舒东
- 作品数：11 被引量：25H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大肠杆菌热敏肠毒素和耐热肠毒素基因融合及其免疫原性研究被引量：6
- 2000年
- 采用基因工程技术将编码大肠杆菌热敏肠毒素亚单位(LTB)基因和耐热肠毒素(ST)基因进行体外重组,得到的融合基因能在大肠杆菌中表达。重组菌株免疫动物后,均能诱发产生抗LT和抗ST抗体。实验结果表明,LT/ST融合蛋白不仅保持了LTB的免疫原性和与神经节苷酯GM1的结合能力,而且也赋予本来没有免疫原性的ST免疫原性,并极大地降低了ST的生物毒性,为构建理想的致腹泻大肠菌苗奠定了基础。
- 张兆山徐兵李淑琴舒东俞守义黄翠芬
- 关键词：大肠杆菌肠毒素基因融合免疫原性基因重组
- 大肠杆菌肠毒素的基因融合及其免疫原性的研究被引量：6
- 1999年
- 应用重组基因工程技术，将热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ）基因与含有部分前体的耐热肠毒素（ｐｒｏ－ＳＴ）基因融合在一起，构建了表达ＬＴ－Ｂ／ｐｒｏ－ＳＴ融合蛋白的重组质粒．该融合蛋白不仅保持结合神经节苷脂（ＧＭ１）的能力，而且具有热敏肠毒素和耐热肠毒素的抗原性．乳鼠实验证明，融合蛋白虽然含有野生耐热肠毒素，但不具耐热肠毒素的生物毒性．腹腔免疫和鼻饲免疫均能激发产生抗ＥＴＥＣ两种肠毒素的抗体．
- 徐兵张兆山李淑琴舒东俞守义黄翠芬
- 关键词：免疫原性大肠杆菌疫苗腹泻
- 鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低分子量尿激酶融合蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达被引量：1
- 1999年
- 目的：构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶融合基因，并在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中高效表达。方法：应用重组ＤＮＡ 技术，将编码尿激酶原信号肽的ＤＮＡ 片段，与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶基因融合在一起，并插入真核表达载体ｐＭＪＫ３ 中，构建成重组质粒ｐＭＪＫ３Ｄ。通过细胞电击穿孔法，将该重组质粒转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株（ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－ ）中，转染细胞经选择培养基筛选，并采用ＭＴＸ加压扩增培养。结果：得到了高效表达融合蛋白的细胞株，表达水平为３００ Ｕ／（１０６ 细胞·ｄ）。通过ＥＬＩＳＡ 和溶解圈方法鉴定，该融合蛋白可与Ｄ－二聚体结合，并具有激活纤溶酶原溶解纤维蛋白的活性。结论：成功构建并获得高效表达双功能融合蛋白的细胞株，为进一步研究这一双功能融合蛋白的体内外特异溶栓活性以及评价其作为新型导向溶栓制剂奠定了基础。
- 舒东俞炜源徐兵刘斌罗深秋
- 关键词：单链抗体尿激酶融合蛋白CHO细胞
- 鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体的构建
- 2001年
- 目的 构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体。方法 应用重组ＤＮＡ技 术，将人工合成的尿激酶原信号肽基因与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合基因连接，并保 证在同一阅读框架，然后分别插科到pcＤＮＡ３和ＰＭＪＫ３两种真核表达载体中。结果构建成可以在真核细胞中分泌表 达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的重组质粒pcＤＮＡ３－Ｄ１和ｐＭＪＫ３－Ｄ１。结论为建 立稳定分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的细胞工程株奠定了基础。
- 舒东徐兵俞炜源罗深秋
- 关键词：单链抗体基因融合纤维蛋白急性心肌梗死
- 大肠杆菌热敏肠毒素和耐热肠霉素基因融合及其免疫原性分析
- 1999年
