蔚利纳
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：郑州市科技攻关计划项目河南省医学科技创新人才工程项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默核干因子基因表达对HL-60白血病细胞凋亡的影响被引量：10
- 2009年
- 本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子(nucleostemin,NS)基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA(NS-shRNA),以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干扰RNA转染HL-60细胞作对照,应用RT-PCR检测被转染的HL-60细胞NS-mRNA抑制效果,倒置显微镜下观察活体细胞形态变化,Wright-Giemsa染色观察细胞胞体和细胞核形态学变化,以流式细胞仪(FCM)和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)测定凋亡细胞数并计算凋亡阳性率。结果表明:HL-60细胞被NS-shRNA转染48小时后NS-mRNA阻断率达到74.94%,凋亡率分别为(25.32±3.06)%和(27.3±3.21)%,对照组仅(3.12±0.38)%和(3.30±1.52)%,转染组与对照组比较差异显著(p<0.01)。Wright-Giemsa染色显示细胞发生核碎裂并出现"凋亡小体"。结论:靶向沉默NS基因表达可诱发和促进HL-60白血病细胞发生凋亡,为NS基因作为恶性肿瘤治疗的候选靶基因奠定了理论基础。
- 岳保红蔚利纳王园园
- 关键词：核干因子细胞凋亡白血病HL-60细胞
- 核干细胞因子基因在HL-60白血病细胞诱导分化后的表达
- 目的检测核干细胞因子(Nucleostemin,NS)基因在HL-60白血病细胞诱导分化后的表达变化,探讨NS基因表达与细胞分化之间的关系以及与急性白血病发病存在的可能机制。方法:从NS基因的3个变异体中筛选出共同序列设...
- 岳保红张慧蔚利纳王园园尹惠卿刘帅
- 关键词：核干细胞因子诱导分化HL-60细胞
- 文献传递
- 沉默核干细胞因子基因对HL-60白血病细胞形态学和细胞化学影响的检测被引量：5
- 2009年
- 目的探讨体外沉默白血病细胞核干细胞因子(NS)基因转染后细胞形态学和细胞化学特征改变与细胞生物学行为的关系。方法体外合成NS特异性短发夹状RNA(shRNA)转染HL-60白血病细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法评价NS基因沉默和NS蛋白合成抑制效果,倒置显微镜观察活体细胞形态,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,血液分析仪测定细胞大小、粒度和均一性变化,髓过氧化物酶(MPO)、α-乙酸萘酯酶(α-NAE)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定反映细胞化学特征变化。结果沉默NS基因导致HL-60白血病细胞发生了形态学变化,细胞核和细胞质出现了进一步分化和成熟特征,Wright-Giemsa染色观察到细胞核碎裂现象,血液分析仪发现细胞变得大小不均并有较多核碎裂和无核的细胞碎片存在,细胞内定MPO、α-NAE酶活性和PAS反应增强。结论沉默NS基因表达能促使HL-60细胞进一步分化、成熟,细胞形态学和细胞化学特征发生相应改变,这些形态学变化可以作为研究细胞生物学行为改变的依据之一。
- 岳保红佘红纯王清霞刘帅王园园蔚利纳张功员张钦宪
- 关键词：核干细胞因子白血病细胞形态学细胞化学HL-60细胞
- Nucleostemin基因特异性短发夹状干扰RNA在裸鼠移植瘤模型体内的抗白血病作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹状干扰RNA(NS-shRNA)在裸鼠移植瘤模型体内的抗白血病作用。方法对数生长期HL-60细胞接种于裸鼠皮下使其致瘤并洗脱,体外传至第5代再次接种裸鼠,Transwell法验证HL-60细胞体外侵袭力,建立高致瘤性HL-60白血病细胞异种移植瘤裸鼠模型。腹腔注射体外合成的NS-shRNA脂质包裹体,观察治疗前后瘤体体积、重量的变化,组织切片、HE染色观察肿瘤细胞学改变,免疫组织化学检测瘤体细胞内NS蛋白含量,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(Tunel)检测细胞凋亡情况。结果制备的高致瘤性HL-60细胞使30只裸鼠均形成异种移植瘤,成瘤率为100%,瘤体大小均一。腹腔注射NS-shRNA脂质包裹体13天后,治疗组裸鼠移植瘤体积增长率为207.1%,阴性和空白对照组分别为497.1%和569.6%。治疗组瘤体重量为(1.18±0.27)g,阴性和空白对照组为(2.04±0.73)g和(2.35±0.41)g。切片观察治疗组有大量斑片状组织结构破坏,并出现"凋亡特征"样细胞改变。免疫组织化学检测治疗组移植瘤细胞NS蛋白阳性率和积分值分别为(71.59±1.80)%和(110.26±13.46),阴性对照组为(90.72±1.47)%和(195.11±9.71),空白对照组为(97.33±1.76)%和(220.93±16.54),与阴性和空白对照组相比,NS蛋白表达抑制率分别为43.5%和50.1%。Tunel法检测治疗组移植瘤内出现较多凋亡细胞。结论 NS-shRNA在裸鼠移植瘤模型体内具有抗白血病作用,其作用机制之一可能是通过下调NS表达诱发白血病细胞凋亡增加。
- 岳保红王园园蔚利纳付书贞阚全程
- 关键词：核干细胞因子裸鼠移植瘤白血病HL-60细胞
- 核干细胞因子特异性短发夹状干扰RNA（NS-shRNA）在裸鼠移植瘤模型体内的抗白血病作用
- ＜正＞目的:核干细胞因子（Nucleostemin,NS）是新近发现的仅表达于干细胞和肿瘤细胞的蛋白质,已分化细胞不表达,可能参与和维持干细胞和恶性肿瘤细胞自我更新和无限增殖,并使细胞停滞在不分化状态。本研究探讨核干细胞...
- 岳保红王园园蔚利纳付书贞刘帅毛红丽张钦宪
- 文献传递
- HL-60白血病细胞诱导分化后NS基因表达变化与NF-κB和CyclinD1、A关联性的研究
- 目的：
核干细胞因子/(nucleostemin,NS/)是2002年发现的与干细胞和肿瘤细胞增殖有关的一种p53结合蛋白,表达于干细胞和肿瘤细胞的核或核仁中,在细胞质中有低水平表达。NS蛋白在肿瘤细胞和干细...
- 蔚利纳
- 关键词：核干细胞因子诱导分化NFΚB
- 文献传递
