覃蒙斌
- 作品数：79 被引量：243H指数：9
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因芯片筛选ghrelin miRNA转染胰腺炎细胞模型后的差异表达基因被引量：4
- 2020年
- 背景:前期研究提示ghrelin在急性胰腺炎发病过程中发挥重要作用,但其机制尚不明确。目的:应用基因芯片技术筛选出ghrelin miRNA转染胰腺炎胰腺腺泡细胞后的差异表达基因。方法:以雨蛙肽构建胰腺炎胰腺腺泡细胞模型。将AR42J细胞分为ghrelin miRNA+雨蛙肽组、阴性对照+雨蛙肽组。提取细胞RNA,合成为ds-DNA,与大鼠全基因组基因芯片杂交、扫描、分析。筛选与炎症和钙通路相关的差异表达基因,并采用RT-PCR法对其中3个基因(Bcl-2、caspase-8、caspase-12)进行验证。结果:给予AR42J细胞ghrelin miRNA+雨蛙肽干预后,共筛选出2938个差异表达基因,其中1435个基因表达上调,1503个基因表达下调。与CAMP/Ca^2+信号通路相关的差异表达基因有60个,与炎症通路相关的差异表达基因有199个。RT-PCR结果表明,ghrelin miRNA+雨蛙肽组Bcl-2、caspase-12表达下调,caspase-8表达上调,与基因芯片筛查结果一致。结论:基因芯片技术可筛选出ghrelin miRNA转染胰腺炎胰腺腺泡细胞过程中发挥关键作用的基因,从而为研究内源性ghrelin对胰腺炎胰腺腺泡细胞的作用机制提供依据和参考。
- 唐曦平张露艺梁志海覃蒙斌唐国都
- 关键词：基因芯片胃促生长素微RNAS
- 褪黑素对急性坏死性胰腺炎合并肾损伤的保护作用及机制研究
- 2011年
- 急性肾功能衰竭是重症急性胰腺炎（sAP）患者早期病死的主要原因之一。因此研究其发病机制并寻求有效的防治措施具有重要的临床价值。Ghrelin是生长激素促分泌物受体的内源性配体，它在急性胰腺炎（AP）发生发展中具有抑制炎症的作用。本研究应用褪黑素干预急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠，观察肾组织Ghrelin和NF—κBp65表达及肾组织中氧化应激相关指标的变化，探讨褪黑素对肾损伤的作用机制。
- 杨慧莹唐国都苏娟覃蒙斌梁志海钟卫一
- 关键词：急性坏死性胰腺炎褪黑素肾损伤GHRELIN内源性配体
- 高甘油三酯血症对大鼠急性胰腺炎模型中胰腺导管上皮细胞间紧密连接的影响研究被引量：1
- 2022年
- 目的研究高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)对大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型胰腺组织细胞间紧密连接(tight junctions,TJs)的影响。方法48只4周龄雄性SD大鼠随机分成普通饲养组(24只)和高脂饲养组(24只),4周后普通饲养组随机分为C组和AP组,高脂饲养组随机分为HTG组和高甘油三酯血症急性胰腺炎(HTGP)组。AP组和HTGP组经腹腔注射雨蛙肽建立AP模型,C组和HTG组经腹腔注射同等剂量的生理盐水,分别于造模24 h、48 h处置大鼠,采用HE染色法观察胰腺病理改变,免疫组织化学法检测胰腺组织中TJs蛋白脂解刺激脂蛋白受体(LSR)、Tricellulin蛋白(TRIC)、ZO-1、occludin、claudin-7定位及表达,透射电镜观察胰腺导管上皮细胞间TJs变化情况。结果高脂饲养组的大鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)较普通饲养组明显升高(P<0.05);HTG组胰腺组织病理评分高于C组(P<0.05),相同时点HTGP组胰腺组织病理评分高于AP组,但差异无统计学意义(P>0.05);HTG组LSR、TRIC表达显著低于C组(P<0.05),AP组和HTGP组的24 h时点LSR、TRIC、occludin、claudin-7表达均低于相应对照组(P<0.05),HTGP组24 h时点LSR和TRIC的表达显著低于AP组的对应时点(P<0.05);透射电镜观察AP组和HTGP组的24 h时点,发现主胰管上皮细胞TJs较C组和HTG组减少、细胞间隙增宽,且HTGP组比AP组的细胞间隙增宽更明显。结论TJs蛋白LSR、TRIC、ZO-1、occludin、claudin-7在HTG及HTGP大鼠胰腺组织中表达较非高脂模型下降,其中以三细胞间紧密连接(tricellular tight junctions,tTJs)蛋白LSR及TRIC下降明显,提示HTG可能减弱胰腺组织的tTJs,进而加重胰腺组织损伤。
