许涛
- 作品数：18 被引量：43H指数：4
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 塞来昔布延缓Han：SPRD大鼠肾衰竭进展的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的通过观察塞来昔布（CXB）对常染色体显性多囊肾病（ADPKD）动物模型Han：SPRD大鼠的作用，从而研究CXB延缓肾衰竭进展的机制。方法选取3周龄杂合（cy／＋）Han：SPRD大鼠共57只，随机分成3组（每组19只）进行实验。按照CXB在饲料中的含量分为对照组（0mg·kg^-1·d^-1）、小剂量组（3mg·kg^-1·d^-1）和大剂量组（10mg·kg^-1·d^-1）。在大鼠4、6、8、10、12和16周龄时测定血清BUN、Scr。ELISA法检测16周龄大鼠血浆6-酮前列腺素F1α（6-keto—PGF-1α）和血栓烷B2（TXB2）的含量。实时荧光定量PCR法检测大鼠肾组织肿瘤坏死因子α（TNF—α）的mRNA水平。免疫荧光共聚焦显微镜检测TNF—α和环氧化酶2（COX-2）的蛋白表达。Western印迹检测16周龄大鼠TNF—α的蛋白表达量。结果对照组BUN、Scr持续升高，分别于6、8周龄时即大于正常范围；至16周龄时，BUN为（26．56±9．19）mmol／L，Scr为（95．08±67．54）μmol／L；CXB小剂量组和大剂量组均能减缓BUN、Scr上升速度，减小其上升幅度。16周龄大鼠CXB小剂量组血浆中6-keto—PGF-α和TXB2[（1831．68±233．31）ng／L和（156．62±9．29）ng／L1和大剂量组两者的含量[（1148．57±105.80）ng／L和（157．87±10．16）ng／L]均显著低于对照组[（2792．26±830．48）ng／L和（248．88±93．72）ng／L]（均P〈0．05）。实时荧光定量PCR结果示，16周龄大鼠肾组织小剂量组和大剂量组TNF—α mRNA水平均显著低于对照组（均P〈0．05）。免疫荧光共聚焦显微镜显示，对照组TNF-α和COX-2在小管间质区高表达，小剂量组和大剂量组荧光强度显著减弱。与对照组比较，CXB小剂量组和大剂量组大鼠肾组织蛋白表达量显著减少，差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论CXB可能通过抑制COX-2的活性，阻止膜磷脂释放花生四烯酸代谢产物6-keto—PGF-1α和TXB2，减少炎性因子TNF-α的含量，正�
- 许涛王素霞叶朝阳梅长林
- 关键词：多囊肾常染色体显性6-酮前列腺素F1Α血栓烷B2塞来昔布
- 妊娠时肾脏损害临床和肾组织病理变化的分析研究被引量：9
- 2002年
- 目的：为探讨妊娠致肾脏损害的临床特点及病理特征。方法：对５２例妊娠致肾脏损害住院病人进行了临床和肾活检病理的分析研究。结果：５２例终止妊娠 ３个月后仍有蛋白尿，合并肾功能不全者 ２８例（５３．８５％），肾活检免疫病理示ＩｇＧ ３４例、ＩｇＡ ３８例、ＩｇＭ ２８例及Ｃ３４０例肾小球血管袢及系膜区沉积；病理表现系膜增生性肾炎３４例、膜增生性肾炎１０例、局灶节段性肾小球硬化６例、膜性肾病２例，５２例中合并小球硬化者３０例（５７．６９％）；胎儿死亡４０例（７５．４７％）。结论：妊娠激发了免疫反应导致肾脏病变是肾小球疾病发病机制之一，积极诊治该类病人是临床不可忽视的问题。
- 张爱平王艳侠丁尧海张颖伟郭云珊涂晓文许涛陈海英
- 关键词：妊娠病理学
- Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：4
- 2005年
- 摘 要 目的:观察Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞 (HKC)凋亡的影响,探讨Cyr61在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)发病中的作用及机制。 方法:RT PCR扩增Cyr61基因全长,构建pcDNA3. 1 +Cyr61重组质粒,转染并筛选获得稳定转染pcDNA3. 1+Cyr61的HKC细胞。经RT PCR、Northern、Westernblot鉴定转染细胞系基因的整合及表达。对空白HKC、空质粒pcDNA3. 1转染的HKC、Cyr61转染的HKC和囊肿衬里上皮细胞去血清培养 72h后,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Westernblot检测磷酸化Akt和Bad含量。 结果:构建了pcDNA3. 1+Cyr61重组质粒并获得稳定转染该质粒的HKC细胞。空白HKC与质粒pcDNA3. 1转染组之间上述指标无显著差异(P>0 05),Cyr61基因转染组与空白组、pcDNA3. 1转染组相比,凋亡指数显著降低 (P<0. 01),磷酸化Akt和磷酸化Bad含量显著增高 (P<0 .01 ),Cyr61基因转染组与囊肿衬里上皮细胞之间上述指标无显著差异 (P>0. 05);在Cyr61抗体存在下,Cyr61基因转染组的上述指标与空白组无显著差异 (P>0 .05 )。 结论:过表达Cyr61的HKC对去血清诱导的凋亡特性与囊肿衬里上皮细胞相似,过表达的Cyr61可能通过自分泌途径,促进Akt和Bad磷酸化,抑制细胞凋亡,参与ADPKD囊肿形成和发展。
