白文涛
- 作品数：113 被引量：215H指数：8
- 供职机构：成都军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12单克隆抗体制备及初步鉴定
- 2006年
- 制备抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的单克隆抗体(mAb),为进一步研制布鲁菌检测方法和免疫制剂提供基础。常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗核糖体蛋白L7/L12的mAb,并用Westernblot和ELISA方法对其特异性、抗原识别表位及相对亲和力等做了初步鉴定。获得了4株抗L7/L12蛋白的mAb:1B1,2A2,2H9和2H10,相对亲和力为2A2>2H10>2H9>1B1,4株mAb识别的抗原表位相近,但仍存在一定的差异。得到的4株稳定的杂交瘤细胞系分泌的mAb能特异结合L7/L12蛋白。
- 司瑞徐志凯张芳琳白文涛吴兴安王海涛于澜胡刚
- 关键词：单克隆抗体
- 小鼠着床前胚胎miRNA表达的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的研究微小RNA（miRNA）在小鼠着床前胚胎各发育阶段的表达谱，探讨miRNA在着床前胚胎发育中的作用和意义。方法建立小鼠超排卵、交配和胚胎收集系统，采用miRNA扩增、miRNA芯片和荧光实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）的方法研究小鼠着床前胚胎miRNA表达。结果小鼠卵母细胞、2细胞胚胎、4～8细胞胚胎和囊胚分别表达55、53、62和72个miRNA；四个发育阶段共筛查到表达94个miRNA，32个在各发育阶段均表达，62个在不同发育阶段特异性表达。实时荧光定量PCR方法验证mmu-miR-721在小鼠着床前胚胎中表达。结论小鼠着床前胚胎表达大量的miRNA，其可能对胚胎发育和胚胎细胞的分化起重要调控作用。
- 杨艳红白文涛张亮尹国武王晓红王珺张平姚元庆
- 关键词：MIRNA小鼠胚胎基因调控
- 汉坦病毒嵌合基因G2S0.7与CTL多表位重组腺病毒的构建及免疫学分析
- 目的：构建含有汉坦病毒M基因(编码糖蛋白G2)和部分S基因(编码核蛋白主要抗原区段)以及S基因的多个CTL表位的多种重组腺病毒表达载体，并对这些重组腺病毒的免疫学特性进行研究。
方法：构建含目的基因的重组腺病毒...
- 胡刚白文涛吴兴安王海涛徐志凯张芳琳
- 关键词：汉坦病毒CTL表位免疫学分析
- 文献传递
- 大肠杆菌中融合表达汉滩病毒S,M基因片段的研究被引量：1
- 2002年
- 为在大肠杆菌中融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP含主要抗原位点的片段 .将汉滩病毒 76 118株S基因编码区 5′端约 0 .7kb的片段与M基因编码G1的片段连接 ,克隆入 pGEX 4T2 ,构建嵌合基因原核表达载体 pGEX 4T2 S 0 .7G1,在大肠杆菌XL1 Blue中诱导GST S0 .7G1融合蛋白的表达 .表达产物用ELISA和Westernblot进行鉴定 .限制性内切酶酶切鉴定证明 ,成功构建了嵌合原核表达载体 pGEX 4T2 S0 .7G1.经IPTG诱导后 ,ELISA活性测定结果表明 ,该融合蛋白可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合 .Westernblot结果显示 ,诱导出相对分子质量 (Mr)大于 1× 10 5的S0 .7G1与GST的融合蛋白 ,并有一系列大小不等的可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合的蛋白带 .获得具有特异性结合活性的融合蛋白GST S0 .7G1。
- 罗雯徐志凯张芳琳阎岩吴兴安刘勇白文涛王海涛
- 关键词：大肠杆菌汉滩病毒基因片段
- 汉坦病毒嵌合基因G2S0.7在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学研究被引量：5
- 2003年
- 在前期工作基础上,对汉坦病毒糖蛋白(GP)和核蛋白(NP)的嵌合基因G2S0.7表达产物的免疫学特性进行进一步的研究。将汉坦病毒含有G2S0.7嵌合基因的重组杆状病毒在昆虫细胞中融合表达并免疫BALB/c小鼠,用ELISA、微量细胞培养中和实验及淋巴细胞增殖实验检测免疫应答效果,以研究嵌合基因的免疫效果。结果表明,用该融合蛋白免疫小鼠,可诱导产生抗汉坦病毒NP及GP特异性的抗体,抗体效价分别为1∶3200及1∶200;同时融合蛋白还可刺激机体产生低水平的中和抗体和明确的淋巴细胞增殖反应。说明汉坦病毒G2S0.7嵌合基因表达的融合蛋白既可刺激机体产生特异性的抗汉坦病毒体液免疫应答,也可刺激机体产生特异性的细胞免疫应答,为进一步进行汉坦病毒基因工程疫苗的研究奠定了实验基础。
