范冬梅
- 作品数：99 被引量：155H指数：6
- 供职机构：北京协和医学院血液病医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 抗人VEGF受体KDR胞外区域3血清的制备及生物活性被引量：3
- 2002年
- 目的:制备抗人VEGF受体KDR胞外区域3(KDR3)的血清,研究其阻断VEGF受体的作用。方法:采用6周龄雌性BALB/C小鼠将纯化的人VEGF受体II基因3区蛋白质与完全佐剂和不完全佐剂制成抗原乳剂,分3次注射,前2次为腹腔注射,第3次为静脉注射,待第3次静脉注射后7天摘眼球取血,静置凝固后取上层血清测抗血清的效价,用血管内皮细胞ECV3042×104/ml铺24孔板,加入VEGF的同时加入抗KDR中和抗体IMC-ICI和KDR3抗血清,从次日开始测定。结果:用Studentt-tes统计学方法处理显示,PBS对照组与非相关性血清组P>0.05,抗KDR中和抗体IMC-ICI组与KDR3抗血清组P>0.05,而VEGF组与非相关性血清组和KDR3抗血清组P<0.05。结论:VEGF对ECV304细胞有促增殖作用,而抗KDR中和抗体IMC-ICI和KDR3抗血清对ECV304细胞都表现出了对外源性VEGF有明显抑制作用,同时对内源性VEGF也有明显抑制作用。
- 邵晓枫熊冬生杨纯正刘嘉李容彭晖许元富范冬梅朱桢平
- 关键词：VEGF受体血清生物活性
- 3，4－二羟基苯甲醛的药物应用
- 本发明属于已知化学物质的药物应用，特别是3，4－二羟基苯甲醛的药物应用，具体是3，4－二羟基苯甲醛作为有效成分在制备治疗或预防肺部纤维化和治疗或预防肺间质水肿的药物中的应用，肺部纤维化和肺间质水肿是由严重急性呼吸道综合症...
- 杨纯正邵晓枫王彩云刘述文熊冬生彭晖齐静许元富杨铭范冬梅王金宏
- 文献传递
- 抗人乳腺癌细胞膜表面角蛋白CK8的单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的:建立针对多药耐药人乳腺癌细胞膜表面差异抗原的抗体库,并鉴定抗角蛋白CK8特异性的单克隆抗体。方法:采用细胞免疫和杂交瘤技术制备单克隆抗体库,经免疫沉淀得到抗原-抗体复合物,SDS-PAGE分离目的抗原,质谱测序,Western blot验证及激光共聚焦显微镜观察抗原分子的细胞膜定位。结果:成功筛选到稳定分泌抗CK8分子的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7F9)。结论:文中所研制的单克隆抗体具有与乳腺癌细胞膜表面CK8分子特异结合的活性,在上皮来源肿瘤标志物CK8的临床检测及CK8相关生物学活性研究中具有广泛应用前景。
- 刘芳邵晓枫王金宏范冬梅许元富杨铭杨纯正熊冬生
- 关键词：膜蛋白单克隆抗体
- 抗Pgp基因工程抗体ScFv的构建、表达及其活性测定被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建表达抗PgpScFv,进行体外活性的测定。方法 :利用RT PCR方法 ,克隆抗Pgp杂交瘤细胞PHMAO2的重链可变区基因 (VH) ,轻链可变区基因 (VL) ,拼接为单链抗体 (ScFv) ,再克隆到具有强启动子的PET2 8a(+)载体上进行表达 ,并进行了表达产物体外活性的测定。结果 :构建了表达质粒PET2 8a(+) ScFvPGP。表达产物可与表达Pgp抗原的K5 6 2 A0 2细胞特异性结合 ,并不抑制Pgp外排泵的功能。结论 :构建表达的抗PgpScFv只有针对Pgp抗原的识别功能 ,并无抑制作用 ,因此应用于人体后不会干扰正常细胞的排泄分泌功能 ,无论是作为靶向诊断治疗的载体还是作为双功能抗体的一臂 ,均具有广泛的应用前景。
- 高瀛岱熊冬生彭晖许元富邵晓枫范冬梅杨纯正
- 关键词：单克隆抗体SCFVP糖蛋白
- 抗KDR单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗KDR单克隆抗体Ycom1D3重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备用于血管新生疾病(尤其是肿瘤血管新生)的诊断和治疗药物中的应用。本发明制备的抗KDR Sc...
