谭帅
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 犬同种异体脱钙骨基质复合骨髓基质干细胞片层与内皮祖细胞的体外培养被引量：1
- 2010年
- 目的:观察犬骨髓基质干细胞(bone marrow stroma stem cells,BMSCs)细胞片层及内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)上的生长情况,探讨利用其复合体构建功能性血管化组织工程骨的可行性。方法:应用细胞片层技术制备BMSCs细胞片层,培养犬内皮祖细胞,制备犬同种异体DBM。将DBM分别与BMSCs细胞片层、内皮祖细胞复合。测量DBM孔隙率,倒置相差显微镜、扫描电镜下观察DBM的结构及BMSCs细胞片层、EPCs在DBM上的附着、生长情况。结果:成功构建DBM/BMSCs细胞片层、DBM/EPCs复合体,BMSCs细胞片层、EPCs在DBM上的附着、生长状况良好,增殖迅速。结论:DBM/BMSCs细胞片层、DBM/EPCs复合体能够为生成具有骨样结构的组织工程骨提供良好的条件,并为组织工程骨的血管化创造有利的环境。
- 谭帅李宁毅荆恒高振华陈立强
- 关键词：脱钙骨基质内皮祖细胞
- 犬骨髓间充质干细胞片层的体外培养与制备被引量：1
- 2010年
- 背景:传统的组织工程方法在收获和转移细胞方面存在诸多不足,且难以形成致密的组织,明显限制了组织工程学的发展。目的:探讨犬骨髓间充质干细胞片层的体外培养与制备方法。方法:实验犬麻醉后抽取骨髓,采用密度梯度离心法体外分离骨髓间充质干细胞。取传至第4代细胞,按1×109L-1密度接种于直径3.5cm的温度反应性培养皿中,置于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱内培养,待细胞增殖融合时再将培养皿的温度降至20℃培养20min,倒置显微镜下观察细胞形态学变化及细胞片层形成情况。结果与结论:犬骨髓间充质干细胞原代培养24h呈椭圆形或多角形,72h多数细胞伸展贴壁,7d时形成细胞集落,12d时细胞呈长梭形,完全融合,细胞界限不清。温度反应性培养皿中的骨髓间充质干细胞在降温至20℃时,细胞形态发生变化,呈短梭形,且逐步从培养皿底分离,形成含细胞外基质的完整的细胞片层。证实密度梯度离心法可成功分离培养犬骨髓间充质干细胞,通过改变应用温度反应性培养皿的温度,能获取完整的细胞片层。
- 荆恒谭帅高振华陈立强李宁毅
- 关键词：骨组织工程骨髓间充质干细胞
- 骨髓基质干细胞的体外培养及其细胞片层制备被引量：10
- 2010年
- 目的探讨犬骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外培养及成骨向诱导后细胞片层的制备方法。方法密度梯度离心法分离培养犬BMSCs,向成骨细胞方向诱导分化后,倒置相差显微镜和扫描电镜下进行形态学观察;将诱导后的BMSCs接种至温度反应性培养皿中,37℃、5%CO2饱和湿度培养,然后降温至20℃制备BMSCs的细胞片层。结果原代培养的BMSCs呈长梭形,漩涡状生长;向成骨细胞诱导后的BMSCs呈卵圆形或多角形,当温度降至20℃时,BMSCs从温度反应性培养皿上完全脱落。扫描电镜下观察可见到富含细胞外基质的完整BMSCs细胞片层。结论应用密度梯度离心法可有效获取BMSCs,并向成骨细胞诱导分化;应用温度反应性培养皿能获取完整的BMSCs细胞片层可包裹支架,并用于功能性成骨。
- 荆恒李宁毅谭帅高振华陈立强
- 关键词：骨髓基质干细胞
- 应用细胞片层技术构建组织工程骨被引量：2
- 2011年
- 背景:传统的骨组织工程学在收获和转移细胞方面仍存在诸多不足,细胞片层技术是收获种子细胞和对种子细胞进行转移的一项新技术。目的:应用细胞片层技术与传统骨组织工程相结合的方法构建组织工程骨。方法:密度梯度离心法分离培养犬骨髓间充质干细胞,诱导其向成骨细胞分化。将诱导后的骨髓间充质干细胞接种至温度反应性培养皿中,先37℃饱和湿度培养,然后降温至20℃制备细胞片层;将犬脱钙骨基质/富血小板血浆/骨髓间充质干细胞细胞片层/骨髓间充质干细胞复合体植入犬左侧背阔肌下,术后4,8,12周,观察成骨情况。结果与结论:当温度降至20℃时,骨髓间充质干细胞从温度反应性培养皿上完全脱落,形成细胞片层,将其覆盖于犬脱钙骨基质/富血小板血浆/骨髓间充质干细胞后植入犬背阔肌下,其成骨效果明显好于不加细胞片层对照侧。说明应用细胞片层技术与传统的骨组织工程方法相结合可构建出较理想的组织工程骨。
- 陈涛王艳辉卜令学荆恒高振华谭帅王玲玲李宁毅
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨细胞骨组织工程
- 犬同种异体脱钙骨基质复合细胞片层的体外培养与观察(英文)被引量：2
- 2010年
- 背景:如何构建具有类似天然骨结构组织工程骨的问题是组织工程学发展的一个难题。细胞片层技术的出现,为其提供了新的途径。目的:观察细胞片层与脱钙骨基质的生物相容性及其在脱钙骨基质上的生长情况。设计、时间及地点:体外观察性实验,于2009-06/2009-09在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。材料:利用温度感应培养基制备犬骨髓基质细胞片层;脱脂、脱钙、脱非胶原蛋白方法制备犬脱钙骨基质。方法:将温度感应技术制备刮取的细胞片层铺盖于脱钙骨基质表面,用含体积分数为10%胎牛血清及成骨诱导剂的DMEM培养液浸没培养。主要观察指标:扫描电镜下观察脱钙骨基质的结构及细胞片层在脱钙骨基质上的附着、生长情况。计算脱钙骨基质孔隙率和孔径大小。结果:扫描电镜下观察可见脱钙骨基质呈三维立体网孔结构。材料孔隙率约为75%。平均孔隙直径为(250.11±98.89)μm,成正态性分布。扫描电镜下观察细胞片层在脱钙骨基质上的附着、生长状况良好,增殖迅速。结论:细胞片层与脱钙骨基质有较好的生物相容性,脱钙骨基质/细胞片层复合体能够应用于组织工程骨,为构建类似骨结构组织工程骨起到促进作用。
- 谭帅荆恒高振华李宁毅
- 关键词：脱钙骨基质生物材料
- 骨髓基质干细胞片层的制备及其在组织工程骨中应用的初步研究被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)片层(cell sheet)的制备方法,并观察其在实验犬体内构建组织工程骨时的成骨作用。方法:密度梯度离心法获取实验犬骨髓基质干细胞,经成骨诱导培养后,利用温度感应性培养皿(temperature-responsive culture dish)制备细胞片层后在体外包裹犬同种异体脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM),相差显微镜和扫描电镜观察细胞及片层形态;将复合体植入实验犬背阔肌筋膜下,组织学方法观察术后组织工程骨的骨形成情况。结果:细胞片层成功制备,并与支架材料复合良好,术后16周组织学显示形成类似板层骨的致密骨组织。结论:利用温度反应性培养皿可成功制备BMSC细胞片层,细胞片层包裹支架材料后在实验动物体内可形成具有类似板层骨结构的组织工程骨。
- 高振华李宁毅刘凤芝荆恒谭帅姚如永
- 关键词：骨髓基质干细胞骨组织工程