- 沈学飞梅长林张岩赵海丹刘亚伟戴兵王文靖许涛
- 关键词：PCDNA3凋亡基因过表达囊肿衬里上皮细胞肾小管上皮细胞ADPKD
- 妊娠致肾脏损害特点临床和肾活检病理的研究被引量：2
- 2001年
- 目的 为探讨妊娠致肾脏损害的临床特点及病理特征。方法 对 46例妊娠致肾脏损害住院患者进行了临床和肾活检病理的分析研究。结果 46例终止妊娠 3个月后仍有蛋白尿 ,合并肾功能不全者 2 6例 ( 56 .52 % ) ,肾活检免疫病理示 Ig G32例 ,Ig A36例 ,Ig M2 8例及 C338例肾小球血管袢及系膜区沉积 ;病理表现系膜增生性肾炎 2 8例、膜增生性肾炎 1 0例、局灶节段性肾小球硬化 6例、膜性肾病 2例 ,46例中合并小球硬化者 2 8例 ;胎儿死亡 36例 ( 76 .6 0 % )。结论 妊娠激发了免疫反应导致肾脏病变是肾小球疾病发病机制之一 ,积极诊治该类患者是临床不可忽视的问题。
- 张爱平王艳侠丁尧海张颖伟郭云珊涂晓文许涛陈海英
- 关键词：妊娠妊娠并发症
- 塞来昔布诱导多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡的实验研究被引量：7
- 2006年
- 目的通过观察特异性环氧酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib,CXB)诱导人多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡,初步探讨该药诱导细胞凋亡的作用机制。方法(1)原代培养囊肿衬里上皮细胞,分为对照组、CXB组,采用Brdu法检测细胞增殖状态。(2)应用透射电镜观察细胞超微结构。(3)TUNEL法检测细胞凋亡及凋亡率。(4)应用AnnexinV+流式细胞术检测CXB诱导细胞凋亡及凋亡率。(5)应用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果(1)Brdu结果显示,CXB能抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞的增殖,在24～72 h,浓度为(0．25～2)×10^(-5) mol/L的范围内呈时间和剂量依赖性。(2)电镜下可见细胞核浓缩、染色质聚集、胞浆空泡化、凋亡小体出现、沟裂和裸核形成等典型凋亡征象。(3)TUNEL法显示,对照组细胞凋亡率为(2．8±0．2)%,2×10^(-5) mol/L CXB作用24、48 h细胞凋亡率为(28．5±1．6)%和(48．5±1．2)%,两者差异有统计学意义(P＜0．05)。(4)AnnexinV+流式细胞仪法结果显示,不同浓度(0．5、1、2×10^(-5) mol/L)CXB处理24 h凋亡率分别为(7．15±0．11)%、(7．76±0．08)%和(12．15±0．07)%,显著高于无血清对照组(3 15±0．05)%；不同浓度CXB处理48 h的凋亡率分别为(18．36±0．17)%、(24．87±0．25)%和(53．66±0．32)%,显著高于无血清对照组(13．53±0．21)%,组间差异均有统计学意义(P均＜0．01)。(5) Western印迹结果显示,随CXB作用时间延长,Bcl-2的表达逐渐减弱而Bax的表达逐渐增强,Bcl-2/Bax的比值逐渐减少。结论塞来昔布呈时间和剂量依赖性抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,通过下调Bcl-2,上调Bax,减少Bcl-2/Bax的比值诱导细胞凋亡。本研究结果为将CXB用于治疗常染色体显性多囊肾病提供了实验依据。
- 许涛梅长林曲巍叶朝阳付莉莉蔡厚安李丹
- 关键词：多囊肾常染色体显性凋亡塞来昔布
- 罗格列酮与塞来昔布联合治疗Han:SPRD大鼠的实验研究
- 目的常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种以双肾出现无数液性囊泡为主要特征的疾病。该病发病率为1／1000-2／ 1000,是人...