- 徐兵李淑琴张兆山舒东俞守义黄翠芬
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因融合免疫原性
- 表达大肠杆菌LT-B/ST融合抗原的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建被引量：1
- 1998年
- 编码LT-B/ST融合抗原的基因插入pYA248载体中,构建了重组质粒pXZL66。该重组质粒转入无毒鼠伤寒沙门氏菌SR-11,ΔCya,Δcrp,Δasd菌株X4072。此无抗药性的杂合菌株X4072(pXZL66)表达的LT-B/ST融合抗原具有LT和ST抗原性而没有生物毒性,可望成为预防ETEC腹泻和相应的沙门氏菌病双价口服活疫苗候选株。
- 徐兵舒东张兆山李淑琴俞守义
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌鼠伤寒沙门氏菌
- 新型粘膜免疫佐剂候选株LTA~ˉB^+的构建被引量：3
- 2000年
- 目的 :产肠毒素大肠杆菌产生的不耐热肠毒素 (LT)不仅是很强的口服免疫原 ,而且其粘膜免疫佐剂作用显著。LT的毒性限制了它的直接使用 ,希望通过体外定点诱变技术 ,获得具有粘膜免疫佐剂作用的LT减毒株。方法 :以人源LT基因为研究对象 ,首先构建了重组质粒 pUC19 LT ,然后用单引物PCR法和重叠延伸PCR法分别构建了LTQ7和K63基因突变体。结果 :CHO细胞体外试验和家兔肠结扎体内试验毒性测定的结果表明 ,LT突变体K63的毒性明显降低。结论 :K63有希望成为候选的高效粘膜免疫佐剂。
- 程芳李淑琴舒东张兆山曹勇
- 关键词：不耐热肠毒素定点诱变突变体
- 鼠抗人纤维蛋白单链抗体-尿激酶杂合基因的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达被引量：1
- 1999年
- 采用 DNA重组技术构建了表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体与低分子量尿激酶融合基因的真核表达载体。通过磷酸钙共沉淀法 ,将该表达载体转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株 ( CHO- dhfr-)中 ,利用选择培养基筛选出稳定表达的细胞株 ,溶解圈法测定融合蛋白的表达水平为每 1 0 6细胞每天 5 8IU。该融合蛋白保留了与纤维蛋白的结合活性和溶解纤维蛋白的溶纤活性。SDS- PAGE,Western印迹法分析证明融合蛋白的相对分子质量约为 70× 1 0
- 舒东俞炜源赵志玲徐兵罗深秋
- 关键词：单链抗体融合蛋白
- 表达大肠杆菌 LT-B/pro-ST融合抗原的减毒鼠伤寒沙门菌株的构建被引量：4
- 1999年
- 目的：构建表达 Ｌ Ｔ Ｂ／ Ｓ Ｔ 融合蛋白的产肠毒素大肠杆菌口服活菌疫苗候选株。方法：编码 Ｌ Ｔ Ｂ／ Ｓ Ｔ 融合蛋白的基因插入ｐ Ｙ Ａ２４８ 载体中，构建了重组质粒 ｐ Ｘ Ｚ Ｌ６６。该重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌 Ｓ Ｒ１１，Δ Ｃｙａ， Δ Ｃｒｐ， Δ Ａｓｄ 菌株 Ｘ４０７２。结果：此无抗药性的杂合菌株 Ｘ４０７２（ｐ Ｘ Ｚ Ｌ６６） 表达的 Ｌ Ｔ Ｂ／ Ｓ Ｔ 融合蛋白具有耐热及不耐热肠毒素的免疫原性而没有可检出的生物毒性。结论：为研究预防产肠毒素大肠杆菌腹泻提供了口服活菌疫苗候选株。
- 徐兵张兆山李淑琴舒东俞守义黄翠芬
- 关键词：大肠杆菌伤寒沙门菌抗原
- 肠毒素大肠杆菌定居因子CS3和肠毒素融合抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的共表达(英文)被引量：1
- 2002年
- 不耐热肠毒素 (LT)和耐热肠毒素 (ST)是产肠毒素大肠杆菌的主要致病因素 ,CS3为该菌的优势定居因子 ,是定居因子CFA/II菌毛抗原的共有抗原组分。采用基因操作技术将编码CS3和融合肠毒素蛋白基因转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗候选株X4 0 72中进行表达。用重组菌株口服免疫小鼠后 ,免疫动物能产生抗CS3、LT和ST的血清抗体。特别有意义的是 ,所产生的抗ST抗体能中和天然ST的生物活性。
- 徐兵张兆山李淑琴舒东黄翠芬