- 张芳琳刘勇白文涛吴兴安于澜史梦远胡刚王海涛徐志凯
- 关键词：汉坦病毒昆虫细胞
- 汉坦病毒糖蛋白G1酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定被引量：4
- 2003年
- 拟利用Ras募集系统RRS构建并鉴定含汉坦病毒囊膜糖蛋白G1的诱饵载体。将汉坦病毒76-118株囊膜糖蛋白G1基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G1及Ras-G1'(G1'无前导肽序列)。将两个嵌合基因克隆入酵母表达载体pMet25,并转染至酵母温度敏感株cdc25-2,检测其对RRS系统的激活作用。限制性内切酶酶切鉴定表明,Met-G1和Met-G1'载体构建正确。激活试验为阴性。说明Met-G1和Met-G1'载体可用于从cDNA文库中筛选汉坦病毒受体。
- 白文涛张芳琳徐志凯吴兴安于澜史梦远胡刚王海涛
- 关键词：汉坦病毒糖蛋白酵母双杂交
- 汉坦病毒囊膜糖蛋白G1基因重组腺病毒载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达被引量：2
- 2003年
- 拟构建汉坦病毒G1基因重组腺病毒载体并在VeroE6细胞中表达,为汉坦病毒基因疫苗的研究提供实验基础。PCR法从含汉坦病毒-76118株M基因的M56质粒扩增糖蛋白G1基因片段,利用穿梭质粒pShuttle,将其克隆入Adeno-X病毒DNA,获得重组腺病毒DNA,转染HEK293细胞,包装、扩增后得到汉坦病毒G1基因重组腺病毒原种,感染VeroE6细胞,用IFA法和ELISA法检测表达产物。得到了含汉坦病毒G1基因的重组腺病毒,其滴度约为1011pfu/ml,感染VeroE6细胞后检测到汉坦病毒糖蛋白G1的表达。
- 吴兴安张芳琳于澜史梦远白文涛胡刚刘勇王海涛徐志凯
- 关键词：汉坦病毒糖蛋白重组腺病毒
- 用siRNA抑制胃癌细胞AGS中COX-2表达及对AKT磷酸化的抑制
- 2006年
- 构建了可在真核细胞中表达针对COX-2基因的siRNA表达载体,并用胃腺癌细胞系AGS建立了COX-2siRNA的稳定转染细胞系。用Western-Blot检测稳定转染细胞系中COX-2的表达以及AKT的磷酸化水平。结果表明稳定转染COX-2siRNA的细胞中COX-2的表达较转染空载体的细胞明显降低,且发现COX-2表达的降低可抑制AKT-Ser473和Thr308的磷酸化水平。为进一步探索抑制COX-2对胃癌细胞生物学特性的影响,及其在肿瘤治疗中的作用奠定了基础。
- 刘艳丽闫岩白文涛张芳琳吴兴安张德新徐志凯
- 关键词：SIRNACOX-2AGS细胞
- 汉滩病毒结构蛋白昆虫细胞融合表达产物的免疫原性评价被引量：4
- 2002年
- 目的 研究汉滩病毒 (HTNV)囊膜糖蛋白G1与核蛋白 (NP)部分片段在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学特性 ,为HTNV基因工程疫苗的研制提供依据。方法 构建含有HTNVG1S0 .7嵌合基因的重组杆状病毒Bac G1S0 .7,用其感染的Sf9细胞免疫Balb c小鼠。用间接免疫荧光法、ELISA法、微量细胞培养中和试验及T淋巴细胞增殖试验对被免疫小鼠的体液免疫及细胞免疫应答效果进行检测。结果 Bac G1S0 .7感染的昆虫细胞免疫小鼠后 ,测得免疫鼠血清抗HTNV抗体滴度最高达 1∶3 2 0 0 ,含有特异性抗HTNVNP及抗HTNV糖蛋白G1的抗体 ,被免疫小鼠中有部分产生了较低滴度的中和抗体 ,免疫鼠脾细胞对HTNVNP或糖蛋白的增殖反应指数均高于阴性对照组。结论 G1S0 .7嵌合基因的昆虫细胞表达产物具有较好的免疫原性 。
- 罗雯徐志凯张芳琳阎岩吴兴安刘勇白文涛王海涛
- 关键词：汉滩病毒结构蛋白免疫原性肾综合征出血热
- 汉滩病毒核蛋白部分片段与囊膜糖蛋白G1在昆虫细胞中的融合表达被引量：1
- 2002年
- 目的 应用Bac -to -Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段。方法 构建含有汉滩病毒G1S0 7嵌合基因的杆状病毒表达载体 pFBD -G1S0 7,转化DH10Bac致敏菌 ,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上 ,快速筛选出含有G1S0 7嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达该融合蛋白 ,利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果 构建的含G1S0 7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,表达产物主要集中在细胞内。结论 在昆虫细胞中表达出具有生物学活性的G1S0 7融合蛋白 。
- 罗雯徐志凯阎岩吴兴安张芳琳刘勇白文涛王海涛
- 关键词：汉滩病毒杆状病毒昆虫细胞肾综合征出血热HFRS免疫学
