赵国屏
- 作品数:2 被引量:9H指数:1
- 供职机构:上海科学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 不同临床阶段乙型肝炎患者外周CD8^+T淋巴细胞免疫记忆应答水平的比较被引量:1
- 2013年
- 目的比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎初治和慢性乙型肝炎后肝硬化患者CD8^+T淋巴细胞在数量和免疫记忆应答水平上的差异。方法收集上海交通大学医学院附属第三人民医院2012年6月至2012年12月期间住院HBV感染患者共40例,既往均未进行抗病毒治疗。通过流式细胞术(FCM)和酶联免疫标记法(Elispot)检测患者CD8^+T淋巴细胞的免疫应答。结果不同类型乙型肝炎患者外周CD8^+记忆性T淋巴细胞在数量和应答水平上都呈现出不同的格局:和正常人群相比,三个不同阶段乙型肝炎患者外周未致敏CD8^+T淋巴细胞的比例均显著降低,而CD45RA^-CD8^+记忆/活化型T淋巴细胞的比例则显著增高,而且在肝硬化阶段未致敏淋巴细胞比例降低更为明显,记忆/活化淋巴细胞比例升高更为明显;和慢性乙型肝炎初治患者相比,肝硬化阶段外周CD8^+T淋巴细胞不仅在数量上显著减少,同时在功能上也呈现低反应性,其分泌IFN-γ的能力也基本丧失。结论乙型肝炎发展至肝硬化阶段,大多数外周CD8^+T淋巴细胞具有向记忆/活化型细胞分化的趋势;在免疫清除阶段,患者CD8^+T淋巴细胞或是记忆CD8^+T淋巴细胞仍然具有一定的有效应答能力,当发展至肝硬化阶段,则CD8^+T淋巴细胞功能明显降低。这种细胞功能的丧失与病毒清除能力减低及疾病的慢性化进展可能存在一定关联。因此,提高慢性乙型肝炎患者中免疫记忆/活化型CD8^+T淋巴细胞的比例和功能可能成为延缓HBV慢性感染导致的肝硬化和肝衰竭的策略之一。
- 王晶慧吴标黄玲王登宇王树军王佳琦赵琳张勇沈浩赵国屏许洁王颖
- 关键词:乙型病毒性肝炎抗感染免疫
- 抗H5N1禽流感病毒VHH抗体库的构建被引量:8
- 2011年
- 目的:构建抗H5N1禽流感病毒的小羊驼免疫噬菌体重链可变区抗体库(VHH型抗体库),为抗H5N1的VHH抗体筛选奠定基础。方法:利用H5N1灭活疫苗免疫小羊驼,一定免疫时间后测定小羊驼外周血清中抗体中和活性,分离其外周淋巴细胞,利用RT-PCR方法得到VHH抗体片段。通过优化连接和电转化方法,将足量VHH片段与pCANTAB5E连接后电转入大肠杆菌TG1,获得VHH抗体基因库;检测基因库库容以及多样性,并采用血凝抑制试验对噬菌体抗体库进行初步功能性鉴定。结果:利用H5N1灭活疫苗免疫小羊驼四次后,其外周血清中抗体血清抑制效价可达1∶2 560,构建的VHH抗体基因库库容可达3×108,随机挑选14个抗体基因克隆进行测序鉴定,结果显示均为独立克隆,表明所建抗体库多样性好。上述基因库经辅助噬菌体拯救后,得到抗H5N1的噬菌体VHH型抗体初级库,对初级库进行血凝抑制试验,结果呈阳性,表明初级库中存在具有潜在中和活性的抗H5N1抗体。结论:结果表明,已成功构建抗H5N1禽流感病毒的小羊驼免疫噬菌体重链抗体库,为进一步筛选抗H5N1禽流感的重链抗体打下良好基础,并为H5N1的早期临床诊断和治疗提供新的手段。
- 严安孙冰玉夏立亮吴标包文静车小燕孙志伟金维荣赵国屏熊慧王颖
- 关键词:H5N1噬菌体抗体库禽流感病毒