赵春燕
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：山西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室更多>>
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- 亚硫酸钠对HL-7702细胞极低密度脂蛋白组装分泌和内质网应激的影响
- 2016年
- 目的:研究亚硫酸钠(Na_2SO_3)是否通过抑制极低密度脂蛋白(VLDL)组装分泌和诱导内质网应激引起肝细胞脂肪变性。方法:分别经不同浓度(0.1、0.5、2.5、10 mmol/L)Na_2SO_3染毒人正常HL-7702肝细胞24和48 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和Western blot测定细胞外VLDL水平;采用荧光定量PCR法(qPCR)检测VLDL组装相关因子微粒体载脂蛋白B100(apoB100)、甘油三酯转移蛋白(MTP)、二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)、甘油三酯水解酶(TGH)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测内质网应激相关重链结合蛋白(BiP)和钙连蛋白(Calnexin)的表达水平。结果:ELISA和Western blot结果显示染毒24 h后,与阴性对照组相比,各Na_2SO_3处理组VLDL含量均明显增加,差异均有统计学意义(P均<0.05);而作用48 h后,各Na_2SO_3处理组VLDL含量与阴性对照组相比均无明显变化(P均>0.05)。qPCR检测结果显示,与阴性对照组相比,染毒24 h,10mmol/L Na_2SO_3组肝细胞内apoB100mRNA表达升高(P<0.05);2.5和10 mmol/L Na_2SO_3可使肝细胞内TGH mRNA表达升高(P<0.05);染毒48 h,0.5和2.5 mmol/L Na_2SO_3引起肝细胞内TGH mRNA表达量明显升高(P<0.05)。Western blot结果显示染毒24 h和48h后,不同浓度Na_2SO_3对细胞内BiP蛋白表达水平均无明显影响,但可以明显增加Calnexin蛋白表达(P<0.05)。结论:Na_2SO_3不能抑制VLDL组装分泌,但可能对肝细胞糖蛋白的正确折叠有一定干扰作用。
- 张艳白剑英雷佩玉王幼萍赵春燕梁瑞峰
- 关键词：亚硫酸钠内质网应激肝细胞
- 亚硫酸钠引起肝细胞内活性氧增高对p53蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的：探讨亚硫酸钠引起肝细胞内活性氧水平变化与p53蛋白表达之间的关系。方法：将人正常二倍体肝细胞株HL-7702培养于含10％小牛血清的DMEM培养基中，待生长至适宜密度时用不同浓度亚硫酸钠染毒4h。采用Fluo-3AM钙离子荧光指示剂法测定肝细胞内Ca^2＋。水平变化，二氯荧光黄双乙酸酯荧光标记法测定肝细胞内活性氧水平，蛋白杂交法和免疫细胞化学法检测肝细胞内p53蛋白表达情况，RT-PCR法检测肝细胞内p53基因mRNA表达水平的变化。结果：一定浓度的亚硫酸钠可引起肝细胞内Ca^2＋水平增加，并伴随着活性氧水平增加和肝细胞内p53蛋白表达水平明显增加，但p53基因mRNA表达水平无明显变化。结论：亚硫酸钠可通过增加肝细胞内Ca^2＋水平引起肝细胞内活性氧水平和p53蛋白水平增加，这种影响可能发生在蛋白质翻译或翻译后水平。
- 雷佩玉刘鑫赵春燕仪慧兰王幼萍梁瑞峰白剑英
- 关键词：亚硫酸钠钙离子浓度活性氧P53
- 亚硫酸钠对HepG2细胞毒性的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的观察食品添加剂亚硫酸钠对人肝肿瘤细胞(HepG2)的细胞毒性作用和脂肪变作用。方法向HepG2细胞悬液中分别加入终浓度为0(阴性对照)～10 mmol/L亚硫酸钠溶液染毒24、48和72 h,并设空白对照(无细胞)组和阳性对照组(含1%Tritonx-100的DMEM),每组6个复孔。采用乳酸脱氢酶(LDH)活力测定法检测肝细胞膜的通透性变化,采用CCK-8法检测肝细胞的活性改变,采用油红O染色法观察肝细胞内脂肪沉积情况。结果与阴性对照组相比,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24 h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率增加(P<0.05);而各剂量亚硫酸钠染毒48和72 h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率无显著变化。与阴性对照组相比,各剂量亚硫酸钠染毒24、48、72 h后(除0.039 mmol/L染毒72 h外)HepG2细胞的存活率均显著下降(P<0.05),且细胞存活率随着亚硫酸钠染毒剂量的升高而降低。染毒24、48 h后,部分亚硫酸钠染毒组HepG2细胞内出现了极少量的脂滴,而阴性对照组却未发现;染毒72 h后,10 mmol/L亚硫酸钠染毒组出现明显脂滴。结论一定剂量的亚硫酸钠染毒可增加HepG2细胞膜的通透性,对肝细胞活性有明显的抑制作用,并且可引起肝细胞内甘油三酯的蓄积。
- 赵春燕原福胜白剑英雷佩玉任玉龙
- 关键词：亚硫酸钠乳酸脱氢酶甘油三酯
- 亚硫酸钠对章氏肝细胞TG含量和VLDL分泌的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察食品添加剂亚硫酸钠(Na2SO3)对章氏肝(Chang's liver)细胞甘油三酯(TG)含量和极低密度脂蛋白(VLDL)分泌的影响,进一步探讨其致肝损伤作用的机制。方法经不同浓度的Na2SO3染毒24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性;油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;甘油三酯GPO-POD酶法测定试剂盒检测染毒24 h后细胞内甘油三酯(TG)含量;Western Blotting检测细胞外培养上清中VLDL的分泌。结果 (1)Na2SO3染毒组能够降低细胞存活率,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)油红O染色结果显示,染毒24 h后,10、2.5和0.5 mmol/LNa2SO3处理组细胞内均未出现红色脂滴,即未见细胞出现脂肪变性;(3)染毒24 h后,10 mmol/L Na2SO3处理组细胞内TG含量明显增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);(4)染毒24 h后,Na2SO3各处理组胞外培养上清中VLDL水平与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Na2SO3染毒24 h虽不能诱导肝细胞出现脂肪变性,但高浓度可引起肝细胞中TG含量增加。
- 雷佩玉白剑英赵春燕王幼萍梁瑞峰
- 关键词：亚硫酸钠
