董越梅
- 作品数：13 被引量：178H指数：7
- 供职机构：中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 一种耐铵工程菌和含有这种工程菌的生物肥料
- 本发明涉及一种耐铵工程菌，日勾维肠杆菌(Enterobacter gergoviae)E7，保藏号为：CGMCC No.0511。本发明还涉及一种生物肥料，含有权利要求1所述的耐铵工程菌。
- 李久蒂李永兴董越梅安千里王继文匡柏健
- 文献传递
- 以GFP为标记用花粉管通道途径导入外源DNA被引量：44
- 1998年
- 绿色荧光蛋白(GFP)基因是新发现的可以在植物体内表达的新型报告基因.用花粉管通道法将pBIN35S-mGFP4质粒DNA导入棉花,经荧光显微镜及手持紫外灯检验和分子杂交验证,得到转基因幼胚和植株,从而为花粉管通道转基因方法的可行性提供了直接可靠的细胞及分子生物学证据.
- 黄国存董越梅孙敬三
- 关键词：GFP棉花外源DNA转基因技术
- 利用突变的绿色荧光蛋白基因为标记构建新型克隆载体被引量：7
- 1999年
- 将三位点替换突变的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ＿Ｓ６５Ｔ、Ｖ６８Ｌ、Ｓ７２Ａ）基因插入到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＸｂａⅠ和ＳａｃⅠ之间，构建为新型的克隆载体ｐＧｒｅｅｎＬＤ。此质粒载体在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达后使菌落在日光下呈现黄绿色，而在长波紫外光照射下呈现亮绿荧光，当外源ＤＮＡ片段插入该载体的多克隆位点使ｇｆｐ基因表达受阻时，转化的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落为白色。因此可以用Ｅ．ｃｏｌｉ菌落黄绿色／绿色荧光的消失作为检测指标来筛选含有重组质粒的克隆。
- 董越梅李久蒂朱至清
- 关键词：绿色荧光蛋白克隆GFP
- 利用GFP和抗性双类型标记监测联合固氮菌在玉米根际的定殖被引量：30
- 2000年
- 将来自质粒pKRP10、pKRP11和pKRP12的氯霉素、卡那霉素和四环素抗性基因分别插入质粒GFPmut2中gfp基因下游的PstI位点 ,得到gfp和不同抗性基因共存的重组质粒 ,转化Enterobactergergoviae 5 7- 7野生型菌株和耐铵工程菌E7后 ,得到既有抗生素抗性又在蓝光下呈现亮绿荧光的菌株 .用它们接种玉米后 ,利用这两种选择标记双重筛选重新分离到的细菌确定了接种菌在玉米幼苗根表面的定殖数目 ,同时用荧光显微镜观测了它们在玉米根表和土壤中的分布 .确证了GFP与抗生素抗性双标记定量环境中微生物的可靠性和GFP标记用于原位监测细菌分布的优越性 .图版 1图 1表 2参
- 董越梅安千里李久蒂朱至清
- 关键词：联合固氮菌GFP抗性
- 铵载体(Amt)研究进展被引量：7
- 2000年
- 铵载体是一类存在于细胞膜上分子量约为 48kDa的主动转运NH+4的载体。本文在简单介绍了铵载体的研究历史和铵载体与泌铵的相互关系后 ,阐述了在原核和真核生物中的铵载体基因的克隆及其基因表达调控的研究进展 ,探讨了铵载体存在的普遍性和它在氮代谢中的作用。
- 董越梅李久蒂朱至清
- 关键词：细胞膜
- 绿色荧光蛋白及其在植物研究中的应用被引量：56
- 1998年
- 绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）是海洋生物水母（Ａｅｑｕｏｒｅａｖｉｃｔｏｒｉａ）体内的一种发光蛋白，分子量２７ｋＤ，由２３８个氨基酸组成。该蛋白６５～６７位ＳｅｒＴｙｒＧｌｙ三种氨基酸环化加氧形成特殊的生色团结构。野生型ＧＦＰ发光较弱，而且ｇｆｐｃＤＮＡ含有隐蔽型剪切位点，而加工改造的ＧＦＰ在植物中能够正常表达并且加强了荧光信号。ＧＦＰ作为新的报告基因和遗传标记被广泛应用于植物研究之中。
- 黄国存朱生伟董越梅孙敬三
- 关键词：绿色荧光蛋白GFP基因植物
- 用共聚焦激光扫描显微镜观测GFP标记的内生固氮菌Klebsiella oxytoca SA2侵染水稻根被引量：31
- 2001年
- 用高效绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)突变体EGFPmut2的基因标记内生固氮菌———产酸克雷伯氏菌 (Klebsiellaoxytoca (Fl櫣ｇｇｅ)Lautrop)SA2 ,用标记菌接种限菌培养条件下生长的水稻 (OryzasativaL .)幼苗 ,在接种后 1、2、4、8、12、16和 2 1d ,用共聚焦激光扫描显微镜对水稻鲜根进行光学切片 ,显示了标记菌从水稻根成熟区表面向根内入侵的过程。定殖在根表面的标记菌主要从侧根伸出的位置侵入侧根皮层 ,从邻近发生侧根的位置进入内皮层和维管柱。SA2还能从初生根成熟区无侧根伸出的位置侵入皮层向维管柱迁移。SA2入侵水稻根引发了水稻根局部的过敏反应以阻滞细菌进一步入侵 ,表现为侵入根内的细菌周围的根细胞细胞壁变厚 ,在蓝光下发出很强的黄绿荧光。
- 安千里杨学健董越梅冯丽洁匡柏健李久蒂
- 关键词：侵染共聚焦激光扫描显微镜水稻根
- 联合固氮菌Enterobacter gergoviae 57-7氮代谢相关基因的克隆和泌氨工程菌的构建
- 从构建具有稳定泌氨能力的联合固氮工程菌的目的出发,首先构建Enterobacter gergoviae57-7(E57-7)基因文库并与所筛选的泌氨突变株进行遗传互补实验,得到可互补泌氨特性的克隆,经Southern杂交...
- 董越梅
- 关键词：谷氨酰胺合成酶基因绿色荧光蛋白基因
- 文献传递
- nifH-gfp表达载体的构建及其在Enterobacter gergoviae 57-7中的表达被引量：5
- 2000年
- 采用PCR技术 ,从GFPmut2中扩增得到三位点突变的报告基因gfpS65T、V68L、S72A片段 ,并将它和肺炎克氏杆菌(Klebsiellapneumoniae (Schr eter)Trevisan)M5a1的固氮酶结构基因nifH的启动子和其起始密码子相融合 ,获得nifH_gfp表达载体pMGFP2 ;再在pMGFP2上插入卡那霉素抗性基因 ,获得可在日勾维肠杆菌 (Enterobactergergoviae)5 7_7表达nifH_gfp的表达载体pMGFP2 .1。研究了此表达载体经转化E .gergoviae 5 7_7后 ,NH+ 4和氧对E .gergoviae5 7_7中nifH_gfp表达的影响。
- 王伟董越梅安千里刘祥林李久蒂
- 关键词：固氮酶基因表达氧碳源
- 一种耐铵工程菌和含有这种工程菌的生物肥料
- 本发明涉及一种耐铵工程菌,日勾维肠杆菌Enterobacter gergoviaeE7,保藏号为:CGMCC No.0511。本发明还涉及一种生物肥料,含有权利要求1所述的耐铵工程菌。
- 李久蒂李永兴董越梅安千里王继文匡柏健
- 文献传递