- 陈舜杰梅长林许涛戴兵熊锡山
- 文献传递
- 常染色体显性多囊肾病患者与正常成人尿液的定量比较蛋白质组学分析被引量：6
- 2005年
- 目的搜索常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者与正常成人尿液蛋白质组中有丰度差异的蛋白质成分。方法制备ADPKD患者(PKD1突变)及正常成人尿液蛋白组样品,同位素编码的亲和力标签法标记蛋白质、筛选被标记肽段,二维液相色谱-串联质谱法分离鉴定被标记肽段,从而鉴定蛋白质。通过计算两同位素试剂标记的相同肽段指纹峰面积比,寻找有丰度差异的蛋白质。根据被鉴定肽段的可信度,从鉴定出的蛋白质中选出6种,免疫印迹法验证其在两尿液蛋白组样品中的丰度差异。结果两尿液蛋白质组共鉴定出尿蛋白质106种, ADPKD患者尿液中水平较正常上调者48种,下调者45种。其中多囊蛋白1、肝细胞生长因子、单核细胞趋化蛋白3及孕激素受体等5种蛋白丰度差异为免疫印迹所证实。结论包括多囊蛋白1在内的多种蛋白质成分在ADPKD患者尿液中丰度发生改变,差异蛋白包括生长因子、凋亡调节蛋白、细胞外基质成分、受体、参与胞浆运输的蛋白质、酶类、细胞信号蛋白、转录因子及转录调节因子等,这些蛋白质信息可能为寻找与ADPKD发病相关的蛋白提供部分实验依据。
- 张岩梅长林喻峰沈学飞黄音刘亚伟赵海丹戴兵周玉坤戎殳许涛华振浩
- 关键词：比较蛋白质组肾病患者ADPKD细胞外基质成分凋亡调节蛋白
- 塞来昔布通过抑制COX-2活性抑制Han：SPRD大鼠肾囊肿生长被引量：2
- 2009年
- 目的:观察塞来昔布(celecoxib,CXB)对常染色体显性遗传性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)模型Han:SPRD大鼠肾囊肿生长的作用,探讨其可能的作用机制。方法:3周龄杂合(cy/+)Han:SPRD大鼠随机分成3组(n=19):小剂量(3mg·kg-1.d-1)、大剂量(10mg·kg-1.d-1)CXB作用组及空白对照组。大鼠饲养至16周龄,称取体质量(TBW)及双肾质量(2K),计算2K/TBW;取肾组织行H-E染色及特殊染色,观察肾间质炎细胞浸润程度,测定囊肿指数、纤维化指数;采用免疫荧光共聚焦扫描法检测肾组织环氧化酶(COX)-2、增殖细胞核抗原(PCNA)共染的荧光斑表达丰度,采用Western印迹法检测肾组织COX-2、PCNA蛋白表达量。结果:小剂量CXB作用组大鼠2K/TBW低于空白对照组,差异有统计学意义[(1.10±0.009)%vs(1.33±0.02)%,P<0.05]。与空白对照组相比,小剂量、大剂量CXB作用组大鼠肾间质炎细胞浸润程度评分减轻[(2.6±0.26)、(2.8±0.31)vs(3.7±0.33),P<0.05],肾囊肿指数[(42.9±6.56)、(47.1±7.28)vs(64.8±6.71)]、纤维化指数[(11.2±2.63)、(10.1±3.30)vs(16.3±4.16)]明显降低(P<0.05)。小剂量CXB作用组大鼠肾组织COX-2、PCNA共染的荧光斑强度较空白对照组明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,小剂量、大剂量CXB作用组大鼠肾组织COX-2[(0.326±0.011)、(0.409±0.008)vs(0.814±0.012),P<0.05]、PCNA表达量明显降低[(0.763±0.051)、(0.925±0.042)vs(0.988±0.031),P<0.05]。结论:3、10mg·kg-1.d-1塞来昔布可能通过抑制COX-2活性,减轻炎细胞浸润而发挥抑制Han:SPRD大鼠肾囊肿生长的作用。
