罗彦忠
- 作品数：7 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转基因抗虫、耐除草剂及品质改良复合性状玉米BBHTL8-1的分子特征及功能评价被引量：4
- 2022年
- 随着转基因作物的发展和推广,具有复合性状的转基因作物种植面积逐年增加。传统的转基因复合性状作物具有抗虫和耐除草剂性能,聚合其他性状的转基因作物培育逐渐受到重视。转基因玉米株系BBHTL8-1含有Cry1Ab、Cry3Bb、cp4epsps、ZmHPT和ZmTMT共5个基因表达框,外源插入片段位于玉米基因组第4染色体,插入基因区间,在3’侧翼序列有31 bp缺失。在BBHTL8-1中,这5个基因能够稳定遗传,在转录水平和蛋白水平上表达具有稳定性。BBHTL8-1高抗玉米螟,对草甘膦除草剂具有较高耐受性。BBHTL8-1籽粒中α-生育酚含量比非转基因对照郑58显著增加。BBHTL8-1与非转基因对照郑58在田间农艺性状方面无显著差异。因此,BBHTL8-1为转基因抗虫、耐除草剂和种子具有高α-生育酚含量的转基因新材料。
- 邹俊杰徐妙云张兰罗彦忠刘源刘源王磊
- 关键词：转基因玉米抗虫耐除草剂Α-生育酚分子特征
- 拟南芥DCL1启动子的分离及其表达特性分析被引量：3
- 2010年
- Dicer酶是类似于RNaseⅢ的核酸内切酶,能够特异性地将双链RNA剪切成约20nt的小RNA,在基因沉默途径中起到非常重要的作用。从拟南芥中分离出DCL1基因上游启动子序列2kb及DCL1基因的5′端1kb序列,构建了含有该启动子和GUS报告基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥,并对转基因植株进行GUS组织化学染色及荧光定量分析,结果表明,在DCL1基因启动子的驱动下,报告基因GUS主要在拟南芥的叶片中表达,在幼嫩的叶片及茎尖中表达量也比较高,茎中的表达量较低,在根中只有微量的表达。
- 李微微李川罗彦忠郁建平王磊
- 关键词：拟南芥基因沉默小RNA启动子GUS染色
- 滚环复制介导的发卡RNA(RMHR)文库构建系统
- 非编码的小RNA已在动物,植物,藻类以及真菌等多种真核生物中发现,它可在转录及转录后水平上调控基因的表达。小RNA主要包括小的干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和microRNA,二者均...
- 王磊罗彦忠张兰范云六
- 文献传递
- 拟南芥RNAi文库的构建及其突变体库的初步创制
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)在绝大多数生物中是一种非常保守的基因表达调控机制,在发育调控、基因组维持等方面发挥重要作用。RNAi是由双链RNA诱导的多步骤、多因子参与的过程,其中siRNA发挥...
- 罗彦忠
- 关键词：拟南芥SIRNA
- 文献传递
- 转基因玉米ZTAO5-1外源插入旁侧序列及其应用
- 本发明公开了一种转基因玉米ZTAO5‑1外源插入旁侧序列及其应用。所述旁侧序列的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明还提供了用于检测该旁侧序列的引物对，引物序列分别如SEQ I...
- 张兰王磊姚兴兰罗彦忠
- 文献传递
- 转phyA2、ZmTMT和Bar玉米的获得及其特性分析被引量：1
- 2020年
- 【目的】玉米是家禽和单胃动物饲料的主要原料,但玉米籽粒中高活性的α-生育酚含量较低,且籽粒中的磷主要是以植酸磷的形式存在,动物不能有效吸收利用,因此,饲料中需要添加化学合成的维生素E和无机磷或微生物来源的植酸酶以满足动物生长发育的需要,增加了饲料成本,同时又容易造成磷污染。通过转基因获得α-生育酚含量和植酸酶活性大量提高的玉米,为饲用玉米育种提供材料基础。【方法】构建含有3个基因表达盒的载体,采用农杆菌侵染的方法转化玉米,草铵膦作为筛选压力;通过喷施草铵膦和PCR鉴定的方法筛选转基因阳性植株,RT-PCR分析目的基因在转录水平的表达情况;Western blot分析目的基因在翻译水平上的表达情况,采用分光光度计测定转基因玉米籽粒中的植酸酶活性,利用HPLC测定籽粒中的维生素E含量,同时比较转基因株系与野生型在其他营养成分和农艺性状上的差异。【结果】构建了胚乳特异性启动子123387驱动的植酸酶基因phyA2表达盒、胚特异性启动子13387驱动的玉米γ-生育酚甲基转移酶基因ZmTMT表达盒以及组成型启动子CaMV35S驱动的草铵膦抗性基因Bar表达盒串联的植物表达载体;转化玉米获得转基因植株;喷施草铵膦和PCR鉴定得到阳性植株;经过多个世代回交转育,获得目标性状均较好的2个转基因纯合玉米株系TPB1和TPB2;RT-PCR和Western blot分析结果表明phyA2、ZmTMT和Bar在转基因玉米中显著高表达。植酸酶活性测定结果表明,转基因玉米籽粒中植酸酶活性达到10000-13000 U·kg^-1。维生素E含量测定结果表明,转基因玉米籽粒中90%以上的γ-生育酚转化为α-生育酚,α-生育酚的含量达到50-70 mg·kg^-1,α-三烯生育酚的含量也有明显增加。转基因玉米中的植酸酶活性和α-生育酚含量完全能够满足动物饲料的需要。转基因株系的农艺性状与野生型无显著差异,
- 姚兴兰杨文竹罗彦忠陈茹梅王磊张兰
- 关键词：玉米植酸酶维生素EΑ-生育酚
- RNA干扰(RNAi)文库研究进展被引量：3
- 2010年
- RNAi是由双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默现象,由dsRNA产生的小分子siRNA会导致生物体内同源转录产物特异性降解,是基因表达调控的重要方式之一。目前RNAi技术已发展成为遗传分析强有力的工具,在基因功能分析鉴定方面发挥越来越大的作用。构建大规模的RNAi文库进而转变成RNAi突变体库是功能基因组学研究的重要手段,因此如何利用简单经济的方法构建特定物种的高效RNAi文库就成为关键问题。综述了目前构建RNAi文库的不同方法以及每种构建方法的优点和存在的不足,为不同研究目的的RNAi文库的构建提供参考。
- 罗彦忠王磊
- 关键词：SIRNA基因沉默