- 吴青王洁谢金莲杨慧莹覃颖颖韦碧薇梁志海覃蒙斌
- 关键词：急性胰腺炎高甘油三酯血症
- 急性坏死性胰腺炎大鼠Ghrelin表达的变化及GHRP-2对其的影响被引量：2
- 2014年
- 重症急性胰腺炎（server acute pancreatitis,SAP）患者早期病情变化迅速、病死率高,虽然近年SAP的治疗手段有很大进步,但寻找早期干预疾病进程、减少疾病重症化仍是本领域的研究热点之一.生长激素释放肽-2（growthhormone releasing peptides,GHRP-2）是ghrelin受体激动剂,它可以减轻肝脏炎症、急性肺损伤,而且外源性ghrelin对急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）的炎症反应有抑制作用,但内源性ghrelin与AP发病机制的关系未明确.本研究观察GHRP-2干预急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）大鼠后内源性ghrelin表达的变化.
- 梁志海唐国都方春芸覃蒙斌
- 关键词：急性坏死性胰腺炎GHRELINGHRELIN重症急性胰腺炎生长激素释放肽早期干预
- 鞘氨醇激酶1通过调控黏着斑激酶和黏附分子的表达促进结肠癌细胞的增殖和侵袭被引量：4
- 2013年
- 目的探讨鞘氨醇激酶1（SphKl）对人结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭、迁移、黏着斑激酶（FAK）通路以及细胞间黏附分子1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子1（VCAM-1）的影响。方法采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐（PMA）和N，N-二甲基鞘氨醇（DMS）诱导和抑制人结肠癌LoVo细胞SphKl的活性，放射自显影法检测SphKl的活性，四甲基偶氮唑蓝（M-TT）法检测细胞的增殖活性，Boyden小室观察细胞迁移和侵袭能力的变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）测定可溶性ICAM-1（sICAM-1）和可溶性VCAM-1（sVCAM-1）浓度，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测FAK、ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达，Westernblot法检测FAK和磷酸化FAK（p-FAK）蛋白的表达。结果PMA和DMS能分别显著地诱导和抑制SphKl活性，PMA呈时间一剂量依赖性促进细胞的增殖，而DMS则呈时间一剂量依赖性抑制细胞的增殖。PMA和DMS处理24h后，对照组、PMA组和DMS组迁移细胞数分别为（75．48±6．12）个、（143．36±8．73）个和（38．574-3．24）个，侵袭细胞数分别为（64．19±5．36）个、（118．46±6．25）个和（32．48±4．27）个，与对照组比较，PMA组迁移和侵袭细胞数明显增多，DMS组则显著减少（均P〈0．01）。对照组、PMA组和DMS组的FAKmRNA相对表达水平分别为0．42±0．04、0．82±0．06和0．23±0．02，ICAM．1mRNA的相对表达水平分别为0．49±0．06、0．74±0．05和0．26±0．03，VCAM-1mRNA的相对表达水平分别为0．69±0．04、0．89±0．09和0．37±0．04，与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。对照组、PMA组和DMS组的FAK蛋白相对表达水平分别为0．34±0．04、0．52±0．06和0．20±0．03，p-FAK蛋白相对表达水平分别为0．37±0．05、0．51±0．06和0．09±0．02，与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。sICAM-1和sVCAM-1浓度随着SphKl活性的增强而升高，随着SphKl活�
- 刘诗权苏颖洁黄杰安覃蒙斌唐国都