- 杨纯正李容熊冬生邵晓枫许元富彭晖杨铭王金宏纪庆范冬梅王彩云齐静
- 文献传递
- 5-氮杂-2'-脱氧胞苷对多药耐药MCF-7/ADR和KBV/200细胞增殖及细胞周期影响作用机制的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对肿瘤多药耐药细胞生长抑制率、细胞周期的影响及可能的作用机制。方法:采用MTT法检测5-Aza-dC对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR、口腔表皮癌多药耐药细胞KBV/200及其相应的亲本敏感MCF-7和KB细胞的生长抑制率;FCM法检测不同浓度5-Aza-dC(1、5和10μmol/L)作用72h及5-Aza-dC(10μmol/L)作用24、48和72h后,各细胞周期分布的变化;分别采用实时荧光定量-PCR及蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达情况。结果:5-Aza-dC对耐药细胞株MCF-7/ADR及KBV/200均呈现明显的生长抑制作用,细胞周期被阻滞在G2/M期,并呈时间及剂量依赖性;细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达均上调。结论:5-Aza-dC可以通过使MCF-7/ADR及KBV/200细胞的细胞周期被阻滞在G2/M期,从而抑制肿瘤多药耐药细胞的增殖;其作用机制可能与上调细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1的表达有关。
- 张梦楠范冬梅杨铭胡蕴慧李双静姜琳琳李真真张砚君熊冬生
- 关键词：口腔肿瘤脱氧胞苷细胞抑制剂细胞周期蛋白类
- 重组融合蛋白抗CD20Fab-LDM的构建、表达及体外活性研究被引量：4
- 2009年
- 目的构建和表达抗CD20Fab-LDP(力达霉素辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白抗CD20Fab-LDM(力达霉素),并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD20Fab-LDP融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用Western blot鉴定纯化产物;采用FACS方法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性;采用冷乙二醇法制备强化融合蛋白抗CD20Fab-LDM;采用MTT法鉴定抗CD20Fab-LDM对CD20+Raji细胞特异性的细胞毒作用。结果DNA序列测定结果表明抗CD20Fab-LDP融合蛋白已构建成功,可溶性表达产物的产量可达4mg.L-1以上,具有与Raji细胞(CD20+)结合的活性,与抗CD20Fab的亲合常数相当,抗CD20Fab-LDM体外能特异性杀伤Raji细胞,IC50值为0.9×10-10mol.L-1。结论成功地构建了抗CD20Fab-LDP融合蛋白,并获得可溶性高效表达,表达产物具有与相应靶抗原结合的活性,并成功制备了抗CD20Fab-LDM强化融合蛋白,体外能特异性杀伤CD20+的Raji细胞。
- 程昕杨铭范冬梅许元富周圆高瀛岱王金宏周园李巍熊冬生
- 关键词：CD20力达霉素基因工程抗体非霍奇金淋巴瘤生物毒素
- 抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的作用机制研究
- 高瀛岱朱祯平熊冬生杨铭范冬梅纪庆王彩云许元生姜文国
- 采用基因重组技术完成了抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的构建和高效表达，并证明抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体具有在体内外向细胞毒性T细胞杀伤耐药肿瘤细胞的活性，能有效延长荷瘤裸鼠的生存空间。
- 关键词：
- 关键词：双功能抗体抗CD3
- miR-106b～25基因簇增强乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞相关耐药性被引量：3
- 2013年
- 目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒性实验、耐药克隆形成实验、细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色对细胞的耐药状况进行评价;通过流式细胞术和实时定量PCR测定P-gp的表达;通过微球体(mammosphere)培养实验及对乙醛脱氢酶(ALDH1)活性的检测评价MCF-7-mirC肿瘤干细胞特性的变化。结果过表达miR-106b～25基因簇能帮助细胞更快脱离由阿霉素引起的细胞衰老状态,促进耐药克隆的生长。但是,miR-106b～25基因簇对P糖蛋白(P-gp)在mRNA和蛋白水平表达均无影响。对ALDH1的检测及mammo-sphere形成实验结果显示,过表达miR-106b～25基因簇能提高MCF-7细胞中肿瘤干细胞的比例。结论 miR-106b～25基因簇对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的调控不依赖于P-gp表达,至少与促进肿瘤干细胞特性有关。
- 胡蕴慧盛梦瑶张孝云李双静范冬梅熊冬生周圆
- 关键词：乳腺癌肿瘤干细胞肿瘤耐药细胞衰老P糖蛋白
- 基于抗体结构的抗肿瘤小分子模拟物研究
- 随着单克隆抗体技术的发展,越来越多单克隆抗体应用于肿瘤的临床治疗和诊断,由于单克隆抗体多为鼠源性抗体,在人体内易产生免疫反应,因此作为治疗剂其效果并不尽如人意.且单克隆抗体的分子量较大,肿瘤穿透能力较
- 赖增祖熊冬生许元富彭辉范冬梅邵晓枫
- 文献传递
