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小鼠胚胎生殖细胞系的建立及其印记状态: 2013年; 目的成功建立小鼠胚胎生殖细胞(EGCs)系,并初步分析小鼠胚胎生殖细胞的印记状态。方法建立交配后12.5d(12.5dpc)原始生殖细胞(PGCs)来源的小鼠EGCs,通过碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫荧光细胞化学、体内分化及体外分化等方法检测EGCs的多能性,并以小鼠胚胎干细胞(ESCs)为对照,应用Real-time PCR检测EGCs中与发育相关的Ins2、Lgf2、H19、Lgf2r等11个父源与母源印记基因的表达情况。结果成功建立小鼠EG细胞系,EGCs克隆AKP染色显示有高水平的AKP活性,免疫荧光细胞化学方法显示克隆表达小鼠ESCs多能性标记物Oct4及细胞表面标记SSEA-1。核型分析检测显示,小鼠EGCs为正常的40条染色体,体内可分化出3个胚层来源的组织,说明小鼠EGCs具有多能性;Real-time PCR结果显示EGCs的印记基因表达量显著高于ESCs。结论12.5dpc PGC来源的EGCs的印记基因处于擦除状态。; 胡静赵巧湜古艳丽白光宇吴稀雷蕾; 关键词：胚胎生殖细胞印记基因实时定量聚合酶链反应小鼠

Sin3A蛋白调节细胞功能综述被引量：2: 2015年; SIN3转录调控蛋白家族成员A(SIN3 transcription regulator family member A,Sin3A)包含许多蛋白质相互作用结构域,是一个多蛋白的转录共阻遏复合物的核心组分,通过结合该转录阻遏复合物中的组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)起到转录抑制的作用。Sin3A通过与不同的功能蛋白,如Mad(Max dimerization protein)-Max(MYC associated factor X)、Myc(Myelocytomatosis oncogene)、甲基Cp G结合蛋白2(Methyl Cp G binding protein 2,Mecp2)等相互作用,在细胞增殖、分化、凋亡,肿瘤的形成、细胞周期调控、植入前胚胎发育以及组织器官发育过程中扮演重要角色。近来有研究表明,Sin3A在体细胞重编程过程中显著上调,因此,Sin3A可能在体细胞重编程中也起到重要作用。; 张梓卉王振东白光宇张娜李彤雷蕾; 关键词：早期胚胎发育体细胞重编程

小鼠胚胎第一次细胞命运决定的分子调控机制: 2013年; 着床前小鼠的发育过程中,随着囊胚的形成,胚胎建立了两个不同的细胞系:滋养外胚层(TE)和内细胞团(ICM),且发生两次重要的命运选择。主要回顾了两个经典发育模式,即内外模式(inside-outsidemodel)和极性模式(polarity model),总结了TE和ICM第一次谱系分离过程中起关键作用的分子调控机制,并探讨了存在于卵裂球间的分子差异,对细胞极性、细胞命运和分子调节之间存在的复杂联系也进行了讨论。; 吴稀白光宇孙瑞珍李彤雷蕾; 关键词：内细胞团 CDX2 OCT4 HIPPO

多个胚胎聚合对小鼠孤雌胚胎干细胞印记基因表达影响的研究: ＜正＞小鼠孤雌胚胎干细（PgESCs）能作为种子细胞应用于细胞治疗,避开了伦理和道德的限制,但其建系效率低。课题组前期研究发现,两个8-cell时期小鼠孤雌胚胎聚合后培养至囊胚期分离内细胞团建立孤雌聚合胚胎干细胞（a2P...; 宋司航王振东单智焱孙瑞珍刘春佳吴嫣爽白光宇雷蕾; 文献传递

小鼠xist探针载体的构建及鉴定: 2015年; 目的构建xist探针载体并检验其合成出的探针效果。方法 B6D2F1 BAC(R3026)经PCR扩增获得xist基因,与双酶切的pSPT19质粒连接,经转化及测序鉴定pSPT19-xist载体构建成功。将构建好的pSPT19-xist载体线性化,并体外转录为RNA探针,应用荧光原位杂交检测雌性B6D2F1小鼠成纤维细胞内的xist表达。结果经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因xist条带。基因测序证实所检测重组质粒序列与xist基因序列完全一致。体外雌性小鼠成纤维细胞检测到xist阳性表达。结论成功构建xist基因pSPT19-xist重组质粒和RNA探针,并在成纤维细胞阳性表达。; 白光宇申景岭孙瑞珍雷蕾; 关键词：RNA探针成纤维细胞

GFP-Kdm6a表达载体的构建及鉴定: 2018年; 目的构建及鉴定GFP-Kdm6a表达载体。方法提取基因背景为B6D2F1的ES总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得Kdm6a基因,与双酶切的GFP-C1质粒连接,经转化及测序鉴定GFP-Kdm6a载体构建成功。将构建好的GFP-Kdm6a载体转染入293T细胞,检测载体的表达情况。结果经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因Kdm6a条带。基因测序证实所检测重组质粒序列与Kdm6a基因序列完全一致。经转染的293T细胞检测到GFP-Kdm6a表达。结论克隆B6D2F1鼠Kdm6a基因、获得成功GFP-Kdm6a重组质粒的构建,在293T细胞呈阳性表达。; 宋司航白光宇雷蕾

聚合孤雌囊胚移植后发育的研究: 孤雌生殖在生物界内普遍存在,但因其缺乏父源等位基因,在高等的哺乳动物却并不可行。有研究表明,通过聚合产生的孤雌囊胚而建立的孤雌干细胞系比单个孤雌囊胚建立的,在基因表达上更接近正常胚胎干细胞。那么,是否更多数量的孤雌胚胎聚...; 白光宇王振东吴稀雷蕾

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白光宇