- 关键词：结肠肿瘤黏着斑激酶细胞黏附分子细胞侵袭
- miR-125b参与TRAF6影响的人胰腺导管上皮屏障作用被引量：3
- 2021年
- 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对人胰腺导管上皮细胞系HPDE6C7屏障的影响,以及miR-125b与TRAF6的靶向结合关系。方法用重组慢病毒感染上调HPDE6C7细胞的TRAF6表达。Western blot检测核因子κB(NF-κB)通路蛋白和紧密连接蛋白occludin和claudin-1的表达量;Transwell小室法检测单层HPDE6C7细胞的异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)透过率以评估上皮屏障功能;双荧光素酶报告基因实验检测miR-125b与TRAF6是否存在靶向结合关系。结果经重组慢病毒感染并上调TRAF6基因表达后,HPDE6C7细胞的NF-κB p65、TAK1和TAB1蛋白表达水平上升(P<0.05),occludin和claudin-1蛋白表达水平下降(P<0.05),单层细胞通透率明显上升(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实TRAF6与miR-125b靶向结合。结论TRAF6通过调控NF-κB信号通路影响胰腺导管上皮屏障功能;miR-125b可能通过与TRAF6靶向结合抑制该作用。
- 韦碧薇龚雅慧苏州杨慧莹覃蒙斌梁志海
- 葡聚糖硫酸钠诱导慢性溃疡性结肠炎小鼠模型的建立及评价被引量：10
- 2019年
- 目的:评价不同浓度葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠慢性溃疡性结肠炎(UC)的稳定性。方法:将雌性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组、2.0%DSS组、2.5%DSS组和3.0%DSS组。正常对照组自由饮水,2.0%DSS组、2.5%DSS组、2.5%DSS组小鼠分别灌胃给予2.0%DSS、2.5%DSS、3.0%DSS溶液3个周期(即第1～5、第11～15、第21～25天,其余时间给予蒸馏水,共30d)。计算小鼠疾病活动指数(DAI)。第30天处死小鼠,取结肠组织,进行苏木精—伊红(HE)染色,计算组织学评分。结果:2.0%DSS组、2.5%DSS组和3.0%DSS组均有明显的UC临床表现和病理学改变,组织学评分均高于正常对照组(P<0.01)。与正常对照组比较,2.0%DSS组、2.5%DSS组和3.0%DSS组造模后第2天DAI评分上升,第6天DAI评分最高,之后逐渐下降;第10天又逐渐上升,至第14天开始下降,至第20天时接近正常水平;第20天后再次上升,至第24天开始下降(P<0.05)。结论:2.0%DSS、2.5%DSS、3.0%DSS均能成功诱导慢性UC小鼠模型,以2.5%DSS小鼠死亡率低,模型稳定性较好。
- 赵闪闪黄雪覃蒙斌张君红刘莹井洁蓝华
- 关键词：溃疡性结肠炎小鼠模型葡聚糖硫酸钠疾病活动指数
- MOB3B在结直肠癌中的表达及其与生存预后的关系
- 2023年
- 目的 探讨MOB3B在结直肠癌中的表达及其与生存预后的关系。方法 通过数据库分析MOB3B在结直肠癌组织与癌旁正常组织中的表达及其与生存预后的关系。通过免疫组化、qPCR实验检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织中MOB3B的表达情况,以及通过qPCR实验检测结直肠癌细胞(RKO、HT29、HCT116、SW480、SW620、DLD1、Caco2)和人正常结直肠黏膜细胞(FHC)中MOB3B mRNA的表达。结果 GEO数据库的4个数据集的分析结果显示,MOB3B在结直肠癌组织中的表达均低于癌旁正常组织(均P<0.05)。GEPIA在线分析结果显示,MOB3B在结肠癌组织、直肠癌组织中的表达均低于各对应癌旁正常组织(均P<0.05)。OS、DFS生存曲线结果显示,在结直肠癌中,MOB3B相对低表达的患者的OS、DFS均短于MOB3B相对高表达的患者(均P<0.05)。免疫组化实验结果显示,MOB3B在结直肠癌组织中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05)。qPCR实验结果显示,MOB3B mRNA在结直肠癌组织中的表达低于癌旁正常组织,在结直肠癌细胞中的表达均低于人正常结直肠黏膜细胞(均P<0.05)。结论 MOB3B在结直肠癌中低表达,且其低表达可能与结直肠癌的不良预后相关。
