虹

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