- 许涛王素霞叶朝阳梅长林
- 关键词：塞来昔布环氧化酶2常染色体显性多囊肾囊肿
- IL-4对IL-1β诱导的大鼠系膜细胞增殖的抑制作用观察被引量：1
- 2005年
- 目的观察IL4对IL1β诱导的大鼠系膜细胞增殖过程中前列腺素E2(PGE2)的释放及环氧化酶2(COX2)mRNA和蛋白表达的抑制作用,探讨IL4抗肾小球硬化的机制。方法采用体外培养的大鼠系膜细胞(MC),MTT法检测IL1β促系膜细胞增殖的时效和量效关系,设立空白对照组、IL1β组、IL4+IL1β组、NS398组、NS398+IL1β组、吲哚美辛组、吲哚美辛+IL1β组,采用酶联免疫吸附法检测各组MC培养上清中PGE2的含量,应用RT PCR和Westernblot检测各组COX1和COX2mRNA及蛋白表达水平。结果IL1β在12、24、48h,浓度为0.1～100ng/ml时均有促MC增殖的作用,其中以孵育24h、浓度为2ng/ml时作用最强。IL4、NS398、吲哚美辛均能抑制IL1β诱导MC产生PGE2,IL4的抑制作用(抑制率84.9%)强于NS398(抑制率56.5%),吲哚美辛(抑制率41.2%)的抑制作用最弱。RT PCR和Westernblot显示IL4和NS398均能明显抑制COX2mRNA和蛋白的表达,吲哚美辛能抑制COX1和COX2mRNA及蛋白表达,但对COX2的抑制作用较弱。结论IL4能显著抑制IL1β诱导的系膜细胞增殖,下调COX2的表达,减少PGE2的产生,从而发挥抗肾小球硬化的作用。
- 许涛叶朝阳梅长林孙田美沈学飞付文成
- 关键词：肾小球硬化症病灶性地诺前列酮IL-4IL-1Β系膜细胞细胞增殖
- ZNF262在常染色体显性多囊肾病患者肾组织中的表达及意义
- 2006年
- 目的:检测锌指蛋白262(ZNF262)在正常肾组织及不同发病阶段多囊肾组织中的表达,并以增殖细胞核抗原(PCNA)为对照,初步探讨ZNF262在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)中的作用。方法:根据肾小球滤过率(GFR)大小对ADPKD(n=8)进行分期,观察其影像学、常规病理检查结果,采用半定量RT-PCR方法检测人正常肾组织(n=8)、早期多囊肾组织(n=4)、晚期多囊肾组织(n=4)中ZNF262和PCNA的表达,并对上述组织中ZNF262和PCNA的表达进行相关性分析。结果:与正常肾组织相比,ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾组织中的表达均显著增多(P<0.01),且晚期多囊肾组织表达高于早期多囊肾组织(P<0.05)。ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾及正常肾组织中的表达存在显著的相关性(r1=0.842 6,r2=0.902 1,r3=0.883 5,均P<0.05)。结论:与正常组织相比,ZNF262不仅在ADPKD高表达,并且随着病程进展表达逐步增高,这与PCNA的表达具有显著的相关性。提示ZNF262可以作为检测ADPKD的指标,并有助于临床进展分期的判别。
- 王素霞王丽刘亚伟付莉莉许涛梅长林
- 关键词：增殖细胞核抗原