- 孙娟张金秀廖存程若溪吴晴茹陈秋玲杨丹覃蒙斌黄杰安
- 关键词：结直肠癌生存预后
- E-cadherin、β-catenin、MLCK在高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎早期大鼠模型中的表达及意义被引量：7
- 2018年
- 目的探讨E-cadherin、β-catenin、肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)蛋白在高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎(hypertriglyceridemia associated acute pancreatitis,HTGP)早期大鼠模型中的表达及意义。方法 144只雄性SD大鼠随机分为普通饲料组(48只),高脂饲料组(96只),喂养4周,普通饲料组随机分为2个亚组:N组、ANP组,高脂饲料组随机分为4个亚组:HTG组、HTGP组、HTG+ML-7组、HTGP+ML-7组。N组、HTG组、HTG+ML-7组为假手术组,ANP组、HTGP组、HTGP+ML-7组通过十二指肠乳头逆行胆胰管注射质量浓度为40 g/L的牛黄胆酸钠建立急性坏死性胰腺炎模型,并于造模后3、6、12 h处死大鼠,应用HE染色观察胰腺形态学的变化,检测血清淀粉酶含量,免疫组织化学技术检测胰腺组织E-cadherin、β-catenin及MLCK蛋白的定位及表达。结果高脂饲料组与普通饲料组相比,TG水平含量显著升高(P <0. 01); HTGP、HTGP+ML-7组胰腺病理评分明显高于ANP组(P <0. 05);同时点造模组血清AMY相比,差异无统计学意义(P> 0. 05);同时点造模组血清Ca2+比较,差异无统计学意义(P> 0. 05); HTGP组与ANP组各时点相比,E-cadherin、β-catenin、MLCK蛋白含量显著升高(P <0. 05); E-cadherin、β-catenin、MLCK分别与胰腺病理评分呈正相关(r1=0. 644,r2=0. 474,r3=0. 685,P <0. 05);经MLCK抑制剂ML-7干预的HTGP+ML-7组胰腺损伤程度较HTGP组下降(P <0. 05),E-cadherin、β-catenin、MLCK蛋白表达减少(P <0. 05)。结论 E-cadherin、β-catenin及MLCK在急性坏死性胰腺炎早期表达升高,同时点HTGP组较ANP组升高明显,MLCK可能改变细胞间的黏附连接参与HTGP的形成。
- 韦宇乐唐国都梁志海覃蒙斌符洪宗覃凌燕韦珍平
- 关键词：急性坏死性胰腺炎肌球蛋白轻链激酶
- Ghrelin在重症急性胰腺炎并发肾损伤中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Ghrelin在重症急性胰腺炎(SAP)并肾损伤中的作用以及外源性褪黑素对其的影响。方法 72只大鼠随机分为对照组(C组,n=24)、SAP组(A组,n=24)和褪黑素干预组(M组,n=24)。A组分3次腹腔内注射6%L-精氨酸(L-Arg)1.5g·kg-1·次-1建立SAP模型;C组同法注射等量生理盐水;M组于首次注射L-Arg前0.5h腹腔内注射1%褪黑素50μg/kg。各实验组大鼠于末次腹腔内注射后6h、12h和24h分批处死。光镜下对胰腺和肾组织进行病理学评分,用血清淀粉酶试剂盒测定血清淀粉酶,用ELISA检测血清IL-6,应用RT-PCR检测肾脏Ghrelin及NF-κB p65mRNA表达。结果 A组各时点胰腺及肾脏病理评分、血清淀粉酶及IL-6、肾脏NF-κB p65mRNA表达均较C组显著升高(P<0.05),而同时点Ghrelin mRNA表达较C组明显降低(P<0.05);M组各时点胰腺及肾脏病理评分、血清淀粉酶及IL-6、肾脏NF-κB p65mRNA表达均较A组显著降低(P<0.05),而同时点Ghrelin mRNA表达较A组升高(P<0.05)。结论 Ghrelin在急性胰腺炎并肾损伤时的表达可能与病变严重程度有关。外源性褪黑素可能通过抑制NF-κB p65的表达而减轻急性胰腺炎并肾损伤,并可能使Ghrelin在肾脏中表达增多。
- 杨慧莹苏娟唐国都覃蒙斌梁志海钟卫一
- 关键词：胰腺炎肾损伤GHRELIN核因子-ΚBP65褪黑素
