董杜鹃
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 供职机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 棉铃虫组织蛋白酶B酶原在毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2006年
- 棉铃虫组织蛋白酶B(Helicoverpa armigeraCathepsin B,HCB)属于半胱氨酸蛋白酶类,参与胚胎发育中卵黄蛋白水解供给胚胎发育的氨基酸。将HCB基因克隆到pPIC9K载体并转化毕赤酵母KM71菌株,经甲醇诱导,HCB表达并分泌到培养上清中。表达产物经SDS-PAGE测定分子量为38kDa,与HCB基因编码的蛋白质分子量一致。用HCB的特异性抗体检测表明重组表达产物为棉铃虫组织蛋白酶B,原位水解实验显示重组表达的蛋白酶具有蛋白水解活性,表明在毕赤酵母中表达了有活性的棉铃虫组织蛋白酶B,可用于组织蛋白酶B酶原活化机理研究及开发新蛋白酶产品。
- 董杜鹃扈进冬张新昌李子劲王金星赵小凡
- 关键词:毕赤酵母
- 棉铃虫组织蛋白酶B及前导肽的重组表达及性质研究
- 棉铃虫组织蛋白酶B参与胚胎发育中的卵黄蛋白水解过程,本实验室前期工作从棉铃虫卵巢中纯化到一种半胱氨酸蛋白酶,通过氨基酸序列分析鉴定为组织蛋白酶B。该蛋白酶具有高水解活性和广泛的底物水解能力,能够耐受1/%SDS和pH8....
- 董杜鹃
- 关键词:棉铃虫组织蛋白酶B迁移率SDS-PAGE
- 文献传递
- 组织蛋白酶B在棉铃虫个体发育过程中的表达及活性研究被引量:4
- 2005年
- 运用原位水解电泳、免疫印迹和免疫组织化学等方法系统研究了组织蛋白酶B(HCB)在棉铃虫个体发育过程中的表达及活性变化规律.研究显示,HCB的表达和活性随着胚胎发育的进行逐渐下降;整个幼虫阶段都没有HCB的表达和活性;整个蛹和成虫阶段虽然都有HCB的表达,但HCB的活性只能在发育晚期的蛹和成虫组织中检测到.这些现象表明,HCB的表达和活化属于翻译后控制,同时与棉铃虫的个体发育和组织分化有着密切的关系.
- 杨晓梅侯立静董杜鹃王金星赵小凡
- 关键词:组织蛋白酶B棉铃虫个体发育酶活性
- 棉铃虫变态时期差异表达基因的鉴定及真核起始因子5C基因克隆及性质研究
- 棉铃虫/(Helicoverpa armigera/)属于鳞翅目夜蛾科/(Lepidoptera Noctuidae/),在世界各地广泛分布,危害棉花、谷物、玉米、土豆、大豆、高粱和烟叶等农作物达上百种,往往造成巨大的经...
- 董杜鹃
- 关键词:棉铃虫抑制性消减杂交蜕皮变态
- 文献传递
- 棉铃虫组织蛋白酶B在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定被引量:1
- 2005年
- 以棉铃虫(helicoverpa armigera)组织蛋白酶B作外源基因重组构建克隆载体,自重组菌株HCB-DH10Bad、Histag-HCB-DH10Bac中提取穿梭质粒,脂质体法转染草地贪夜蛾卵巢细胞系Sf21细胞,转染液再感染细胞,收集感染3~4 d的上清液,提取芽生病毒的DNA,PCR法鉴定外源HCB基因,感染上清进行SDS-PAGE、Western-blotting、蛋白酶活性检测.结果:感染上清中的芽生病毒的DNA作模板扩增出预期的1 700bp片段,SDS-PAGE、Western-blotting检测均在28ku处有明显表达产物,且表达产物有蛋白水解活性.
- 邵红莲赵小凡董杜鹃扈进冬邵丁丁杨晓梅王金星
- 关键词:棉铃虫组织蛋白酶B转染