车楠
- 作品数：8 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京医科大学科技发展基金江苏省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SublyticC5b-9诱导Gadd45γ表达对Thy-1肾炎GMCs凋亡病变的影响
- 目的:构建大鼠野生型生长阻滞及DNA损伤诱导基因45γ(growth arrest and DNA damage-inducible gene 45γ, Gadd45γ)和其特异性小发夹RNA (short hairpi...
- 车楠
- 关键词：凋亡
- 文献传递
- 生物标志物Jmjd1c的类风湿性关节炎相关应用
- 本发明涉及生物标志物Jmjd1c的类风湿性关节炎相关应用，具体包括：生物标志物Jmjd1c用于制备类风湿性关节炎的诊断工具或用于制备治疗或预防类风湿性关节炎的药物的用途；含有Jmjd1c检测试剂的类风湿性关节炎诊断工具；...
- 王晓明殷玉叶许桐畅张圣泽车楠
- 大鼠野生型Gadd45γ基因和Gadd45γshRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建大鼠野生型Gadd45γ基因和其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默Gadd45γ基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠Gadd45γ基因的cds区序列或针对其不同位点所设计的4对shRNA序列分别克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/HA或pGCsi.U6.neo.GFP中。在酶切分析及序列测定正确后,用GenEscortTMⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染至大鼠GMCs中,用免疫细胞化学和Western blot检测HA-Gadd45γ融合蛋白的表达及筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明两种重组质粒均构建正确。免疫细胞化学和Western blot分析表明构建的pcDNA3.1/Gadd45γ质粒在大鼠GMCs中能够表达;Gadd45γshRNA-3具有最佳沉默效率。结论:成功构建了大鼠野生型Gadd45γ基因和其特异性的shRNA真核表达质粒,该实验结果为进一步研究Gadd45γ基因的生物学功能奠定了基础。
- 车楠邱文夏梅赵聃王迎伟
- 关键词：SHRNA肾小球系膜细胞
- CVF耗竭补体对大鼠Thy-1肾炎凋亡病变及其Gadd45γ基因表达的影响
- 目的:研究眼镜蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF)耗竭体内补体对Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞(Glomerular mesangial cells,GMCs)凋亡病变及其生长阻滞和DNA损伤诱生蛋...
- 邱文冯雪凤车楠夏梅张艳王迎伟
- 文献传递
- 生物标志物Jmjd1c的类风湿性关节炎相关应用
- 本发明涉及生物标志物Jmjd1c的类风湿性关节炎相关应用，具体包括：生物标志物Jmjd1c用于制备类风湿性关节炎的诊断工具或用于制备治疗或预防类风湿性关节炎的药物的用途；含有Jmjd1c检测试剂的类风湿性关节炎诊断工具；...
- 王晓明殷玉叶许桐畅张圣泽车楠
- 文献传递
- 沉默TSP-1基因对亚溶解型C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的:研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)增殖的影响。方法:设计合成针对TSP-1基因的发夹式siR-NA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,将TSP-1 shRNA(shTSP-1)转染体外培养的大鼠GMC,再给予亚溶解型C5b-9刺激。以实时PCR和蛋白质印迹法检查各组GMC中TSP-1、细胞周期蛋白D2(cyclin D2)及增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA及蛋白表达情况。另用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymi-dine incorporation,3H-TdR)和CCK-8(cell counting kit-8)方法分别检查GMC的DNA合成及细胞数量的改变。最后,观察各组GMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。结果:使用shTSP-1沉默TSP-1基因,对于亚溶解型C5b-9刺激GMC后18 h诱导的cyclin D2和PCNA表达及DNA合成均无显著影响,但是shTSP-1能够抑制亚溶解型C5b-9刺激GMC 54 h时细胞数量的增加,同时能下调由亚溶解型C5b-9刺激GMC引起的α-SMA表达。结论:用shTSP-1沉默GMC中的TSP-1基因,可抑制亚溶解型C5b-9刺激GMC的增殖和α-SMA的合成,shTSP-1对GMC增殖的影响可能与其下调α-SMA的表达有一定关系。
- 吴宜琴车楠冯雪凤邱文王迎伟
- 关键词：肾小球系膜细胞血小板反应蛋白-1增殖Α-平滑肌肌动蛋白
- SLE骨髓MSCs异常表达CCL2调控B细胞的作用及机制研究
- 背景：系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)是一种常见的自身免疫病,异基因间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)移植治疗难治性SLE是一项新...
- 车楠
- 关键词：B淋巴细胞
- 文献传递
- Sublytic C5b-9诱导肾小球系膜细胞产生的TSP-1和TGF-β1对其合成FN和collagenⅣ的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)后,诱生的血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其促进细胞外基质(ex-tracellular matrix,ECM),如纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)合成的影响。方法:体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理并给予sublytic C5b-9刺激,然后分别检查受刺激的GMC合成TSP-1和TGF-β1因子水平,同时检测GMC分泌FN和collagenⅣ的水平。此外,应用人工合成的TSP-1封闭肽段(GGWSHW)和TGF-β1中和抗体处理培养的大鼠GMC,研究TSP-1和TGF-β1在sublytic C5b-9诱导的GMC分泌上述ECM中的作用及其相互关系。结果:培养的大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h,其FN和collagenⅣ表达水平均明显升高。同时,TSP-1蛋白表达和TGF-β1分泌(包括活化的TGF-β1含量)也显著增多。用TSP-1封闭肽段(GGWSHW)处理大鼠GMC后亦能显著抑制由sublytic C5b-9诱导的TGF-β1活化,并减少FN、collagenⅣ的产生。同样用TGF-β1中和抗体处理GMC后也能明显抑制由sublytic C5b-9导致的FN、collagenⅣ的分泌。结论:体外用sublytic C5b-9刺激大鼠GMC,能诱导其ECM分泌与TSP-1和TGF-β1的合成及活化,而sublytic C5b-9促进GMC分泌ECM的机制可能与其诱导TSP-1合成及活化的TGF-β1存在一定的关系。
- 邱文车楠周建博李妍赵聃王迎伟
- 关键词：C5B-9肾小球系膜细胞血小板反应蛋白-1
